Bestemme de anabole muskelegenskapene til fosfatidsyre. (PA-AGE)

Etterforskerne vil rekruttere 16 friske (ikke-overvektige, ikke-diabetikere, ikke-røykere) eldre menn i alderen 65-80 år for å fullføre en dobbeltblindet, parallelldesignet studie, der de vil bli tilfeldig tildelt en fosfatidinsyre (N) = 8; PA) eller placebo (N=8; PL) behandlingsgruppe, tett matchet for antropometriske egenskaper. Deltakerne vil være rekreasjonsaktive, men ikke involvert i strukturert treningstrening. Alle studieprosedyrer vil bli tydelig forklart og skriftlig samtykke innhentet før studiedeltakelse.

Foreløpige vurderinger Etter forklaring av studien og innhenting av informert samtykke, vil deltakerne rapportere til laboratoriet vårt kl. 0800 i fastetilstand over natten og etter å ha avstått fra anstrengende fysisk aktivitet i >24 timer. Deltakerne vil bli veid på digital vekt til nærmeste 0,1 kg i lette klær. En dobbel røntgenabsorptiometri (DXA) skanning vil bli utført for å bestemme kroppssammensetning (fett og fettfri masse). Etter DXA-skanning vil maksimal styrke (1RM) for ett-bens én repetisjon bli bestemt for treningsmaskiner for kneforlengelse og benpress. Valg av lem som skal trenes (dominant eller ikke-dominant) vil bli randomisert.

Eksperimentelle forsøk Mellom 4 og 14 dager etter de foreløpige vurderingene vil deltakerne rapportere til laboratoriet kl. 0700 etter faste over natten, etter å ha avstått fra anstrengende fysisk aktivitet i 72 timer tidligere. Et kateter vil bli satt inn i en underarmsvene i begge armer for hyppig blodprøvetaking (~80 ml totalt) og en kontinuerlig infusjon av en stabil isotop-aminosyresporer (L-[ring] 13C6 fenylalanin). Deltakerne vil forbli i ryggleie gjennom hele forsøket med unntak av treningskampen. Etter 150 minutter med steady-state sporerinfusjon vil det bli tatt en muskelbiopsi fra vastus lateralis quadriceps-muskelen i et tilfeldig valgt ben under lokalbedøvelse (1 % lidokain) ved bruk av Bergström biopsinålteknikk. Deretter vil deltakerne utføre en kamp med enkeltbens motstandsøvelse på motsatt ben. Treningen vil bestå av 6 sett med kneekstensjonsmotstandstrening på 75 % av den forhåndsbestemte 1RM; en protokoll utformet for å fremkalle 8-12 repetisjoner per sett før utbruddet av frivillig tretthet. Umiddelbart etter trening vil deltakerne innta 750 mg PA eller placebo (begge i ikke-identifiserbar kapselform) med vann og ytterligere 750 mg PA eller placebo 60 minutter etter trening. Deretter vil deltakerne ligge i ryggleie resten av forsøket. En person uten direkte studieinvolvering vil administrere behandlinger på en dobbeltblind måte. Etterforskere vil bli avblindet for behandlingsarmer etter fullført dataanalyse. 150 og 300 minutter etter behandlingsforbruk vil det bli tatt muskelbiopsier fra begge bena. Dermed vil det bli tatt totalt 5 invasive muskelbiopsier i løpet av forsøket, noe som utelukker bruk av et crossover-design hos eldre individer. Hver biopsi vil bli tatt fra et separat snitt med en avstand på ~3 cm fra hverandre. Denne modellen for studiedesign vil tillate oss å bestemme hastigheten for muskelproteinsyntese i postabsorptiv tilstand og over det tidlige (0-2,5 timer), sent (2,5-5 timer) og samlet (0-5 timer) tidsforløp.

Dataanalyser For å beregne muskelproteinsyntese vil etterforskerne ta i bruk sofistikerte massespektrometriteknikker for å bestemme anrikning av isotopiske sporstoffer i biopsiisolerte muskelproteiner og plasma. Intramuskulære "anabole signaler" (i det mekanistiske målet for rapamycin-veien, en nøkkelregulator for cellestørrelse) vil bli bestemt via Western Blot (en teknikk for å oppdage innholdet av spesifikke fosfoproteiner). Plasmainsulinkonsentrasjoner vil bli målt ved immunoassay og plasmalipidprofiler ved gasskromatografi massespektrometri.