Vekstfaktor/insulinlignende vekstfaktor (GH/IGF)-1-akse hos overvektige personer i behandling med orlistat

Emner:

Tjue overvektige postmenopausale kvinner (alder: 53,6±6,2; BMI: 34,1±4,0. Forsøkspersonene ble rekruttert, evaluert og overvåket ved Endokrinologisk enhet ved Institutt for molekylær og klinisk endokrinologi og onkologi. Før studien startet, gjennomgikk alle forsøkspersonene en innledende screeningsvurdering inkludert sykehistorie, fysisk undersøkelse, laboratorieparametre og kroppsvekt.

Behandlingsprotokoll:

Ved studiestart ble det tatt plasmaprøver for fastende plasmaglukose, insulin, lipemi (totalt, HDL- og LDL-kolesterol, tryglyserider), GH, IGF-1 og IGFBP-3. Forsøkspersonene ble randomisert i to behandlingsgrupper: 10 personer fikk normokalorisk diett pluss + orlistat (Xenical, Roche, Storbritannia) i en dose på 120 mg tid; 10 forsøkspersoner fikk normokalorisk diett uten tilleggsbehandlingen. Varigheten av oppfølgingen var 10 dager for hver behandlingsperiode, uten noen utvasking mellom de to periodene. Hver pasient har blitt tildelt hver gruppe. Dynamisk testing utført ved slutten av hver periode var følgende: glukose og insulin etter en OGTT; GH etter GHRH + arginin (GHRH+ARG); post-prandial lipemi etter et standard fettrikt måltid. I løpet av studieperioden opprettholdt forsøkspersonene sitt vanlige fysiske aktivitetsmønster. Forsøkspersoner og etterforskere forble uvitende om laboratorieresultater til slutten av studien.

Metoder

Ved baseline og ved slutten av hver behandlingsperiode ble følgende parametere også målt:

1. Antropometriske målinger, utført med forsøkspersonene kun iført undertøy uten sko. Ståhøyde ble målt til nærmeste cm ved hjelp av et veggmontert stadiometer. Kroppsvekten ble bestemt til nærmeste 50 g ved bruk av en kalibrert balanseskala. Kroppsmasseindeks (BMI) ble beregnet som vekt (kg) delt på høyde i annen (m2) og brukt som en indeks for fedme. Målinger av midjeomkretsen, et mål på fettvevsfordeling og risiko for hjerte- og karsykdommer ble tatt midt mellom navle og xiphoid.
2. Kroppssammensetning ble bestemt ved konvensjonell bioelektrisk impedansanalyse (BIA) og ved impedansvektoranalyse (BIVA). Motstand (R) og reaktans (Xc) ble målt av en enkelt etterforsker med en enkeltfrekvens 50 kHz bioelektrisk impedansanalysator (BIA 101 RJL, Akern Bioresearch, Firenze, Italia) i henhold til standard tetrapolar teknikk. Alle evalueringer ble utført av den samme operatørens blinde med hensyn til pasientens behandling.
3. Blodprøver ble tatt mellom kl. 08.00 og 09.00 fra antecubital vene etter faste over natten, med pasienten i hvilestilling. Blodprøver for hormonbestemmelse ble umiddelbart sentrifugert, og serum separert og lagret ved -20 C inntil analysen. Blodglukosenivåer ble bestemt ved glukoseoksidasemetoden umiddelbart etter OGTT. OGTT ble utført ved bruk av 75 g dekstrose. Blodprøver ble tatt etter 0, 30, 60, 90, 20, 150 og 180 minutter for plasmaglukose- og insulinmålinger. Den normale glykemiske responsen på OGTT ble definert i henhold til kriteriene til Expert Committee on the Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus. Total- og HDL-kolesterol og triglyseridkonsentrasjoner ble analysert i plasma ved hjelp av enzymatiske kolorimetriske metoder (Roche Molecular Biochemicals) på en autoanalyzer Cobas Mira (ABX Diagnostics). LDL-kolesterol ble beregnet ved å bruke Friedewald-formelen. Endringer i lipidprofil ble også analysert ved å beregne total/HDL-kolesterolforholdet. Plasma NEFA-konsentrasjoner ble analysert ved hjelp av den enzymatiske kolorimetriske metoden (Wako Chemicals). Seruminsulin og c-peptid ble målt ved en fastfase kjemiluminescerende enzymimmunoassay ved bruk av kommersielt tilgjengelige sett (Immunolite Diagnostic Products Co, Los Angeles, CA, USA). Sensitiviteten til analysen var 0,1 og 0,3 ng/ml. Intra- og interassay-variasjonskoeffisientene (CVs.) var henholdsvis 2,2 og 5,8 % for insulin og 6,3 og 8,8 % for henholdsvis c-peptid.

GHRH (1-29, Geref, Serono, Roma, Italia)+ ARG (argininhydroklorid, Salf, Bergamo, Italia) ble utført. GH-responsen etter ARG+GHRH ble klassifisert som mangelfull (GHD) når GH-toppen var <4,2 µg/L og tilstrekkelig (GHS) når GH-toppen var >4,2 µg/L. Serum GH-nivåer ble målt ved immunradiometrisk analyse (IRMA) ved bruk av kommersielt tilgjengelige sett (HGH-CTK-IRMA, Sorin, Saluggia, Italia). Sensitiviteten til analysen var 0,02 µg/L. Intra- og interassay-variasjonskoeffisientene (CVs.) var henholdsvis 4,5 og 7,9 %. Sirkulerende IGF-I-nivåer målt med IRMA etter etanolekstraksjon ved bruk av Diagnostic System Laboratories Inc. (Webster, Texas, USA). Normalområdene for kvinner i alderen 31-40, 41-50 og 51-60 år var henholdsvis 100-390, 96-288, 90-250 µg/l. Sensitiviteten til analysen var 0,8 µg/l. Intra-analyse CVene var 3,4, 3,0 og 1,5 % for henholdsvis lave, middels og høye punkter på standardkurven. CV-ene mellom analyser var 8,2, 1,5 og 3,7 % for lave, middels og høye punkter på standardkurven. For formålet med denne studien ble IGF-I-nivåer klassifisert som normale når de var høyere enn -2 SD og mangelfulle når de var lavere enn -2 SD. IGFBP-3-analysen hadde en sensitivitet på 0•04 ng/l; normalområdet for en voksen kvinnelig populasjon i samme aldersgruppe som vår studiepopulasjon var 2,7-5,6 mg/L. Verdiene for molekylmassen til IGF-I og IGFBP-3 brukt for beregningen var henholdsvis 7,649 kDa og 28,5 kDa.25 Post-prandial lipemi ble evaluert om morgenen, etter ≥ 12 timers faste, og i løpet av 8 timer etter standardmåltidet (ved 2, 4, 6 og 8) timer. Standardmåltidet besto av en potetgateau (en pai laget av potetmos, helmelk, egg, ost, skinke og smør) som ble fortært på 15-20 min. Måltidet, som ga 4090 kJ, var sammensatt av 34 % karbohydrater, 51 % fett (34 % mettet fett) og 15 % protein.