血液透析患者の筋肉消耗

仮説 尿中の 3-メチルヒスチジンの測定は、臨床現場でタンパク質分解を評価するための簡単なツールです。 ただし、腸の異化作用を反映している可能性があるため、筋肉のタンパク質分解に完全に特異的というわけではありません. さらに、その投与量は、特に無尿の場合の腎障害のある患者には使用できません。 筋肉生検の達成またはタンパク質の全体的な動態の測定とは別に、筋肉タンパク質分解を測定するための単純で再現可能な診断ツールはまだ存在していません。 今回の研究により、研究者らは、炎症誘発性サイトカイン転写産物の増加を含む、筋肉タンパク質分解の活性化に関連する特定のトランスクリプトームプロファイルを患者の血液で特定できると期待しています。

CKD のげっ歯類モデルを使用して、主要なタンパク質分解システムと、尿毒症によって引き起こされる筋肉消耗に関与するシグナル経路を特定しました。 これらの発見は、人間の研究で確認する必要があります。 また、筋萎縮の他のアクターが人間で特定される可能性があります。 特に、これまでのところ、どのE2が筋萎縮に関与しているかを決定するために行われた研究はほとんどなく、研究者の知る限り、CKDに関与している人は誰もいません. 最後に、チームによってヒトでアクチンのみが明確に特定されたため、筋肉のプロテアソーム基質に関するデータは限られています。 研究者らは、血液透析で治療された患者において、MURF1およびMAFbxを含む酵素E2、E3、およびプロテアソームサブユニットの発現の増加によるプロテアソームシステムの活性化を期待しています。 調査官は、UPS と連携して機能すると考えられるカスパーゼ システムの活性化も観察できました。

材料と方法 2.1。 母集団 実験は、プログラムされた整形外科手術（陰性対照）、癌（陽性対照）および血液透析患者の間に得られた血液サンプルおよびヒト筋肉生検を使用して行われます。 このトランスレーショナル リサーチ プログラムは既に承認されており (DGS 2008-A00479-46)、患者の参加は既に開始されています。 グループごとに最大 15 人の患者が含まれます。 包含基準と除外基準は、目的 (コントロールのための病状がないことなど) および法律 (書面による同意など) に従って設定されました。 これまでに32人の患者が含まれており、生検は液体窒素で保存されています。 血液サンプルは、Paxgene RNA チューブを使用して手術の直前に収集され、分析まで製造元の指示に従って保存されます。

2.2. 血液サンプル Paxgene RNA 抽出キットを使用して血液から総 RNA を抽出し、RNAseq 2.3 で分析します。 筋生検 2.3.1. トランスクリプトーム分析 市販のキットを使用して、ヒト筋肉生検から全 RNA を抽出します。 研究者はまず、既知の筋肉マーカーががん患者の生検 (陽性対照) でアップレギュレートされていることを確認し、血液透析患者の筋肉生検でそれらのレベルに対処します。 したがって、qRT-PCR UBE2B、UBE2D2、MaFbx、MuRF1、Ozz、ASB2、E4B、Nedd4、Mdm2、および 26S プロテアソーム サブユニットを実行します。

2.3.2. プロテオミクス解析プロテオミクス解析は、ショットガン分光分析を使用して実行されます