En multisenterpilotstudie for å evaluere effekten av EVOO på lipidparametre (EVOO)

Studere design:

En multisenter, dobbeltblindet pilotstudie for å avgjøre om extra virgin olivenolje (EVOO) har en positiv effekt på HDL-kolesterolnivåer og antiinflammatoriske markører for personer diagnostisert med hjerte- og karsykdom (CVD) og for å avgjøre om polyfenolkonsentrasjonen er proporsjonal med disse effektene. Forsøkspersonene vil fullføre påfølgende 28-dagers perioder (med en 14-dagers utvasking mellom) der de enten vil innta den lave polyfenolkonsentrasjonen EVOO daglig eller den høye polyfenolkonsentrasjonen EVOO. På en dobbeltblindet måte vil hver forsøksperson være sin egen kontroll med en 14-dagers utvasking mellom studieperiodene.

Hypotese:

Forsøkspersoner vil demonstrere større forbedringer i HDL-kolesterolnivåer, andre lipidparametere og inflammatoriske markører ved å legge EVOO til diettene deres. Forbruk av EVOO med høy polyfenolkonsentrasjon vil forbedre disse parameterne mer enn inntak av EVOO med lav polyfenolkonsentrasjon.

Spesifikke mål:

1. For å finne ut om daglig inntak av EVOO vil øke HDL-kolesterolnivået etter 28 dager.
2. For å finne ut om daglig inntak av høy polyfenolkonsentrasjon EVOO øker HDL-kolesterolnivået mer enn EVOO med lav polyfenolkonsentrasjon (samme dosering).
3. For å fastslå gjennomførbarheten av denne typen studier og muligheten for en større studie over en lengre tidsperiode.

Studiemetoder:

Før de registrerer fag, vil studiepersonalet bestille et generisk merke EVOO gjennom sykehusets ernæringsavdeling. Samtidig vil EVOO med rapportert høy polyfenolkonsentrasjon bestilles fra en lokal spesialbutikk for olivenolje.

Olivenoljetesting: Eurofins Microbiology Laboratories, Inc. vil teste en prøve av hver batch olivenolje for polyfenolkonsentrasjon før dispensering. Metoden er basert på direkte ekstraksjon av de biofenoliske mindre polare forbindelsene fra olivenolje ved hjelp av en metanolløsning og påfølgende kvantifisering ved HPLC-MS/MS. Kommersielt tilgjengelige polyfenolstandarder brukes til å identifisere og kvantifisere individuelle fenolforbindelser, med fokus på de som finnes mest i olivenolje.

Blodprøver fra studiepersonen: Omtrent 20 ml blod vil bli oppnådd ved fem ulike studiebesøk for totalt 100 ml blod over 12 uker.

Baseline serum- og plasmablodprøver vil bli tatt før olivenoljetilskudd. Det vil bli tatt oppfølgingsblodprøver ved fire andre tidspunkter.

Serums totale lipidprofiler vil bli evaluert i massespektrometrikjernen ved Maine Medical Center Research Institute (MMCRI). I tillegg vil inflammatoriske markører, inkludert CRP, IL-6 og TNFalpha, bli bestemt ved enzymkoblet immunosorbentanalyse (ELISA). Serum vil bli tilberedt ved å samle 10 ml blod i røde rør. Blodet får koagulere i 15-20 minutter ved romtemperatur og deretter sentrifugeres ved 1500 - 2000 g, og supernatanten pipetteres av og lagres frosset ved -65 ºC. Plasmaprøver vil bli forberedt fra 6 ml blod samlet inn i 10 ml ACD (Acid Citrate Dextrose) antikoagulantrør og behandlet innen 1 time. Den hvite blodlegemefraksjonen vil bli tilberedt ved sentrifugering ved 1500-2000g i 15 minutter. Det midterste laget av hvite celler vil pipetteres av og lagres frosset ved -60ºC. Etterforskerne vil bestemme de lipidomiske profilene til hvite blodceller så vel som caveolin-1 proteinnivåer.

Lipidpaneler, som tester totalt kolesterol, HDL, LDL og triglyserider, vil bli kjørt på gjenværende blodprøver på det lokale laboratoriet. Alle kostnader knyttet til blodprøver vil bli betalt med studiemidler fra MaineHealth Cardiology Service Line.

Andre studietiltak: Vitale tegn inkludert kroppsvekt, blodtrykk og hjertefrekvens vil bli målt ved hvert besøk.

Forsøkspersonene vil føre en studiedagbok som dokumenterer hver dose av EVOO. De vil bli bedt om å måle opp 1 unse olivenolje i en kopp gitt til dem av studieteamet, og konsumere den med brød, i en smoothie eller ved å drikke den vanlig. Overholdelse av EVOO-forbruk vil bli beregnet fra dagboken (%). Studiesamsvar vil også bli målt ved å returnere unser av produktet (%). Forsøkspersonene mottar 30 gram EVOO for å dekke 28 dager, derfor vil 2 gram returnert olivenolje etter hver studiearm bli regnet som 100 % samsvar.

Betraktninger om prøvestørrelse:

Siden dette er en pilotstudie, brukte etterforskerne data tilgjengelig i litteraturen for å estimere prøvestørrelsen. En studie som evaluerte effekten av HDL på forventet levealder i eldre alder rapporterte en gjennomsnittlig HDL på 47,5 med et standardavvik på 12,1 blant forsøkspersoner som ble eldre enn 85 år. Ved å bruke dette estimatet, og forutse å finne en forskjell på 3 poeng i HDL blant de to studiegruppene, må etterforskerne rekruttere 276 deltakere. Men siden dette er en pilotstudie og etterforskerne har begrenset finansiering, vil de starte med å rekruttere 90 forsøkspersoner. Med ytterligere finansiering sikret fra et stipend i fremtiden, vil studiet kunne utvides for å oppnå ønsket effekt på 80 %.

Dataanalyse:

For formålet med denne studien vil etterforskerne forsøke å oppdage forskjeller i HDL og andre biomarkører for kardiovaskulær helse hos personer som konsumerte både lav polyfenolkonsentrasjon kontra høy polyfenolkonsentrasjon EVOO. Journalnumre vil ikke bli inkludert i datasettet for analyse. Beskrivende statistikk vil bli brukt for å oppsummere de demografiske og kliniske karakteristikkene til forsøkspersoner som er inkludert i studien, med kontinuerlige variabler presentert som et gjennomsnitt +- standardavvik og kategoriske variabler som frekvenser/prosent av totalen. Student t-tester og kjikvadrat-tester vil bli utført for å sammenligne data mellom EVOO-gruppene med lav vs. høy polyfenol. Et tidsserieplott vil bli generert for å demonstrere endringen i HDL over tid etter nivå av forbrukt polyfenol.