생선 기름과 지방 염증 감소 (FAIR)

인간의 비만 관련 염증 및 케모카인 신호에 대한 해양 유래 오메가-3 지방산(EPA + DHA)의 항염증 및 대사 효과를 이해하기 위해 평행 암, 이중 맹검, 위약 대조 시험을 수행할 것을 제안합니다. 비만(BMI>30kg/m2)이지만 당뇨병이 없는 젊은 남성과 여성(n~44; 25~50세) 오메가-3 지방산(EPA + DHA) 보충제를 섭취하지 않고 생선 섭취가 적은 식단(정의됨) 평소와 같이 오메가-3 함량이 높은 생선(참치 및 기타 튀기지 않은 생선) < 월 3~4인분) 섭취가 포함됩니다. 보충 기간 동안 EPA + DHA 섭취를 조절하려면 습관적으로 생선을 적게 섭취하는 것이 중요합니다(아래 제외 기준 참조). 피험자는 또한 치료 기간 동안 현재 생선 섭취량을 유지해야 합니다.

두 개의 치료 그룹이 있습니다. (1) 위약 및 (2) 오메가-3 지방산 4g/일. 시험은 병렬 치료 그룹과 함께 무작위, 이중 맹검, 위약 대조가 될 것입니다. 오메가-3 지방산 치료 8주. 연구 부문당 최소 22명의 피험자가 모든 연구 방문을 완료할 때까지(즉, 최소 44명의 참여자) 참여자를 등록할 것입니다.

GlaxoSmithKline의 처방 Lovaza(오메가-3-산 에틸 에스테르) 하루 4g(음식과 함께 1g 캡슐 2개 1일 2회)이 사용됩니다. 이 용량은 중등도 이상의 고중성지방혈증(수준 > 400mg/dL) 관리를 위해 권장되고 일상적으로 사용되는 용량이기 때문에 안전할 것으로 예상됩니다. 우리는 일치하는 위약 캡슐을 사용하여 모든 참가자가 임상 실습에서 권장하는 음식과 함께 하루에 두 번 캡슐 2개를 복용하도록 할 것입니다.

연구 기간은 최대 지질 변형 효과를 필요로 하지 않으면서 치료의 잠재적인 항염증 효과에 대한 적절한 시간을 제공하는 동시에 더 긴 연구 기간과 관련된 탈락 및 후속 조치 손실의 가능성을 줄이기 위해 선택되었습니다.

참가자는 이전 연구에 참여했으며 향후 연구를 위해 연락을 요청한 건강한 피험자로 구성된 예방 심장학 연구 데이터베이스에서 모집됩니다. 잠재적 참가자는 델라웨어 밸리 지역을 대상으로 하는 지역 IRB 승인 전단지, 인터넷 및 신문 광고(첨부된 전단지 및 광고 참조)를 통해 모집될 것입니다.

연구 절차

사전 동의 연구 시작 전에 임상 프로토콜, 사전 동의 양식(ICF) 및 피험자 모집에 대한 모든 광고가 검토 및 승인을 위해 IRB(Institutional Review Board)에 제출됩니다. 조사자 또는 그가 지정한 연구 직원은 미국 식품의약국(FDA) 규정 21 CFR 파트 50.20-50.27에 따라 연구에 등록된 각 피험자로부터 사전 서면 동의를 얻습니다. 일상적인 치료의 일부가 아닌 활동이나 치료를 수행하기 전에 피험자 또는 피험자의 보호자나 법적 대리인으로부터 정보에 입각한 동의를 얻는 것은 연구자의 책임입니다.

안전성 평가 부작용의 발생률, 중증도 및 치료제와의 관계에 의해 안전성을 평가할 것입니다.

부작용에 대한 모니터링: 연구 약물의 첫 번째 투여 후 발생하는 모든 AE의 세부 사항은 섹션 12에 표시된 대로 수집됩니다. 연구 약물의 첫 번째 투여 전에 발생하는 모든 질병 또는 부상은 병력에 기록되고 다음과 같이 평가됩니다. 발생이 연구에 참여하는 환자의 적격성에 영향을 미치는지 결정합니다. 피험자는 지정된 임상 평가자에 의해 다음과 같은 표준 질문을 받게 됩니다. 진료소 체크인 시:

1. "마지막 방문 이후 의료 문제가 있었습니까?"
2. "마지막 방문 시 의학적 문제가 변경되었습니까? 즉, 중단, 악화 또는 개선되었습니까?"
3. "마지막 방문 이후 연구 약물 이외의 약물을 복용한 적이 있습니까?" 환자가 제공한 임의의 자발적인 AE 정보가 기록됩니다. 참고: AE는 새로운 질병, 예상치 못한 사건 또는 기존 상태의 악화일 수 있습니다. 자세한 내용은 섹션 12.0을 참조하십시오.

지방 생검: 약 500-1000mg의 피하 지방 조직을 둔부 부위에서 생검하고, 처리하고, 칭량하고, 분석할 때까지 동결합니다. 지방 조직은 이전에 설명한 바와 같이 국소 마취(에피네프린 없는 2% 리도카인) 하에 작은(~5mm) 절개를 통해 얻습니다13-15. 샘플의 일부(200mg)는 급속 동결되고 유전자 발현 및 단백질 분석을 위해 분석됩니다. 또 다른 부분(500-800mg)은 멸균 배지에 넣고 간질 혈관 분획(SVF)의 분리를 위해 콜라게나제, 여과 및 원심분리로 분해됩니다. SVF 세포는 유세포 분석기 분석을 위해 항체로 염색됩니다. 마지막으로, 나머지 조직은 면역조직화학을 위해 파라핀으로 고정됩니다.

6.5 치은연하 분석

타액 샘플은 타액에서 미생물 DNA와 RNA를 모두 수집하고 안정화하는 올인원 키트인 OMNIgene DISCOVER(OM-505) 키트(DNA Genotek)를 사용하여 수집됩니다. 샘플은 추출 전에 -80C에서 보관됩니다. 핵산은 QIAGEN QIAamp MinElute 바이러스 스핀 키트(Qiagen)를 사용하여 추출됩니다. 연모 마이크로브러시(DenTek)를 사용하여 각 피험자의 3개 구강 영역(영역당 2개 샘플)에서 치은연하 플라크 샘플을 채취합니다. 표본은 모든 피험자의 동일한 해부학적 위치에서 수집됩니다. DNA는 PSP Spin Stool DNA 키트(Invitec)를 사용하여 분리됩니다. DNA 샘플은 박테리아 16S 유전자를 표적으로 하는 V1-V2 영역 프라이머를 사용하여 증폭되고 IlluminaHiSeq 또는 454 파이로시퀀싱 기술을 사용하여 시퀀싱됩니다.

특정 연구 절차(방문)

스크리닝(방문 1) 잠재적 참가자는 연구 코디네이터와의 전화 또는 이메일 인터뷰를 통해 먼저 스크리닝됩니다(이메일 인터뷰 양식은 부록 B 참조, 전화 인터뷰의 경우 이 정보는 구두로 교환됨). 초기 연구 요구 사항을 충족하는 참가자는 CTRC에서 스크리닝 방문(방문 1)에 초대됩니다. 이 방문 전에 참가자는 과거 병력, 약물 및 식이 보조제의 현재 사용, 운동 및 사회적 습관에 관한 질문을 다루는 수많은 이전 연구에서 사용된 자세한 건강 설문지(부록 C 참조)를 받게 됩니다. 또한 연구 기간 동안 EPA + DHA 섭취량이 적은 피험자를 모집하기 위해 참가자에게 생선 소비에 대해 질문합니다. 참가자는 집에서 이러한 설문지를 작성하고 스크리닝 방문 시 작성한 양식을 지참해야 합니다. 스크리닝 방문 중에 그들은 연구 직원을 만나 IRB 승인 동의서를 검토하고 서명합니다. 연구원은 참가자와 함께 건강 설문지를 검토하고 체중, 키, 허리 및 엉덩이 둘레, 앉아있는 혈압 및 심박수를 측정합니다. 간단한 신체 검사와 심전도(ECG)가 수행됩니다. 또한 참가자는 공복 지질, 포도당, 혈청 화학 및 간 기능 및 전체 혈구 수를 평가하기 위해 혈액을 채취합니다(12시간 금식 후). 여성 참가자는 임신 테스트를 위해 소변 샘플을 제공해야 합니다. 참가자가 자격 기준을 충족하고 일반적으로 건강 상태가 양호한지 확인하기 위해 이러한 실험실 매개변수가 포함됩니다. 모든 임상 데이터가 검토되면 연구 담당자는 각 연구 지원자에게 연락하여 적격 여부를 알립니다.

무작위 방문(방문 2) 스크리닝 방문 1 후 1~4주 후 적격 참가자는 2시간 방문을 위해 12시간 금식 후 CTRC로 돌아갑니다. 참가자는 방문 전날 마지막 식사 후 또는 12시간 금식 기간이 시작될 때 이를 닦고 연구 방문이 끝날 때까지 추가 칫솔질이나 구강 세척제 사용을 자제하도록 요청받을 것입니다. 참가자는 병력 및 약물 사용의 변화를 평가하고 부작용을 검토할 연구 간호사/코디네이터를 만납니다. 혈압, 심박수, 키 및 체중을 측정하고, 사전 무작위화 기준선 효능 측정을 위해 혈액 및 소변을 수집하고 모든 여성에 대해 소변 임신 검사를 수행합니다. 식단에서 오메가-3 섭취 수준의 변화를 평가하기 위해 간단한 생선 소비 설문지가 관리됩니다.

그들은 또한 방문 3일 전에 섭취한 모든 음식과 음료를 식이 기록에 기록하고 소화기 건강 설문지와 식이력 설문지를 작성해야 합니다. 3일 식단 기록에서 수집된 모든 영양소 데이터는 Food Processor 8.1(06/03, Escha)에서 분석됩니다. 참가자는 집에서 이러한 설문지를 작성하고 작성한 양식을 연구 방문 시 지참해야 합니다. 피험자가 집에서 양식을 인쇄하거나 작성할 수 없는 경우 방문 시 작성합니다.

타액 및 치은연하 플라크 샘플은 구강 미생물 평가를 위해 채취됩니다. 타액 샘플은 표준화된 키트를 사용하여 수집됩니다. 연구 담당자의 감독하에 피험자에게 튜브에 부착된 깔때기로 구성된 키트를 제공하고 액체의 양이 부착된 튜브 외부에 있는 주입선에 도달할 때까지 깔때기에 침을 뱉도록 지시합니다. 적당량이 취해지면 깔때기의 뚜껑을 닫고 깔때기를 튜브에서 꺼냅니다. 그런 다음 튜브에 뚜껑을 덮고 약 10초 동안 흔듭니다. 치은연하 플라크 샘플은 마이크로브러시를 사용하여 협측 점막의 여러 영역을 면봉으로 채취하여 수집합니다. 각 면봉에 대해 별도의 브러시를 사용하고 각 지역에서 두 개의 샘플을 수집합니다.

지방 염증 매개변수에 대한 치료 효과를 확립하기 위해 국소 마취(2% 리도카인) 하에서 둔부 부위 피하 지방 조직 생검을 얻습니다. 지방 수집 절차에 대한 자세한 설명은 섹션 6.4에 나와 있습니다. 그런 다음 참가자는 약물 또는 위약 그룹으로 무작위 배정됩니다. 연구 약물의 공급은 8주간 지속됩니다(Lovaza 또는 위약 중 하나의 알약/일 4개).

참가자에게는 다음과 같이 연구 약물을 복용하기 위한 구두 및 서면 지침이 제공됩니다. 아침에 음식과 함께 2 피쉬 오일/플라시보, 저녁에 음식과 함께 2 피시 오일/플라시보. 모든 피험자에게 알약 일기가 제공됩니다.

전화/이메일 후속 조치(방문 3) 무작위화 후 약 4주(방문 3)에 참가자에게 전화 또는 이메일로 연락하여 약물 순응도 및 알약 일지, 부작용 및 생선 소비의 변화를 검토합니다. 연구 약물에 대한 80% 미만의 명백한 순응도를 보이는 참가자는 순응도를 높여 8주차 순응도가 80% 이상이 되도록 조언을 받습니다.

완료 방문(방문 4) 참가자는 12시간 금식 후 CTRC로 옵니다. 참가자는 병력 및 약물 사용의 변화를 평가할 연구 코디네이터를 만날 것입니다. 또한 방문 3일 전에 섭취한 모든 음식과 음료를 식이 기록에 기록하도록 요청받을 것입니다. 모든 부작용이 기록되고, 알약 일지가 검토되고, 연구 약물이 계산됩니다(알약 수) 체중과 키가 기록되고 BMI가 계산됩니다. 심전도가 수행됩니다. 모든 결과 관련 측정(지질, 인슐린/포도당, 염증 표지자)뿐만 아니라 간 기능 및 화학 물질의 약물 후 스크리닝을 위해 혈액을 채취할 것입니다. 효능 측정을 위한 소변도 수집됩니다. 소변 임신 테스트는 모든 여성에서 수행됩니다. 타액 및 치은연하 플라크 샘플을 채취하여 치료에 의한 구강 미생물군의 변화를 평가합니다. 지방 생검은 위와 같이 수행됩니다.