Phosphatidic Acid의 근육 단백 동화 특성 결정. (PA-AGE)

조사관은 65-80세의 16명의 건강한(비만, 비당뇨, 비흡연) 노인 남성을 모집하여 이중 맹검 평행 설계 연구를 완료할 예정입니다. = 8; PA) 또는 위약(N=8; PL) 치료 그룹, 인체 측정 특성에 대해 밀접하게 일치. 참가자는 레크리에이션 활동을 하게 되지만 구조화된 운동 훈련에는 참여하지 않습니다. 모든 연구 절차는 명확하게 설명되고 연구 참여 전에 서면 동의를 얻습니다.

예비 평가 연구에 대한 설명과 정보에 입각한 동의를 얻은 후 참가자는 하룻밤 금식 상태로 0800시에 실험실에 보고하고 >24시간 동안 격렬한 신체 활동을 자제합니다. 참가자는 가벼운 옷을 입고 디지털 저울로 0.1kg 단위로 무게를 측정합니다. 체성분(지방 및 제지방량)을 결정하기 위해 이중 X선 흡광계(DXA) 스캔을 실시합니다. DXA 스캐닝에 이어 무릎 확장 및 레그 프레스 운동 기계에 대한 단일 다리 1회 반복 최대 강도(1RM)가 결정됩니다. 운동할 사지(우세 또는 비우세)의 선택은 무작위로 이루어집니다.

실험적 시도 예비 평가 후 4일에서 14일 사이에 참가자는 이전 72시간 동안 격렬한 신체 활동을 자제하고 밤새 단식한 후 ~0700시에 실험실에 보고합니다. 빈번한 채혈(총 ~80mL)과 안정 동위원소 아미노산 추적자(L-[ring] 13C6 페닐알라닌)의 지속적인 주입을 위해 카테터를 양쪽 팔의 팔뚝 정맥에 삽입합니다. 참가자는 운동 시합을 제외하고 재판 내내 앙와위 자세를 유지합니다. 정상 상태 추적자 주입 150분 후 Bergström 생검 바늘 기술을 사용하여 국소 마취(1% 리도카인) 하에서 무작위로 선택된 다리의 외측광근 대퇴사두근에서 근육 생검을 얻습니다. 그 후, 참가자들은 반대쪽 다리로 단일 다리 저항 운동을 수행합니다. 운동은 사전 결정된 1RM의 75%에서 6세트의 무릎 확장 저항 운동으로 구성됩니다. 수의적 피로가 시작되기 전에 세트당 8-12회 반복하도록 설계된 프로토콜입니다. 운동 직후 참가자는 PA 750mg 또는 위약(둘 다 식별할 수 없는 캡슐 형태)을 물과 함께 섭취하고 추가로 750mg의 PA 또는 위약을 운동 후 60분에 섭취합니다. 그 후 참가자는 시험의 나머지 부분에 대해 앙와위 자세로 누워 있습니다. 직접적인 연구 참여가 없는 개인은 이중 맹검 방식으로 치료를 시행할 것입니다. 조사자는 데이터 분석 완료 시 치료 암에 대해 맹검 해제됩니다. 치료 소비 후 150분 및 300분에 양쪽 다리에서 근육 생검을 얻을 것입니다. 따라서 시험 기간 동안 총 5개의 침습성 근육 생검을 얻을 것이며, 이는 노인들에게 교차 디자인의 사용을 배제합니다. 각 생검은 약 3cm 간격의 별도 절개에서 얻습니다. 이 연구 설계 모델은 흡수 후 상태와 초기(0-2.5h), 후기(2.5-5h) 및 총체(0-5h) 시간 경과에 따른 근육 단백질 합성 속도를 결정할 수 있게 해줍니다.

데이터 분석 근육 단백질 합성을 계산하기 위해 연구자들은 생검에서 분리된 근육 단백질과 혈장의 동위원소 추적자 농축을 결정하기 위해 정교한 질량 분석 기술을 채택할 것입니다. 근육내 "단백동화 신호"(세포 크기의 주요 조절자인 라파마이신 경로의 기계적 표적에서)는 웨스턴 블롯(특정 인단백질의 함량을 검출하는 기술)을 통해 결정될 것입니다. 혈장 인슐린 농도는 면역분석으로 측정하고 혈장 지질 프로필은 기체 크로마토그래피 질량 분광법으로 측정합니다.