脂質パラメーターに対する EVOO の影響を評価するための多施設パイロット研究 (EVOO)

研究デザイン:

エキストラバージン オリーブ オイル (EVOO) が心血管疾患 (CVD) と診断された被験者の HDL コレステロール値と抗炎症マーカーにプラスの効果があるかどうかを判断し、ポリフェノール濃度がそれらの効果に比例します。 被験者は、毎日低ポリフェノール濃度の EVOO または高ポリフェノール濃度の EVOO のいずれかを摂取する連続 28 日間の期間 (間に 14 日間のウォッシュアウトを含む) を完了します。 二重盲検法では、各被験者は、研究期間の間に14日間のウォッシュアウトで自分のコントロールになります。

仮説：

対象者は、食事に EVOO を追加することにより、HDL コレステロール値、他の脂質パラメーター、および炎症マーカーの大幅な改善を実証します。 ポリフェノール濃度が高い EVOO を摂取すると、ポリフェノール濃度が低い EVOO を摂取するよりも、これらのパラメーターが改善されます。

具体的な目的:

1. EVOOの毎日の摂取が28日後にHDLコレステロールレベルを上昇させるかどうかを判断する.
2. 高ポリフェノール濃度の EVOO を毎日摂取すると、HDL コレステロール値が低ポリフェノール濃度の EVOO よりも上昇するかどうかを判断する (同じ投与量)。
3. この種の研究の実現可能性と、より長期にわたる大規模な研究の可能性を判断すること。

研究方法:

被験者を登録する前に、研究スタッフは病院の栄養サービス部門を通じてジェネリック ブランドの EVOO を注文します。 同時に、ポリフェノール濃度が高いと報告されているEVOOを地元のオリーブオイル専門店から取り寄せます。

オリーブオイルのテスト: Eurofins Microbiology Laboratories, Inc. は、調剤前にオリーブオイルの各バッチのポリフェノール濃度のサンプルをテストします。 この方法は、メタノール溶液によるオリーブ油からのバイオフェノール性微量極性化合物の直接抽出と、その後の HPLC-MS/MS による定量化に基づいています。 市販のポリフェノール標準を使用して、オリーブ オイルに最も多く含まれるフェノール化合物に焦点を当てて、個々のフェノール化合物を特定および定量します。

研究対象者の血液検査: 約 20 ml の血液が 5 回の異なる研究訪問で得られ、合計 100 ml の血液が 12 週間にわたって得られます。

ベースラインの血清および血漿血液サンプルは、オリーブオイル補給の前に採取されます。 フォローアップの血液サンプルは、他の 4 つの時点で採取されます。

血清総脂質プロファイルは、メイン医療センター研究所 (MMCRI) の質量分析コアで評価されます。 さらに、CRP、IL-6 および TNFalpha を含む炎症マーカーは、酵素結合免疫吸着アッセイ (ELISA) によって決定されます。 血液10mlを赤キャップチューブに採取して血清を調製する。 血液を室温で 15 ～ 20 分間凝固させた後、1500 ～ 2000 g で遠心分離し、上清をピペットで取り、-65 ºC で凍結保存します。 血漿サンプルは、10mlのACD（クエン酸デキストロース）抗凝固剤チューブに収集された6mlの血液から調製され、1時間以内に処理されます。 白血球画分は、1,500 ～ 2000g で 15 分間遠心分離することによって調製されます。 白血球の中間層をピペットで取り、-60ºC で凍結保存します。 研究者は、白血球のリピドミックプロファイルとカベオリン-1 タンパク質レベルを決定します。

総コレステロール、HDL、LDL、およびトリグリセリドをテストする脂質パネルは、地元の検査室で残りの血液サンプルで実行されます。 血液検査に関連するすべての費用は、MaineHealth Cardiology Service Line からの研究資金で支払われます。

その他の試験測定: 体重、血圧、心拍数などのバイタル サインは、来院ごとに測定されます。

被験者は、EVOOの各用量を記録した研究日誌を維持します。 彼らは、研究チームから与えられたカップで 1 オンスのオリーブ オイルを測り、パン、スムージー、またはプレーンで飲むように求められます。 EVOO消費の遵守率は、日記から計算されます（％）。 研究コンプライアンスは、返品された製品のオンス (%) によっても測定されます。 被験者は 28 日間をカバーするために 30 オンスの EVOO を受け取ります。したがって、各研究アームの後に返された 2 オンスのオリーブ オイルは 100% コンプライアンスとしてカウントされます。

サンプルサイズの考慮事項:

これはパイロット研究であるため、研究者は文献で入手可能なデータを利用してサンプルサイズを推定しました。 高齢者の平均余命に対する HDL の影響を評価した研究では、85 歳以上生きた被験者の平均 HDL が 47.5、標準偏差が 12.1 であることが報告されました。 この推定値を使用し、2 つの研究グループ間で HDL に 3 ポイントの差があると予想すると、研究者は 276 人の参加者を募集する必要があります。 ただし、これはパイロット研究であり、研究者の資金が限られているため、90 人の被験者を募集することから始めます。 将来、助成金から追加の資金が確保されれば、80% という望ましい検出力を達成するために研究を拡大することができます。

データ分析：

この研究の目的のために、調査員は、低ポリフェノール濃度と高ポリフェノール濃度の EVOO の両方を摂取した被験者の HDL および心血管の健康の他のバイオマーカーの違いを検出しようとします。 医療記録番号は、分析用のデータセットには含まれません。 記述統計を使用して、研究に含まれる被験者の人口統計学的および臨床的特徴を要約します。連続変数は平均±標準偏差として、カテゴリ変数は頻度/全体の割合として表されます。 スチューデント t 検定とカイ 2 乗検定を実施して、低ポリフェノール EVOO グループと高ポリフェノール EVOO グループの間でデータを比較します。 消費されたポリフェノールのレベルによる経時的な HDL の変化を示すために、時系列プロットが作成されます。