결장 엽산 흡수 및 대사 평가

비타민 엽산은 아미노산 및 뉴클레오티드 합성과 같은 과정에서 단일 탄소 대사에 필요합니다. 엽산은 포유동물에 의해 합성될 수 없기 때문에 식이 및 식이 보조제에서 공급되거나 결장에 존재하는 박테리아 종에 의해 생성되어야 합니다. 신생아의 선천성 신경관 결손 및 성인의 결장직장암을 포함하여 인간의 엽산 결핍과 관련하여 잘 확립된 다수의 불리한 건강 결과가 있습니다. 초생리학적 엽산 상태는 면역 기능의 변화와 비타민 B12 결핍의 마스킹으로 이어질 수 있기 때문에 해로울 수 있다고 제안되었습니다. 엽산의 식이 공급원은 주로 소장에서 흡수되는 것으로 일반적으로 믿어지지만, 우리 팀과 다른 사람들의 최근 증거는 결장이 이전에 이해된 것보다 엽산 흡수에 더 큰 역할을 할 수 있음을 시사합니다. 특히 결장에 있는 엽산의 양은 대부분 미생물에 의해 생성되며 자연 공급원에서 섭취하는 엽산을 초과할 수 있습니다. 인간의 결장 엽산 흡수에 관한 지식에는 많은 차이가 있습니다. 양성자 결합 엽산 수송체(PCFT) 및 환원된 엽산 운반체(RFC)와 같은 엽산 특이 수송체가 건강한 사람의 결장에 어느 정도 존재하는지는 알려져 있지 않습니다. 현재까지 결장 세포에서 RFC 및 PCFT의 존재를 확인하기 위해 수행된 대부분의 연구는 장기 기증자로부터 채취한 세포주 또는 조직을 사용하여 수행되었습니다. 우리가 아는 한, 생검으로 검색된 인간 결장 조직에 존재하는 RFC와 PCFT의 mRNA와 단백질 농도를 조사한 연구는 없습니다. 또한 엽산 상태가 결장 수준에서 RFC 및 PCFT 발현에 영향을 미치는지 결정해야 합니다. 둘째, 2개의 장내 엽산 가수분해효소인 glutamate carboxypeptidase II(GCPII)와 γ-글루타밀 가수분해효소(GGH)가 결장 점막에 어느 정도 존재하는지 불분명합니다. 인간의 결장에서 엽산 흡수와 관련된 근본적인 과정을 보다 철저히 이해하기 위해 다음 세 가지 목표를 제안합니다. 주요 목적은 엽산 수준을 측정하여 결장 점막 내의 총 엽산 농도에 대한 0 및 400 μg 보충 엽산의 영향을 평가하는 것입니다. 2차 목적은 mRNA 전사물 및 단백질의 발현을 평가하고 GCPII 및 GGH가 조직에 존재하는 정도를 결정함으로써 회장 및 결장에서 PCFT 및 RFC의 조절에 대한 0 및 400μg 보충 엽산의 영향을 평가하는 것을 포함합니다. mRNA 전사체 및 단백질의 효소 활성 및 발현을 정량화하여 회장 및 결장 내강. 이를 달성하기 위해 16주 길이의 공개 라벨 무작위 임상 시험을 실시할 예정입니다. 모집 및 선별에는 초기 참여 초대, 적격성을 결정하기 위한 전화 선별 세션, 마지막으로 연구의 개입 단계에 등록하기 전에 기본 직접 연구 방문으로 구성된 세 가지 별도의 단계가 필요합니다. 일단 등록되면 참가자는 연구 기간 동안 합성 엽산이 적은 식단을 따르도록 요청받을 것입니다. 등록 시 피험자는 종합 비타민 보충제와 0 또는 400µg 엽산을 받도록 무작위 배정됩니다. 후속 연구 방문은 분석을 위해 말단 회장, 맹장, 상행 결장 및 하행 결장으로부터의 인체 측정, 혈액 및 결장 조직 생검(16주에만)이 수집되는 8주 및 16주에 실시될 것입니다. 엽산 및 칼로리 섭취를 관찰하기 위해 연구 전반에 걸쳐 24시간 식이 리콜을 수집할 것입니다. 혈장, RBC 엽산 수준 및 결장 점막 엽산 함량은 미생물 분석을 통해 결정됩니다. GCPII 및 GGH 효소 활성은 수정된 Krumdieck 및 Baugh 방법에 따라 결정됩니다. PCFT 및 RFC 발현은 반정량적 실시간 PCR을 통해 결정되고 단백질 샘플은 RIPA 용해 및 추출 버퍼를 사용하여 웨스턴 블롯 분석에서 추출됩니다. 제안된 연구는 결장에서 엽산 대사 및 흡수의 기본 과정에 대한 우리의 이해를 증진시킬 것입니다. 이 연구의 결과는 엽산 과다 노출과 관련된 잠재적인 건강 위험 없이 인간의 요구 사항을 충족하는 최적의 식이 엽산 섭취량을 설정하는 데 도움이 될 수 있습니다.