がんバイオマーカーのアッセイ開発

参加候補者には臨床チームまたは研究チームのメンバーがアプローチし、この研究に参加することに興味があるかどうかを尋ねられます。 参加者情報シートが処理され、個人と話し合い、この研究の関与、リスク、利点を強調します。 特に、研究への参加によってボランティアの現在の治療法が変更されることはありません。 決定するのに十分な時間を残した後、潜在的な参加者は同意書に署名するよう求められます。

インフォームドコンセントを得た後、ボランティアは私たちの研究のために血液、尿、喀痰（唾液）、または気管支肺胞洗浄などの他の体液を提供するよう求められ、同時に個人の通常の医療ケアの一環として他の分析が行われます。 一部の参加者がすでに既存の試験で新規薬物療法を受ける予定である場合、プログラムされた治療の前後に2回、少量の血液、唾液、尿、またはその他の体液の提供をお願いする場合があります。 サンプルは参加者の定期健康診断の実施と同時に収集されます。

生物学的検体は、サンプルの種類と検査仕様に従って収集および保管されます。その後、研究チームのメンバーによって液体部分からの細胞成分と可溶性因子の分離が行われます。 分離手法はサンプルソースによって異なります。

開発する特定のアッセイに応じて、タンパク質含有量はフローサイトメトリー、酵素結合免疫測定法 (ELISA)、またはビーズベースの Luminex® テクノロジーを含むその他の免疫測定法によって分析されます。 これらすべての実験技術では、特定の抗体と抗原の間の独特の相互作用により、複雑なタンパク質混合物内の単一または複数の標的タンパク質の同定が可能になります。

フローサイトメトリーは、一部の色素の蛍光特性を使用して、健康な細胞または癌細胞の表面または内部の特定のマーカーの存在を評価します。 これは、特定の細胞集団の頻度や細胞上の特定のマーカーの強度を確立するのに役立ちます。 同様に、ELISA では可溶性物質の定性的および定量的な特性評価が可能です。懸濁液中の複数の標的タンパク質は、同じサンプル内で Luminex® 手順を使用して評価できます。 イムノブロッティングなどの他の生化学的手法を使用して、細胞表面または細胞内に存在するタンパク質の有無を決定することができます。

タンパク質に加えて、生体分子技術により、DNA、RNA、またはマイクロRNAを含む核酸含有量を評価できます。

研究データは、フローサイトメトリーによる結果のフローサイトメトリースタンダード（FCS）ファイル、画像、データテーブルなどのソフトウェア固有のファイルとして、これらの研究室の方法によって生成されます。 感度、検出限界、アッセイのばらつきなどのパラメーターも評価され、数値表で報告されます。 アッセイの開発中、2 つのグループを区別できる堅牢なテストを確立するために、健康なドナーとがん患者の両方からのデータが標準的な統計パッケージと比較されます。