지질 매개변수에 대한 EVOO의 효과를 평가하기 위한 다기관 파일럿 연구 (EVOO)

연구 설계:

엑스트라 버진 올리브 오일(EVOO)이 심혈관 질환(CVD) 진단 대상자의 HDL 콜레스테롤 수치와 항염증 마커에 긍정적인 영향을 미치는지 확인하고 폴리페놀 농도가 그 효과에 비례합니다. 피험자는 폴리페놀 농도가 낮은 EVOO 또는 폴리페놀 농도가 높은 EVOO를 매일 섭취하는 연속 28일 기간(사이에 14일 휴약)을 완료합니다. 이중 눈가림 방식으로 각 피험자는 연구 기간 사이에 14일 휴약 기간을 두고 자신의 대조군이 됩니다.

가설:

대상자는 식단에 EVOO를 추가함으로써 HDL 콜레스테롤 수치, 기타 지질 매개변수 및 염증 지표에서 더 큰 개선을 보일 것입니다. 폴리페놀 농도가 높은 EVOO를 섭취하면 폴리페놀 농도가 낮은 EVOO를 섭취하는 것보다 이러한 매개변수가 더 향상됩니다.

구체적인 목표:

1. 매일 EVOO를 섭취하면 28일 후 HDL 콜레스테롤 수치가 증가하는지 확인합니다.
2. 폴리페놀 농도가 높은 EVOO의 일일 섭취가 폴리페놀 농도가 낮은 EVOO(동일 투여량)보다 HDL 콜레스테롤 수치를 더 높이는지 확인하기 위해.
3. 이러한 유형의 연구의 타당성과 장기간에 걸친 대규모 연구의 가능성을 결정합니다.

연구 방법:

피험자를 등록하기 전에 연구 직원은 병원 영양 서비스 부서를 통해 제네릭 브랜드 EVOO를 주문합니다. 동시에 폴리페놀 농도가 높은 것으로 보고된 EVOO는 현지 올리브 오일 전문점에서 주문할 예정입니다.

올리브 오일 테스트: Eurofins Microbiology Laboratories, Inc.는 분배 전에 폴리페놀 농도에 대해 올리브 오일의 각 배치 샘플을 테스트합니다. 이 방법은 메탄올 용액을 사용하여 올리브 오일에서 바이오페놀 소수 극성 화합물을 직접 추출한 후 HPLC-MS/MS로 정량화하는 것을 기반으로 합니다. 상업적으로 이용 가능한 폴리페놀 표준품은 올리브 오일에 가장 풍부한 페놀 화합물에 초점을 맞춰 개별 페놀 화합물을 식별하고 정량화하는 데 사용됩니다.

연구 피험자 혈액 검사: 12주 동안 총 100ml의 혈액에 대해 5번의 다른 연구 방문에서 약 20ml의 혈액을 채취합니다.

베이스라인 혈청 및 혈장 혈액 샘플은 올리브 오일 보충 전에 채취됩니다. 후속 혈액 샘플은 4개의 다른 시점에서 채취됩니다.

혈청 총 지질 프로필은 Maine Medical Center Research Institute(MMCRI)의 질량 분석 코어에서 평가됩니다. 또한 CRP, IL-6 및 TNFalpha를 포함한 염증 마커는 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)에 의해 결정됩니다. 빨간 모자 튜브에 10ml의 혈액을 채취하여 혈청을 준비합니다. 혈액은 실온에서 15-20분 동안 응고되도록 한 다음 1500-2000g에서 원심분리하고 상층액을 피펫팅하여 -65ºC에서 냉동 보관합니다. 혈장 샘플은 10ml ACD(Acid Citrate Dextrose) 항응고제 튜브에 수집된 6ml의 혈액에서 준비되고 1시간 이내에 처리됩니다. 백혈구 분획은 15분 동안 1,500-2000g에서 원심분리하여 준비됩니다. 백혈구의 중간층을 피펫으로 떼어내어 -60ºC에서 냉동 보관합니다. 조사관은 카베올린-1 단백질 수준뿐만 아니라 백혈구의 지질 프로필을 결정할 것입니다.

총 콜레스테롤, HDL, LDL 및 트리글리세리드를 테스트하는 지질 패널은 지역 실험실에서 남은 혈액 샘플에 대해 실행됩니다. 모든 혈액 검사 관련 비용은 MaineHealth Cardiology Service Line의 연구 기금으로 지급됩니다.

기타 연구 측정: 체중, 혈압 및 심박수를 포함하는 활력 징후를 방문할 때마다 측정합니다.

피험자는 EVOO의 각 용량을 기록하는 연구 일지를 유지합니다. 그들은 연구팀이 그들에게 준 컵에 올리브 오일 1온스를 계량하여 빵과 함께 먹거나 스무디에 넣거나 그대로 마시도록 요청받을 것입니다. EVOO 소비 준수 여부는 다이어리(%)에서 계산됩니다. 연구 순응도는 반환된 제품의 온스(%)로 측정됩니다. 피험자는 28일 동안 30온스의 EVOO를 받습니다. 따라서 각 연구 팔 이후 반환된 올리브 오일 2온스는 100% 준수로 계산됩니다.

샘플 크기 고려 사항:

이것은 파일럿 연구이므로 연구자들은 표본 크기를 추정하기 위해 문헌에서 사용할 수 있는 데이터를 활용했습니다. HDL이 노년기 기대 수명에 미치는 영향을 평가한 연구에서는 85세 이상 산 피험자 중 평균 HDL이 47.5이고 표준 편차가 12.1이라고 보고했습니다. 이 추정치를 사용하고 두 연구 그룹 사이에서 HDL의 3포인트 차이를 찾을 것으로 예상하여 연구자는 276명의 참가자를 모집해야 합니다. 그러나 이것은 파일럿 연구이고 연구자들은 자금이 제한되어 있기 때문에 90명의 피험자를 모집하는 것으로 시작할 것입니다. 향후 보조금에서 추가 자금을 확보하면 원하는 검정력 80%를 달성하기 위해 연구를 확장할 수 있습니다.

데이터 분석:

이 연구의 목적을 위해 조사관은 낮은 폴리페놀 농도와 높은 폴리페놀 농도 EVOO를 모두 섭취한 대상에서 HDL 및 심혈관 건강의 다른 바이오마커의 차이를 감지하려고 시도할 것입니다. 의료 기록 번호는 분석용 데이터 세트에 포함되지 않습니다. 기술 통계는 연구에 포함된 피험자의 인구통계학적 및 임상적 특성을 요약하는 데 사용되며, 연속 변수는 평균 ± 표준 편차로 표시되고 범주형 변수는 전체의 빈도/백분율로 표시됩니다. 낮은 폴리페놀 EVOO 그룹과 높은 폴리페놀 EVOO 그룹 간의 데이터를 비교하기 위해 스튜던트 t 테스트 및 카이제곱 테스트가 수행됩니다. 소비된 폴리페놀 수준에 따라 시간 경과에 따른 HDL의 변화를 보여주기 위해 시계열 도표가 생성됩니다.