Többközpontú kísérleti tanulmány az EVOO lipidparaméterekre gyakorolt ​​hatásának értékelésére (EVOO)

Dizájnt tanulni:

Többközpontú, kettős vak kísérleti vizsgálat annak meghatározására, hogy az extra szűz olívaolaj (EVOO) pozitív hatással van-e a HDL-koleszterinszintre és a gyulladásgátló markerekre olyan betegeknél, akiknél szív- és érrendszeri betegséggel (CVD) diagnosztizáltak, és hogy meghatározzák, hogy a polifenolkoncentráció arányos ezekkel a hatásokkal. Az alanyok egymást követő 28 napos időszakokat töltenek le (14 napos kimosással), amelyek során vagy az alacsony polifenolkoncentrációjú EVOO-t fogyasztják naponta, vagy a magas polifenolkoncentrációjú EVOO-t. Kettős vak módszerrel minden alany a saját kontrollja lesz, a vizsgálati időszakok között 14 napos kimosással.

Hipotézis:

Az alanyok nagyobb javulást mutatnak a HDL-koleszterinszintben, más lipidparaméterekben és gyulladásos markerekben, ha EVOO-t adnak étrendjükhöz. A magas polifenolkoncentrációjú EVOO fogyasztása jobban javítja ezeket a paramétereket, mint az alacsony polifenolkoncentrációjú EVOO fogyasztása.

Konkrét célok:

1. Annak megállapítására, hogy az EVOO napi fogyasztása növeli-e a HDL-koleszterinszintet 28 nap után.
2. Annak megállapítása, hogy a magas polifenolkoncentrációjú EVOO napi fogyasztása nagyobb mértékben növeli-e a HDL-koleszterinszintet, mint az alacsony polifenolkoncentrációjú EVOO (azonos adagolás).
3. Meghatározni egy ilyen típusú vizsgálat megvalósíthatóságát és egy nagyobb vizsgálat lehetőségét hosszabb időn keresztül.

Tanulmányi módszerek:

A tantárgyak felvétele előtt a tanulmányozó személyzet az EVOO általános márkát rendeli meg a kórházi táplálkozási osztályon keresztül. Ugyanakkor a bejelentett magas polifenolkoncentrációjú EVOO-t egy helyi olívaolaj-szaküzletből rendelik meg.

Olívaolaj-teszt: Az Eurofins Microbiology Laboratories, Inc. minden olívaolaj-tételből egy mintát megvizsgál a polifenolkoncentráció szempontjából az adagolás előtt. A módszer a biofenol kisebb poláris vegyületek olívaolajból metanolos oldattal történő közvetlen extrakcióján, majd ezt követő HPLC-MS/MS-sel történő kvantifikáláson alapul. Kereskedelmi forgalomban kapható polifenol standardokat használnak az egyes fenolos vegyületek azonosítására és mennyiségi meghatározására, az olívaolajokban leggyakrabban előforduló vegyületekre összpontosítva.

A vizsgálati alanyok vérvizsgálata: Körülbelül 20 ml vért vesznek 5 különböző vizsgálati látogatás alkalmával, összesen 100 ml vérből 12 hét alatt.

Az olívaolaj kiegészítése előtt kiindulási szérum- és plazma vérmintákat vesznek. Nyomon követési vérmintát vesznek további négy időpontban.

A szérum összes lipidprofilját a Maine Medical Center Research Institute (MMCRI) tömegspektrometriás magjában értékelik. Ezenkívül a gyulladásos markereket, beleértve a CRP-t, az IL-6-ot és a TNFalfát, enzimhez kötött immunszorbens vizsgálattal (ELISA) kell meghatározni. A szérum elkészítése úgy történik, hogy 10 ml vért veszünk piros kupakú csövekbe. A vért hagyjuk 15-20 percig szobahőmérsékleten alvadni, majd 1500-2000 g-vel centrifugáljuk, majd a felülúszót pipettázzuk, és -65 °C-on fagyasztva tároljuk. A plazmamintákat 6 ml vérből 10 ml-es ACD (Sav Citrate Dextrose) antikoaguláns csövekbe gyűjtik, és 1 órán belül feldolgozzák. A fehérvérsejt-frakciót 1500-2000 g-vel 15 percig tartó centrifugálással állítják elő. A fehérvérsejtek középső rétegét pipettával eltávolítják, és -60 °C-on fagyasztva tárolják. A kutatók meghatározzák a fehérvérsejtek lipidom profilját, valamint a caveolin-1 fehérje szintjét.

Az összkoleszterint, a HDL-t, az LDL-t és a triglicerideket vizsgáló lipidpaneleket a fennmaradó vérmintákon futtatják a helyi laboratóriumban. A vérvizsgálattal kapcsolatos összes költséget a MaineHealth Cardiology Service Line tanulmányi forrásaiból fizetik.

Egyéb vizsgálati intézkedések: Minden látogatáskor megmérik az életjeleket, beleértve a testsúlyt, a vérnyomást és a pulzusszámot.

Az alanyok vizsgálati naplót vezetnek, amelyben dokumentálják az EVOO minden egyes adagját. Megkérik őket, hogy mérjenek ki 1 uncia olívaolajat egy csészében, amelyet a kutatócsoport adott nekik, és fogyasszák el kenyérrel, turmixban vagy sima itallal. Az EVOO fogyasztásnak való megfelelés a naplóból kerül kiszámításra (%). A tanulmány megfelelőségét a visszaküldött termék unciája (%) is méri. Az alanyok 30 uncia EVOO-t kapnak 28 nap lefedésére, ezért minden vizsgálati ág után 2 uncia visszaküldött olívaolajat 100%-os megfelelőségnek számítanak.

A minta méretére vonatkozó szempontok:

Mivel ez egy kísérleti vizsgálat, a kutatók az irodalomból rendelkezésre álló adatokat használták fel a minta méretének becsléséhez. Egy tanulmány, amely a HDL-nek az idősebb korban várható élettartamra gyakorolt ​​hatását értékelte, 47,5-ös átlagos HDL-értékről számolt be, 12,1-es szórással a 85 évnél idősebb személyek körében. Ezzel a becsléssel, és arra számítva, hogy a HDL-ben 3 pontos különbséget találnak a két vizsgálati csoport között, a kutatóknak 276 résztvevőt kell toborozniuk. Mivel azonban ez egy kísérleti tanulmány, és a nyomozóknak korlátozott finanszírozása van, 90 alany toborzásával kezdik. A jövőben pályázati forrásból biztosított kiegészítő támogatással a tanulmány a kívánt 80%-os teljesítmény elérése érdekében bővíthető.

Adatelemzés:

E tanulmány céljaira a kutatók megpróbálják kimutatni a HDL-ben és a kardiovaszkuláris egészség egyéb biomarkereiben mutatkozó különbségeket azoknál az alanyoknál, akik alacsony polifenolkoncentrációjú és magas polifenolkoncentrációjú EVOO-t fogyasztottak. Az orvosi feljegyzések száma nem kerül bele az elemzéshez szükséges adatkészletbe. Leíró statisztikát használunk a vizsgálatba bevont alanyok demográfiai és klinikai jellemzőinek összegzésére, a folytonos változókat átlagos +- szórásként, a kategorikus változókat pedig a teljes gyakoriság gyakoriságaként/százalékaként mutatjuk be. Tanulói t-próbákat és khi-négyzet teszteket végeznek az alacsony és magas polifenoltartalmú EVOO-csoportok közötti adatok összehasonlítására. Idősoros grafikont készítenek a HDL időbeli változásának bemutatására az elfogyasztott polifenol szintje szerint.