신경근 차단제에 대한 아나필락시스에서 호중구 활성화의 역할 (NASA)

사례에 대한 6,10주 후속 조치가 포함된 사례 제어 연구

케이스 선택 :

포함 기준: 18세 이상의 모든 환자:

French Patient Management 2011 지침에 따라 치료된 아나필락시스 반응의 등급에 상관없이 신경근 차단 약물에 대한 수술 전후 아나필락시스 반응과 양립할 수 있는 임상 징후를 나타내는 경우(cf. 별첨 5) 불포함 기준: 아나필락시스 쇼크 동안 사망한 환자

컨트롤 선택: 각 케이스에 대해 하나의 컨트롤이 포함됩니다. 컨트롤은 병원 BICHAT에서만 채용됩니다. 컨트롤은 다음과 일치해야 합니다.

포함 기준: 아나필락시스 반응을 일으키지 않고 신경근 차단 약물 주입이 필요한 외과적 개입을 위해 입원한 18세 이상의 모든 환자 연구의 세부 사항을 알고 있고 이 연구에 참여하는 데 동의한 환자

비포함 기준: 임신 여성 케이스 환자.

페어링: 컨트롤은 다음 기준에 따라 케이스에 페어링됩니다.

- 나이 : +/- 5세

• 성별
• 감염상태 : 감염/미감염
• 수술 유형: 다른 하위 분류는 다음과 같이 분류됩니다: 정형외과, 신경외과/내장, 비뇨기과, 부인과/혈관, 심장, 흉부/악안면, 안과, 이비인후과/기타.
• 수술에 사용되는 신경근차단제의 약리학적 분류

연구 기간: 총 기간: 26개월 포함 기간: 24개월

환자의 참여 기간:

증례: 6~10주 대조군: 수술 당일

샘플 수집 사례: 쇼크 시점(혈액 및 혈장 샘플, 환자에게 필요한 경우 기관지 흡인액) 및 알레르기 마취 상담 중 아나필락시스 반응 후 6~10주 통제: 주사 후 혈액 및 혈장 샘플 신경근차단제 주사.

이 연구에 필요한 모든 혈액 샘플링(및 궁극적으로 기관지액 흡인)은 개입, 진단 또는 환자 모니터링(비개입 연구)에 대한 추가적이거나 비전통적인 절차 없이 사례 및 대조군 환자의 정상적인 임상 관리 중에 수행됩니다. . 정상적인 임상 실습 중에 수집된 것 외에 여분의 혈액 튜브를 동시에 수집하고(혈청/혈장용 건조 튜브에 10ml 및 EDTA 튜브에 10ml)(증례 및 대조군) 분석을 위해 기관지 흡인액을 보관합니다. 버려지는 대신.

마취 중 신경근 차단제에 대한 아나필락시스 쇼크는 주사/관류 후 몇 분 안에 발생합니다. 따라서 사례 환자의 샘플은 신경근 차단 약물의 주입/관류 후 30~60분 내에 수집됩니다. 이는 현재 수술 중에 이미 시행되고 있으며 환자의 상태가 안정되었을 때입니다. 연구자들은 절개가 가능하기 전, 즉 신경근 차단 약물의 주사/관류 직후에 아나필락시스 반응이 발생하기 때문에 전부는 아니더라도 대부분의 사례 환자에서 외과적 절개가 수행되지 않을 것으로 예상합니다. 따라서 대조군 환자의 샘플은 신경근 차단 약물에 노출된 직후와 외과적 절개가 수행되기 전에 수집되어 특히 호중구 활성화와 관련하여 이 외과적 행위에 의해 유발된 동요를 방지합니다.

이 연구를 위해 특별히 수집된 혈액량:

• 사례 환자: 아나필락시스 반응 후 10ml, 쇼크 후 6-10주 후 알레르기-마취 상담 중.
• 대조군 환자: 신경근 차단 약물 주사 후 20ml 세포 기반 연구를 위해 리튬 헤파리네이트에서 수집된 샘플은 아나필락시스 반응 당일 및 알레르기-마취 상담 당일 공인 배달 서비스를 통해 Unity Allergologic 분자 et 파스퇴르 연구소에서 셀룰라이즈.

건조 튜브에서 수집된 샘플(혈청 샘플)은 병원 BICHAT의 혈청형에 보관되며 일련의 분취량은 요청 시 파스퇴르 연구소로 보내집니다. 현재 병원 BICHAT의 Unity d'Immunologic Autoimmunity et Hypersensibility에서 수행되는 것과 같이 동일한 분취량을 사용하여 항 4급 암모늄 특이 IgG 및 특정 IgE를 투약합니다.

수행될 때, 기관지 흡인액은 부분적으로 BICHAT 병원의 Unity d'Immunologic Autoimmunity et Hypersensibility에서 NET 연구를 위해 유지되고 부분적으로는 Institute Pasteur에서 세포 내용물 및 PAF 수준 분석을 위해 유지되며 그에 따라 동일한 것을 전달합니다. 각 실험실에서의 하루.

아나필락시스 반응 후 6주에서 10주 사이에 알레르기과-마취 상담 중에 피부 찌름 검사를 실시합니다.

각각의 포함 후, 각 병원은 환자에 대한 정보(나이, 성별, 계획된 수술 유형, 사용된 마취제의 특성, 천식을 포함한 아토피 사건 이력, 음식 또는 약물에 대한 알레르기, 합병증 요인. 대조군 환자는 병원 BICHAT에만 포함됩니다.

주요 판단 기준:

1. 마취 중 신경근 차단 약물에 노출된 환자 그룹(대조군)과 비교한 신경근 차단 약물 유발 쇼크 직후 환자 그룹(사례)에서 순환하는 활성화된 호중구의 백분율(대조군). 이 측정은 유세포 분석을 사용하여 혈액 호중구에 의한 활성화 마커 CD62L(L-셀렉틴)의 발현 강도를 기반으로 합니다. 우리의 예비 데이터는 "비활성화" 호중구를 고려할 때 CD62L의 평균 형광 강도(MFI)가 >450이고 "활성화" 호중구를 고려할 때 CD62L(MFI)<300임을 나타냅니다.
2. "대조군"의 혈장보다 "사례"의 혈장에서 PAF의 수준.

2차 판단 기준:

1. "대조군"의 혈장보다 "사례"의 혈장에서 항-4차 암모늄 특이적 IgG의 수준.
2. 신경근 차단 약물-IgG 면역 복합체의 존재 하에서 혈액 호중구의 생체 외 활성화 능력

3. "사례"의 기관지 흡인액에서 호중구 세포외 트랩의 존재

   환자 모집단에 대한 설명: 연구된 전체 모집단 및 그룹에 대한 완전한 설명이 수행됩니다. 변수는 적절한 분포에 따라 설명됩니다(정규 분포 변수의 평균 및 표준 편차, 비정상적인 분포 변수의 중앙값 및 사분위수 범위, 범주 기준의 빈도 및 백분율).

   분석 - 사례군과 대조군 간 활성화된 호중구의 백분율을 나타내는 변수의 분포와 각각의 2차 판단 기준을 일치 기준에 따라 조건부 논리 회귀를 사용하여 비교합니다. - 활성화된 호중구의 백분율과 쇼크의 중증도, 또는 특정 IgG 수치와 쇼크의 중증도 사이에서 일반 선형 모델의 선형 경향 테스트가 수행됩니다.

   • 그들이 겪은 쇼크의 심각도에 따라 정의된 환자의 하위 그룹에서 얻은 분석 결과도 수행됩니다.
   • 통계 테스트는 양측성이며 1도 위험은 5%로 고정됩니다.

   • 기저 단계에서 또는 신경근 차단 약물-IgG 복합체(FcR 및 활성화 마커의 발현, 매개체 방출, NET 유도)로 자극 후 혈액 호중구의 기능적 매개변수에 대한 설명 및 "고전적인" 면역학적 매개변수에 대한 설명 신경근 차단제에 대한 아나필락시스 쇼크(단자 시험 결과, 호염기구의 생체외 활성화 가능성).

     NASA 연구에 포함된 환자의 샘플에 대해 5개의 보완 연구가 수행됩니다.

   • IPAAQ(Anti-Quaternary 암모늄 항체의 식별 및 병리학적 효과), 추가로 10ml의 혈청 샘플이 필요하므로 IPAAQ 연구에 포함된 모든 환자로부터 서명된 특정 동의서를 얻을 것입니다. 이 혈청 샘플은 아나필락시스 쇼크 후 6주에서 10주로 예정된 알레르기과 방문 중에 채취됩니다.

   이 연구의 목적은 마취 중 아나필락시스 쇼크를 겪은 환자의 혈청에서 항-4차 암모늄 항체의 다양한 IgG 하위 클래스를 정량화, 식별 및 정제하는 것입니다. 인간 IgG 수용체에 결합하고/하거나 시험관 내에서 인간 호중구 및 호염기구를 활성화하는 항-4급 암모늄 항체 및 신경근 차단제로 구성된 면역 복합체의 능력을 평가할 것입니다. 이 분석을 통해 항-4차 암모늄 IgG-신경근 차단제 복합체가 병원성일 수 있는지 확인하고 정상적인 임상 실습 중에 수행되는 항-4차 암모늄 IgE 테스트 외에도 항-4차 암모늄 IgG 진단 테스트를 검증할 수 있습니다.

   • NASAmAb: 4차 암모늄에 대한 기억 B 림프구(특히 IgG 또는 IgE+)의 다른 집단은 4차 암모늄(QA)을 사용하는 유세포 분석에 의해 연구 NASAmAb에 참여하기로 동의한 두 "사례"의 PBMC에서 분리됩니다. 형광 단백질(예: KLH)에 결합됩니다. 각 세포 B에서 발현되는 중쇄 및 경쇄 면역글로불린(IgH 및 IgL)의 가변 도메인을 인코딩하는 유전자는 먼저 RT-PCR로 증폭된 다음 면역글로불린의 불변 도메인을 인코딩하는 벡터로 클로닝됩니다. 이러한 벡터는 세포주에 형질감염될 것이며 그 결과 재조합 단일클론 항체(키메라 인간-마우스)가 생성되고 QA 신경근 차단제(ELISA용)에 대한 특이적 반응성, 리간드에 대한 친화성(자기 공명 표면 방법에 의함) 측면에서 특성화될 것입니다. ), 폴리 및 자기 반응성(ELISA 및 간접 면역형광법에 의함). 재조합 항체는 항원(QA 또는 NMBA)의 존재 하에서 시험관 내에서 세포를 활성화하는 능력과 항체에 대한 인간 수용체를 발현하는 트랜스제닉 마우스 모델에서 생체 내 아나필락시스 쇼크를 유도하는 능력에 대해 평가될 것입니다.

   이 프로젝트의 목표는 인간 재조합 항-4차 암모늄 항체를 생성하여 병리학적 잠재력(아나필락시 유발)을 평가하는 것입니다.

   NASAmAbs 연구의 일환으로 알레르기 전문의와 상담하는 동안 또는 이러한 목적으로 방문하는 동안 혈액 EDTA 250ml 주머니 1개를 추가로 수집합니다.

   - NASA LYMPHAQ: 약물 알레르겐에 특이적인 T 세포의 존재는 페니실린에 대한 알레르기에 기록되어 있지만 근육 이완제에 대한 즉각적인 알레르기에 대한 T 세포의 존재 및 특성은 설명되지 않았습니다. 우리의 보조 연구의 목적은 특정 활성화 테스트를 통해 이러한 T 세포를 강조하고, 표현형을 특성화하고, 정량화하고, 빈도를 건강한 기증자와 비교하는 것입니다.

   이 보조 연구의 목적은 NMBA에 민감한 환자에서 4차 암모늄에 대한 T 세포 특정 집단을 확인하는 것입니다.

   이 연구는 NASA 연구의 일환으로 충격 후 방문 중에 이미 분리된 단핵 세포에 대해 수행될 것입니다.

   • NASA Quin: 최근 연구에서 Dr. ROUZAIRE 팀은 퀴놀론에 알레르기가 있는 17명의 환자에서 신경근 차단제에 대한 감작의 높은 유병률을 밝혔습니다: 통제 집단에서 53% 대 3.4%. 따라서 폴코딘과 마찬가지로 퀴놀론은 신경근 차단제의 민감화 방법이 될 수 있습니다.

   이 보조 프로젝트의 목적은 더 큰 코호트에서 신경근 차단제와 퀴놀론이라는 두 가지 약물 종류 사이의 민감성의 연관성을 확인하는 것입니다.

   NASAQuin 연구의 일환으로 추가 혈액 샘플을 수집하지 않습니다. 연구는 연구 NASA의 일부로 보존된 혈청 및/또는 혈장의 분취량에 대해 수행될 것입니다. 300 μl의 분취량을 분석에 사용합니다.

   • NASA-CAT: 아나필락시스는 단독으로 또는 아드레날린 투여 중에 심장병을 유발할 수 있습니다. 심근 침범의 진폭, 빈도 및 병태생리학은 알려져 있지 않습니다.

   보조 연구 "NASA-CAT"의 목적은 확립된 혈장 심근 바이오마커를 사용하여 마취제와 관련된 아나필락시스 동안 심근 손상의 유병률 및 이 손상에서 아드레날린의 역할을 정의하는 것입니다. 아드레날린은 심각한 아나필락시스에서 정맥 주사로 투여하는 것이 권장되는 카테콜아민입니다. 아드레날린은 혈관 수축 특성으로 인해 혈압을 즉시 회복시킵니다. 관상 동맥 및 심근에 대한 아드레날린의 해로운 영향은 급성 심부전에서 설명되었습니다. 아나필락시스에 유사한 효과가 있는지는 알려져 있지 않습니다.

   연구 "NASA-CAT"의 목표는 아나필락시스에서 심근 관련성을 평가하고 이 손상에서 아드레날린의 역할을 결정하는 것입니다.

   보조 연구 "NASA-CAT"의 일환으로 추가 혈액 샘플을 수집하지 않습니다. 심근 바이오마커(트로포닌 과민성, 나트륨이뇨 펩티드, 아드레노메둘린, 코펩틴)의 투약은 NASA 연구의 일부로 저장된 혈청 및/또는 혈장으로부터 500μl의 샘플에 대해 수행될 것입니다.