血液透析患者的肌肉萎缩

假设测量尿液 3-甲基组氨酸是一种在临床实践中评估蛋白水解的简单工具。 然而，它并不完全特定于肌肉蛋白水解，因为它可能反映了肠道分解代谢。 此外，其剂量不能用于肾功能不全的患者，尤其是无尿的患者。 除了实现肌肉活检或测量蛋白质的整体动力学外，还不存在用于测量肌肉蛋白水解的简单且可重复的诊断工具。 通过本研究，研究人员希望在患者的血液中确定与肌肉蛋白水解激活相关的特定转录组学特征，包括增加的促炎细胞因子转录物。

CKD 的啮齿动物模型用于识别与尿毒症引起的肌肉萎缩有关的主要蛋白水解系统和信号通路。 这些发现需要在人类研究中得到证实。 此外，可以在人类中识别出其他肌肉萎缩因素。 值得注意的是，到目前为止，很少进行研究来确定哪些 E2 与肌肉萎缩有关，并且据研究人员所知，在 CKD 中无人知晓。 最后，关于肌肉蛋白酶体底物的数据是有限的，因为该团队只在人类中清楚地识别出肌动蛋白。 研究人员预计，在接受血液透析治疗的患者中，随着蛋白酶 E2、E3（包括 MURF1 和 MAFbx）以及蛋白酶体亚基的表达增加，蛋白酶体系统将被激活。 研究人员还可以观察到被认为与 UPS 协同工作的半胱天冬酶系统的激活。

材料和方法 2.1。 人口实验将使用在程序化骨科手术（阴性对照）、癌症（阳性对照）和血液透析患者期间获得的血液样本和人体肌肉活组织检查进行。 该转化研究计划已被接受 (DGS 2008-A00479-46) 并且已经开始纳入患者。 每组最多包括 15 名患者。 纳入和排除标准是根据目标（没有任何病理学控制等）和立法（书面同意等）制定的。 到目前为止，已经纳入了 32 名患者，活检组织保存在液氮中。 血液样本是在手术前使用 Paxgene RNA 管收集的，并按照制造商的说明储存直至分析。

2.2. 血液样本 将使用 Paxgene RNA 提取试剂盒从血液中提取总 RNA，并通过 RNAseq 2.3 进行分析。 肌肉活检 2.3.1。 转录组学分析 将使用商业试剂盒从人体肌肉活组织检查中提取总 RNA。 研究人员将首先验证已知的肌肉标记物在癌症患者活检（阳性对照）中是否上调，并解决它们在血液透析患者肌肉活检中的水平。 因此，我们将对 UBE2B、UBE2D2、MaFbx、MuRF1、Ozz、ASB2、E4B、Nedd4、Mdm2 和 26S 蛋白酶体亚基进行 qRT-PCR。

2.3.2. 蛋白质组学分析 蛋白质组学分析将使用散弹枪光谱分析法进行