Een multicenter pilotstudie om het effect van EVOO op lipideparameters te evalueren (EVOO)

Studie ontwerp:

Een dubbelblinde pilotstudie in meerdere centra om te bepalen of extra vergine olijfolie (EVOO) een positief effect heeft op het HDL-cholesterolgehalte en ontstekingsremmende markers voor personen met de diagnose hart- en vaatziekten (HVZ) en om te bepalen of de polyfenolconcentratie evenredig met die effecten. Proefpersonen zullen opeenvolgende periodes van 28 dagen doorlopen (met een wash-out van 14 dagen ertussen) waarin ze dagelijks de lage polyfenolconcentratie EVOO of de hoge polyfenolconcentratie EVOO consumeren. Op een dubbelblinde manier zal elke proefpersoon zijn of haar eigen controle zijn met een uitspoeling van 14 dagen tussen de studieperiodes.

Hypothese:

Proefpersonen zullen grotere verbeteringen in HDL-cholesterolwaarden, andere lipideparameters en ontstekingsmarkers laten zien door EVOO aan hun dieet toe te voegen. Consumptie van EVOO met hoge polyfenolconcentratie zal deze parameters meer verbeteren dan consumptie van EVOO met lage polyfenolconcentratie.

Specifieke doelstellingen:

1. Om te bepalen of dagelijkse consumptie van EVOO het HDL-cholesterolgehalte na 28 dagen zal verhogen.
2. Om te bepalen of de dagelijkse consumptie van een hoge polyfenolconcentratie EVOO het HDL-cholesterolgehalte meer verhoogt dan EVOO met een lage polyfenolconcentratie (dezelfde dosering).
3. Om de haalbaarheid van dit type onderzoek en de mogelijkheid van een groter onderzoek over een langere periode te bepalen.

Studiemethoden:

Voorafgaand aan het inschrijven van proefpersonen, zal het studiepersoneel een generiek merk EVOO bestellen via de afdeling voedingsdiensten van het ziekenhuis. Tegelijkertijd zal EVOO met een gerapporteerde hoge polyfenolconcentratie worden besteld bij een plaatselijke olijfoliespeciaalzaak.

Olijfolie testen: Eurofins Microbiology Laboratories, Inc. zal een monster van elke partij olijfolie testen op polyfenolconcentratie voorafgaand aan de uitgifte. De methode is gebaseerd op directe extractie van de biofenolische kleine polaire verbindingen uit olijfolie door middel van een methanoloplossing en daaropvolgende kwantificering door HPLC-MS/MS. In de handel verkrijgbare polyfenolstandaarden worden gebruikt om individuele fenolverbindingen te identificeren en te kwantificeren, waarbij de nadruk ligt op de verbindingen die het meest voorkomen in olijfolie.

Bloedonderzoek bij de proefpersoon: Er zal ongeveer 20 ml bloed worden afgenomen bij vijf verschillende studiebezoeken, voor een totaal van 100 ml bloed gedurende 12 weken.

Baseline serum- en plasmabloedmonsters zullen worden genomen voorafgaand aan suppletie met olijfolie. Op vier andere tijdstippen worden vervolgbloedmonsters genomen.

Serum totale lipidenprofielen zullen worden geëvalueerd in de massaspectrometrische kern van het Maine Medical Center Research Institute (MMCRI). Bovendien zullen inflammatoire markers, waaronder CRP, IL-6 en TNFalpha, worden bepaald door middel van een enzym-gekoppelde immunosorbenttest (ELISA). Serum wordt bereid door 10 ml bloed te verzamelen in buisjes met rode dop. Men laat het bloed 15-20 minuten stollen bij kamertemperatuur en vervolgens wordt het gecentrifugeerd bij 1500 - 2000 g, en het supernatant wordt afgepipetteerd en ingevroren bewaard bij -65°C. Plasmamonsters worden bereid uit 6 ml bloed dat is verzameld in 10 ml ACD (Acid Citrate Dextrose) antistollingsbuisjes en worden binnen 1 uur verwerkt. De fractie witte bloedcellen wordt bereid door gedurende 15 minuten te centrifugeren bij 1500-2000 g. De middelste laag witte bloedcellen wordt afgepipetteerd en ingevroren bewaard bij -60ºC. De onderzoekers zullen de lipidomische profielen van witte bloedcellen en de caveolin-1-eiwitniveaus bepalen.

Lipidenpanels, die totaal cholesterol, HDL, LDL en triglyceriden testen, zullen worden uitgevoerd op resterende bloedmonsters in het lokale laboratorium. Alle aan bloedonderzoek gerelateerde kosten worden betaald met studiegelden van de MaineHealth Cardiology Service Line.

Andere studiemaatregelen: Vitale functies, waaronder lichaamsgewicht, bloeddruk en hartslag, worden bij elk bezoek gemeten.

De proefpersonen houden een studiedagboek bij waarin elke dosis EVOO wordt gedocumenteerd. Ze zullen worden gevraagd om 1 ounce olijfolie af te meten in een kopje dat hen door het onderzoeksteam is gegeven, en het te consumeren met brood, in een smoothie of door het gewoon te drinken. Naleving van het EVOO-verbruik wordt berekend op basis van het dagboek (%). De naleving van de studie wordt ook gemeten aan de hand van ons teruggestuurd product (%). Proefpersonen krijgen 30 ons EVOO om 28 dagen te dekken, daarom wordt 2 ons geretourneerde olijfolie na elke onderzoeksarm geteld als 100% naleving.

Overwegingen bij de grootte van de steekproef:

Aangezien dit een pilotstudie is, gebruikten de onderzoekers gegevens uit de literatuur om de steekproefomvang te schatten. Een studie die het effect van HDL op de levensverwachting op oudere leeftijd evalueerde, rapporteerde een gemiddelde HDL van 47,5 met een standaarddeviatie van 12,1 bij proefpersonen die ouder werden dan 85 jaar. Met behulp van deze schatting, en anticiperend op het vinden van een verschil van 3 punten in HDL tussen de twee studiegroepen, moeten de onderzoekers 276 deelnemers rekruteren. Aangezien dit echter een pilootstudie is en de onderzoekers beperkte financiële middelen hebben, zullen ze beginnen met het rekruteren van 90 proefpersonen. Met in de toekomst aanvullende financiering uit een beurs, zou het onderzoek kunnen worden uitgebreid om het gewenste vermogen van 80% te bereiken.

Gegevensanalyse:

Voor het doel van deze studie zullen de onderzoekers proberen verschillen in HDL en andere biomarkers van cardiovasculaire gezondheid te detecteren bij proefpersonen die zowel een lage polyfenolconcentratie als een hoge polyfenolconcentratie EVOO consumeerden. Medisch dossiernummers worden niet opgenomen in de dataset voor analyse. Beschrijvende statistieken zullen worden gebruikt om de demografische en klinische kenmerken van proefpersonen die in het onderzoek zijn opgenomen, samen te vatten, met continue variabelen gepresenteerd als een gemiddelde +- standaarddeviatie en categorische variabelen als frequenties/percentages van het totaal. Er zullen student-t-testen en chi-kwadraat-testen worden uitgevoerd om gegevens tussen EVOO-groepen met laag en hoog polyfenol te vergelijken. Er zal een tijdreeksgrafiek worden gegenereerd om de verandering in HDL in de loop van de tijd aan te tonen op basis van het verbruikte polyfenolgehalte.