Une étude pilote multicentrique pour évaluer l'effet de l'EVOO sur les paramètres lipidiques (EVOO)

Étudier le design:

Une étude pilote multicentrique en double aveugle pour déterminer si l'huile d'olive extra vierge (EVOO) a un effet positif sur les niveaux de cholestérol HDL et les marqueurs anti-inflammatoires chez les sujets diagnostiqués avec une maladie cardiovasculaire (MCV) et pour déterminer si la concentration en polyphénols est proportionnelle à ces effets. Les sujets termineront des périodes consécutives de 28 jours (avec un sevrage de 14 jours entre) au cours desquelles ils consommeront quotidiennement l'EVOO à faible concentration en polyphénols ou l'EVOO à forte concentration en polyphénols. En double aveugle, chaque sujet sera son propre témoin avec un sevrage de 14 jours entre les périodes d'étude.

Hypothèse:

Les sujets démontreront de plus grandes améliorations des niveaux de cholestérol HDL, d'autres paramètres lipidiques et des marqueurs inflammatoires en ajoutant de l'EVOO à leur alimentation. La consommation d'EVOO à forte concentration en polyphénols améliorera davantage ces paramètres que la consommation d'EVOO à faible concentration en polyphénols.

Objectifs spécifiques :

1. Déterminer si la consommation quotidienne d'EVOO augmentera les niveaux de cholestérol HDL après 28 jours.
2. Déterminer si la consommation quotidienne d'EVOO à concentration élevée en polyphénols augmente davantage les niveaux de cholestérol HDL que l'EVOO à faible concentration en polyphénols (même dosage).
3. Déterminer la faisabilité de ce type d'étude et la possibilité d'une étude plus large sur une période plus longue.

Méthodes d'étude :

Avant d'inscrire les sujets, le personnel de l'étude commandera une marque générique EVOO par l'intermédiaire du département des services nutritionnels de l'hôpital. Dans le même temps, l'EVOO avec une concentration élevée en polyphénols sera commandée dans un magasin spécialisé dans l'huile d'olive locale.

Analyse de l'huile d'olive : Eurofins Microbiology Laboratories, Inc. testera un échantillon de chaque lot d'huile d'olive pour la concentration en polyphénols avant la distribution. La méthode est basée sur l'extraction directe des composés polaires mineurs biophénoliques de l'huile d'olive au moyen d'une solution de méthanol et la quantification ultérieure par HPLC-MS/MS. Les étalons de polyphénols disponibles dans le commerce sont utilisés pour identifier et quantifier les composés phénoliques individuels, en se concentrant sur ceux qui sont les plus abondants dans les huiles d'olive.

Test sanguin du sujet de l'étude : environ 20 ml de sang seront prélevés lors de cinq visites d'étude différentes pour un total de 100 ml de sang sur 12 semaines.

Des échantillons de sérum et de plasma de base seront prélevés avant la supplémentation en huile d'olive. Des échantillons de sang de suivi seront prélevés à quatre autres moments.

Les profils lipidiques totaux sériques seront évalués dans le noyau de spectrométrie de masse du Maine Medical Center Research Institute (MMCRI). De plus, les marqueurs inflammatoires, y compris la CRP, l'IL-6 et le TNFalpha, seront déterminés par dosage immuno-enzymatique (ELISA). Le sérum sera préparé en recueillant 10 ml de sang dans des tubes à bouchon rouge. Le sang sera autorisé à coaguler pendant 15 à 20 minutes à température ambiante, puis centrifugé à 1 500 - 2 000 g, et le surnageant pipeté et conservé congelé à -65 °C. Des échantillons de plasma seront préparés à partir de 6 ml de sang prélevé dans des tubes d'anticoagulant ACD (Acid Citrate Dextrose) de 10 ml et traités en 1h. La fraction de globules blancs sera préparée par centrifugation à 1 500-2 000 g pendant 15 minutes. La couche intermédiaire de globules blancs sera prélevée à la pipette et conservée congelée à -60 °C. Les chercheurs détermineront les profils lipidomiques des globules blancs ainsi que les niveaux de protéine cavéoline-1.

Des panels de lipides, qui testent le cholestérol total, les HDL, les LDL et les triglycérides, seront exécutés sur les échantillons de sang restants au laboratoire local. Tous les coûts associés aux tests sanguins seront payés avec les fonds d'étude de la gamme de services de cardiologie MaineHealth.

Autres mesures de l'étude : les signes vitaux, y compris le poids corporel, la pression artérielle et la fréquence cardiaque, seront mesurés à chaque visite.

Les sujets tiendront un journal d'étude documentant chaque dose d'EVOO. Il leur sera demandé de mesurer 1 once d'huile d'olive dans une tasse qui leur a été donnée par l'équipe d'étude et de la consommer avec du pain, dans un smoothie ou en la buvant nature. Le respect de la consommation d'EVOO sera calculé à partir du journal (%). La conformité à l'étude sera également mesurée en onces de produit retourné (%). Les sujets reçoivent 30 onces d'EVOO pour couvrir 28 jours, par conséquent, 2 onces d'huile d'olive retournée après chaque bras d'étude seront comptées comme une conformité à 100%.

Considérations relatives à la taille de l'échantillon :

Comme il s'agit d'une étude pilote, les chercheurs ont utilisé les données disponibles dans la littérature pour estimer la taille de l'échantillon. Une étude évaluant l'effet du HDL sur l'espérance de vie des personnes âgées a rapporté un HDL moyen de 47,5 avec un écart type de 12,1 chez les sujets ayant vécu plus de 85 ans. En utilisant cette estimation et en anticipant trouver une différence de 3 points de HDL entre les deux groupes d'étude, les enquêteurs doivent recruter 276 participants. Cependant, comme il s'agit d'une étude pilote et que les chercheurs disposent d'un financement limité, ils commenceront par recruter 90 sujets. Avec un financement supplémentaire assuré par une subvention à l'avenir, l'étude pourrait être élargie afin d'atteindre la puissance souhaitée de 80 %.

L'analyse des données:

Aux fins de cette étude, les chercheurs tenteront de détecter les différences de HDL et d'autres biomarqueurs de la santé cardiovasculaire chez les sujets qui ont consommé à la fois une faible concentration de polyphénols et une concentration élevée de polyphénols EVOO. Les numéros de dossiers médicaux ne seront pas inclus dans l'ensemble de données pour l'analyse. Des statistiques descriptives seront utilisées pour résumer les caractéristiques démographiques et cliniques des sujets inclus dans l'étude, avec des variables continues présentées comme une moyenne + - écart-type et des variables catégorielles comme des fréquences/pourcentages du total. Des tests t de Student et des tests du chi carré seront effectués pour comparer les données entre les groupes EVOO à faible teneur en polyphénols et ceux à teneur élevée en polyphénols. Un diagramme de série chronologique sera généré afin de démontrer l'évolution du HDL au fil du temps en fonction du niveau de polyphénols consommés.