En multicenterpilotstudie för att utvärdera effekten av EVOO på lipidparametrar (EVOO)

Studera design:

En multicenter, dubbelblind pilotstudie för att fastställa om extra virgin olivolja (EVOO) har en positiv effekt på HDL-kolesterolnivåer och antiinflammatoriska markörer för patienter som diagnostiserats med hjärt-kärlsjukdom (CVD) och för att avgöra om polyfenolkoncentrationen är proportionell mot dessa effekter. Försökspersonerna kommer att slutföra på varandra följande 28-dagarsperioder (med en 14-dagars tvättning mellan) där de antingen kommer att konsumera den låga polyfenolkoncentrationen EVOO dagligen eller den höga polyfenolkoncentrationen EVOO. På ett dubbelblindat sätt kommer varje försöksperson att vara hans eller hennes egen kontroll med en 14-dagars tvättning mellan studieperioderna.

Hypotes:

Försökspersonerna kommer att visa större förbättringar av HDL-kolesterolnivåer, andra lipidparametrar och inflammatoriska markörer genom att lägga till EVOO till sina dieter. Konsumtion av EVOO med hög polyfenolkoncentration kommer att förbättra dessa parametrar mer än konsumtion av EVOO med låg polyfenolkoncentration.

Specifika mål:

1. För att avgöra om daglig konsumtion av EVOO kommer att öka HDL-kolesterolnivåerna efter 28 dagar.
2. För att avgöra om daglig konsumtion av hög polyfenolkoncentration EVOO ökar HDL-kolesterolnivåerna mer än EVOO med en låg polyfenolkoncentration (samma dosering).
3. Att fastställa genomförbarheten av denna typ av studier och möjligheten till en större studie över en längre tidsperiod.

Studiemetoder:

Innan de registrerar försökspersoner kommer studiepersonalen att beställa ett generiskt varumärke EVOO genom sjukhusets näringsavdelning. Samtidigt kommer EVOO med en rapporterad hög polyfenolkoncentration att beställas från en lokal olivolja specialbutik.

Testning av olivolja: Eurofins Microbiology Laboratories, Inc. kommer att testa ett prov av varje parti olivolja för polyfenolkoncentration före dispensering. Metoden bygger på direkt extraktion av de biofenoliska mindre polära föreningarna från olivolja med hjälp av en metanollösning och efterföljande kvantifiering med HPLC-MS/MS. Kommersiellt tillgängliga polyfenolstandarder används för att identifiera och kvantifiera enskilda fenolföreningar, med fokus på de som finns mest i olivolja.

Studiepersonens blodprov: Cirka 20 ml blod kommer att erhållas vid fem olika studiebesök för totalt 100 ml blod under 12 veckor.

Baslinjeprover av serum och plasmablod kommer att tas före tillskott av olivolja. Uppföljande blodprov kommer att tas vid fyra andra tidpunkter.

Serumets totala lipidprofiler kommer att utvärderas i masspektrometrikärnan vid Maine Medical Center Research Institute (MMCRI). Dessutom kommer inflammatoriska markörer, inklusive CRP, IL-6 och TNFalpha, att bestämmas genom enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA). Serum bereds genom att samla upp 10 ml blod i rör med röda lock. Blodet kommer att tillåtas koagulera i 15-20 minuter vid rumstemperatur och sedan centrifugeras vid 1500 - 2000 g, och supernatanten pipetteras av och förvaras fryst vid -65 ºC. Plasmaprover kommer att förberedas från 6 ml blod som samlats in i 10 ml ACD (Acid Citrate Dextrose) antikoagulantrör och bearbetas inom 1 timme. Fraktionen av vita blodkroppar kommer att beredas genom centrifugering vid 1 500-2 000 g under 15 minuter. Det mellersta lagret av vita blodkroppar kommer att pipetteras av och förvaras fryst vid -60ºC. Utredarna kommer att bestämma de lipidomiska profilerna för vita blodkroppar samt nivåerna av caveolin-1-protein.

Lipidpaneler, som testar totalt kolesterol, HDL, LDL och triglycerider, kommer att köras på återstående blodprov på det lokala laboratoriet. Alla kostnader relaterade till blodprov kommer att betalas med studiemedel från MaineHealth Cardiology Service Line.

Andra studiemått: Vitala tecken inklusive kroppsvikt, blodtryck och hjärtfrekvens kommer att mätas vid varje besök.

Försökspersonerna kommer att föra en studiedagbok som dokumenterar varje dos av EVOO. De kommer att bli ombedda att mäta upp 1 uns olivolja i en kopp som de fått av studieteamet, och konsumera den med bröd, i en smoothie eller genom att dricka den vanlig. Överensstämmelse med EVOO-förbrukning kommer att beräknas från dagboken (%). Undersökningens efterlevnad kommer också att mätas med ounces av returnerad produkt (%). Försökspersonerna får 30 uns EVOO för att täcka 28 dagar, därför kommer 2 uns returnerad olivolja efter varje studiearm att räknas som 100 % överensstämmelse.

Överväganden om provstorlek:

Eftersom detta är en pilotstudie använde utredarna data som finns tillgängliga i litteraturen för att uppskatta urvalets storlek. En studie som utvärderade effekten av HDL på förväntad livslängd vid äldre åldrar rapporterade ett genomsnittligt HDL på 47,5 med en standardavvikelse på 12,1 bland försökspersoner som levde till att vara äldre än 85 år. Med hjälp av denna uppskattning, och förutseende att hitta en skillnad på 3 poäng i HDL bland de två studiegrupperna, måste utredarna rekrytera 276 deltagare. Men eftersom detta är en pilotstudie och utredarna har begränsad finansiering kommer de att börja med att rekrytera 90 försökspersoner. Med ytterligare finansiering säkrad från ett anslag i framtiden skulle studien kunna utökas för att uppnå önskad effekt på 80 %.

Dataanalys:

För syftet med denna studie kommer utredarna att försöka upptäcka skillnader i HDL och andra biomarkörer för kardiovaskulär hälsa hos försökspersoner som konsumerade både låg polyfenolkoncentration kontra hög polyfenolkoncentration EVOO. Medicinska journalnummer kommer inte att inkluderas i datasetet för analys. Beskrivande statistik kommer att användas för att sammanfatta de demografiska och kliniska egenskaperna hos försökspersoner som ingår i studien, med kontinuerliga variabler presenterade som ett medelvärde +- standardavvikelse och kategoriska variabler som frekvenser/procentandelar av totalen. Student t-tester och chi-kvadrattest kommer att utföras för att jämföra data mellan EVOO-grupperna med lågt kontra högt polyfenol. En tidsserieplot kommer att genereras för att visa förändringen i HDL över tiden efter nivån av förbrukad polyfenol.