Tillväxtfaktor/insulinliknande tillväxtfaktor (GH/IGF)-1-axel hos överviktiga patienter i behandling med orlistat

Ämnen:

Tjugo feta postmenopausala kvinnor (ålder: 53,6±6,2; BMI: 34,1±4,0. Försökspersoner rekryterades, utvärderades och övervakades vid endokrinologiska enheten vid avdelningen för molekylär och klinisk endokrinologi och onkologi. Innan studien påbörjades genomgick alla försökspersoner en första screeningbedömning inklusive en medicinsk historia, fysisk undersökning, laboratorieparametrar och kroppsvikt.

Behandlingsprotokoll:

Vid start av studien erhölls plasmaprover för fasteplasmaglukos, insulin, lipemi (totalt, HDL- och LDL-kolesterol, tryglycerider), GH, IGF-1 och IGFBP-3. Försökspersonerna randomiserades i två behandlingsgrupper: 10 försökspersoner fick normokalorisk diet plus + orlistat (Xenical, Roche, Storbritannien) i en dos av 120 mg tid; 10 försökspersoner fick normokaloridiet utan den extra behandlingen. Varaktigheten av uppföljningen var 10 dagar för varje behandlingsperiod, utan någon tvättning mellan de två perioderna. Varje patient har tilldelats varje grupp. Dynamisk testning som utfördes i slutet av varje period var följande: glukos och insulin efter en OGTT; GH efter GHRH + arginin (GHRH+ARG); postprandial lipemi efter en vanlig fettrik måltid. Under studieperioden bibehöll försökspersonerna sitt vanliga mönster av fysisk aktivitet. Försökspersoner och utredare förblev omedvetna om laboratorieresultat till slutet av studien.

Metoder

Vid baslinjen och i slutet av varje behandlingsperiod mättes även följande parametrar:

1. Antropometriska mätningar, utförda med försökspersonerna endast bära underkläder utan skor. Ståhöjden mättes till närmaste cm med hjälp av en väggmonterad stadiometer. Kroppsvikten bestämdes till närmaste 50 g med användning av en kalibrerad vågstråle. Body mass Index (BMI) beräknades som vikt (kg) dividerat med höjd i kvadrat (m2) och användes som ett index för fetma. Mätningar av midjeomkretsen, ett mått på fettvävnadsfördelning och risk för hjärt-kärlsjukdomar togs i mitten mellan navel och xiphoid.
2. Kroppssammansättningen bestämdes genom konventionell bioelektrisk impedansanalys (BIA) och genom impedansvektoranalys (BIVA). Resistans (R) och reaktans (Xc) mättes av en enda undersökare med en enkelfrekvens 50 kHz bioelektrisk impedansanalysator (BIA 101 RJL, Akern Bioresearch, Firenze, Italien) enligt standard tetrapolär teknik. Alla utvärderingar utfördes av samma operatörsblinda med avseende på patienternas behandling.
3. Blodprov togs mellan 08:00 och 09:00 från antecubital ven efter en natts fasta, med patienten i viloställning. Blodprover för hormonell bestämning centrifugerades omedelbart och serum separerades och lagrades vid -20 C fram till analys. Blodglukosnivåer bestämdes med glukosoxidasmetoden omedelbart efter OGTT. OGTT utfördes med användning av 75 g dextros. Blodprov togs vid 0, 30, 60, 90, 20, 150 och 180 minuter för plasmaglukos- och insulinmätningar. Det normala glykemiska svaret på OGTT definierades enligt kriterierna för expertkommittén för diagnos och klassificering av diabetes mellitus. Total- och HDL-kolesterol och triglyceridkoncentrationer analyserades i plasma med enzymatiska kolorimetriska metoder (Roche Molecular Biochemicals) på en autoanalysator Cobas Mira (ABX Diagnostics). LDL-kolesterol beräknades med användning av Friedewald-formeln. Förändringar i lipidprofilen analyserades också genom att beräkna total/HDL-kolesterolförhållandet. NEFA-koncentrationer i plasma analyserades med den enzymatiska kolorimetriska metoden (Wako Chemicals). Seruminsulin och c-peptid mättes med en fastfas kemiluminescerande enzymimmunanalys med användning av kommersiellt tillgängliga kit (Immunolite Diagnostic Products Co, Los Angeles, CA, USA). Känsligheten för analysen var 0,1 och 0,3 ng/ml. Intra- och interassay-variationskoefficienterna (CVs.) var 2,2 respektive 5,8 % för insulin och 6,3 respektive 8,8 % för c-peptid.

GHRH (1-29, Geref, Serono, Rom, Italien) + ARG (argininhydroklorid, Salf, Bergamo, Italien) utfördes. GH-svaret efter ARG+GHRH klassificerades som bristfälligt (GHD) när GH-toppen var <4,2 µg/L och tillräcklig (GHS) när GH-toppen var >4,2 µg/L. Serum GH-nivåer mättes med immunradiometrisk analys (IRMA) med användning av kommersiellt tillgängliga kit (HGH-CTK-IRMA, Sorin, Saluggia, Italien). Känsligheten för analysen var 0,02 µg/L. Variationskoefficienterna inom och mellan analysen (CV) var 4,5 respektive 7,9 %. Cirkulerande IGF-I-nivåer mätt med IRMA efter etanolextraktion med Diagnostic System Laboratories Inc. (Webster, Texas, USA). Normalintervallen för kvinnor i åldern 31-40, 41-50 och 51-60 år var 100-390, 96-288, 90-250 µg/l, respektive. Analysens känslighet var 0,8 µg/l. Intra-analysen CV var 3,4, 3,0 och 1,5 % för låga, medelhöga respektive höga punkter på standardkurvan. CV:na mellan analyserna var 8,2, 1,5 och 3,7 % för låga, medelhöga och höga punkter på standardkurvan. För syftet med denna studie klassificerades IGF-I-nivåer som normala när de var högre än -2 SD och bristfälliga när de var lägre än -2 SD. IGFBP-3-analysen hade en känslighet på 0,04 ng/l; normalintervallet för en vuxen kvinnlig population i samma åldersintervall som vår studiepopulation var 2,7-5,6 mg/L. Värdena för molekylmassan av IGF-I och IGFBP-3 som användes för beräkningen var 7,649 kDa respektive 28,5 kDa.25 Postprandial lipemi utvärderades på morgonen, efter ≥ 12 timmars fasta och under de 8 timmarna efter standardmåltiden (vid 2, 4, 6 och 8) timmar. Standardmåltiden bestod av en potatisgateau (en paj gjord av potatismos, helmjölk, ägg, ost, skinka och smör) som konsumerades på 15-20 min. Måltiden, som gav 4090 kJ, bestod av 34 % kolhydrater, 51 % fett (34 % mättat fett) och 15 % protein.