神経炎症性疾患におけるERK5およびPKM2キナーゼの発現プロファイル。 (NEUROKINASE)

病理学の開始時にＲＲ ＭＳまたはＧＢＳについて追跡された患者におけるＥＲＫ５およびＰＫＭ２キナーゼの発現の研究​​が評価される。

患者を 4 つのグループに分類するために、MS および GBS の通常の診断精密検査が行われます。

• グループ 1 : コントロール グループ。 MSまたはGBSの基準を満たさず、鑑別診断が行われていない患者。

サブグループ 1a および 1b は、グループ 2 および 3 とのそれぞれのペアリングによって形成されます。

• グループ 2 : マクドナルド基準で確認された RR MS の患者 (2017)
• グループ 3 : 通常の臨床的および電気生理学的徴候の関連によって確認された GBS 患者。
• グループ 4 : 症状を説明するために鑑別診断が確認された患者。 これらの患者は分析から除外されます。

追加の血液サンプル (25 mL) と脳脊髄液 (CSF) サンプル (2 mL) をすべての患者から採取して、この研究の検査パラメータを研究します。 末梢血単核細胞 (PBMC) と好中球は、Percoll 勾配を使用して血液から分離されます。 グループ 4 のサンプルは分析されません。

分析は、グループ 2 と 3、グループ 1a と 2、および 1b と 3 の間の検査パラメータの比較に焦点を当てます。

1. / ERK5 および PKM2 キナーゼの発現

   研究者は、ERK5 と PKM2 の発現を RT-qPCR で分析して RNA レベルのトランスクリプトームを調査し、ウエスタンブロットと ELISA で 2 つのキナーゼのリン酸化型と全型を調査したいと考えています。

   RT-qPCR では、RNA 抽出、cDNA への逆転写、および事前に設計された特定のプライマーを使用した ERK5 および PKM2 をコードする遺伝子の増幅が必要です。 結果は、HPRT 遺伝子のプライマーで得られた結果と比較されます。

2. / 炎症促進作用と抗炎症作用のバランスに関する研究

   研究者は、リンパ球の表現型を研究し、サイトカインのレベルを決定することにより、炎症促進活性と抗炎症活性のバランスを特徴付けたいと考えています。

   PBMCからのフローサイトメトリーにより、リンパ球の表現型が実行されます。 調査対象の集団には、Th1、Th2、Th9、Th17、Th22、Treg、および TFH 集団が含まれます。

   主に炎症性サイトカインのパネルは、血漿および CSF で ELISA によって研究されます。 パネルには次のサイトカインが含まれます: IL17、TNF、IL6、Il 1β、IL 10、IL33、IL12、IL 23

3. / メタボローム解析

   ヒト メタボロームに関するデータベースには 40,000 を超える代謝産物が含まれており、教師ありおよび教師なしの統計分析手法によって、さまざまな病理学的状況における代謝プロファイルを確立できます。 メタボローム分析は、血漿およびCSFから実行されます。 これらの分析は、Metabohub ネットワーク (血漿分析用の MetaboHUB-Clermont および CSF 分析用の MetaboHUB-Saclay) による質量分析 (LC-MS) と組み合わせた液体クロマトグラフィーによって実行されます。

4. / ニューロフィラメント軽鎖 (NfL) の測定

血液中、特にCSF中のニューロフィラメントの測定に関心が高まっています。 ニューロフィラメントの高レベルは、最初のメカニズムに関係なく、ニューロンの喪失の証拠です。 ニューロ フィラメント軽鎖 (NfL) は、軸索の損失を測定する最も適切な形式のようです。 MS では、急性再発の最初の 2 か月間に NfL の増加が観察されました。 逆に、末梢脱髄疾患における NfL レベルの動態に関するデータはほとんどありません。

治験責任医師らは、血中および CSF 中の NfL レベルを調査して、GBS をフォローしている患者の NfL レベルが上昇しているかどうかを判断し、これらの患者（グループ 3）の NfL レベルを MS をフォローしている患者（グループ 2）と比較する予定です。