Bepaling van de spieranabole eigenschappen van fosfatidinezuur. (PA-AGE)

De onderzoekers zullen 16 gezonde (niet-zwaarlijvige, niet-diabetische, niet-rokers) oudere mannen in de leeftijd van 65-80 jaar rekruteren om een ​​dubbelblind, parallel opgezet onderzoek te voltooien, waarin ze willekeurig zullen worden toegewezen aan een fosfatidinezuur (N = 8; PA) of placebo (N=8; PL) behandelingsgroep, nauw op elkaar afgestemd voor antropometrische kenmerken. Deelnemers zullen recreatief actief zijn, maar niet betrokken zijn bij gestructureerde oefentraining. Alle studieprocedures zullen duidelijk worden uitgelegd en schriftelijke toestemming zal worden verkregen voorafgaand aan deelname aan de studie.

Voorlopige beoordelingen Na uitleg van het onderzoek en het verkrijgen van geïnformeerde toestemming, zullen de deelnemers zich om 08.00 uur in ons laboratorium melden in een nachtelijke nuchtere toestand en nadat ze gedurende meer dan 24 uur hebben afgezien van inspannende fysieke activiteit. Deelnemers worden gewogen op een digitale weegschaal tot op 0,1 kg nauwkeurig in lichte kleding. Er wordt een dual x-ray absorptiometry (DXA) scan uitgevoerd om de lichaamssamenstelling (vet en vetvrije massa) te bepalen. Na DXA-scanning wordt de maximale kracht voor een enkele herhaling van één been (1RM) bepaald voor oefenmachines voor knie-extensie en leg-press. Selectie van de te oefenen ledemaat (dominant of niet-dominant) zal willekeurig zijn.

Experimentele proeven Tussen 4 en 14 dagen na de voorlopige beoordelingen zullen de deelnemers zich om ∼0700 bij het laboratorium melden na een nacht vasten, na 72 uur eerder te hebben afgezien van zware fysieke activiteit. Er wordt een katheter ingebracht in een onderarmader van beide armen voor frequente bloedafname (~ 80 ml in totaal) en een continue infusie van een stabiele isotoop aminozuur tracer (L- [ring] 13C6 fenylalanine). Deelnemers blijven gedurende de hele proef in rugligging, met uitzondering van de oefenperiode. Na 150 minuten steady-state tracer-infusie zal een spierbiopsie worden verkregen van de vastus lateralis quadriceps-spier van een willekeurig gekozen been onder lokale anesthesie (1% lidocaïne) met behulp van de Bergström-biopsienaaldtechniek. Daarna voeren de deelnemers een weerstandsoefening op één been uit op het andere been. De oefening zal bestaan ​​uit 6 sets weerstandsoefeningen voor knie-extensie op 75% van de vooraf bepaalde 1RM; een protocol dat is ontworpen om 8-12 herhalingen per set uit te lokken voorafgaand aan het begin van vrijwillige vermoeidheid. Onmiddellijk na het sporten nemen de deelnemers 750 mg PA of een placebo in (beide in niet-identificeerbare capsulevorm) met water en nog eens 750 mg PA of placebo 60 minuten na het sporten. Daarna zullen de deelnemers de rest van de proef in rugligging liggen. Een persoon zonder directe betrokkenheid bij de studie zal behandelingen dubbelblind toedienen. Onderzoekers zullen na voltooiing van de gegevensanalyse de blindering voor behandelingsarmen opheffen. 150 en 300 minuten na de behandeling worden consumptiespierbiopten genomen van beide benen. Tijdens de proef zullen dus in totaal 5 invasieve spierbiopten worden verkregen, wat het gebruik van een crossover-ontwerp bij oudere personen uitsluit. Elke biopsie wordt verkregen via een afzonderlijke incisie met een tussenruimte van ~ 3 cm. Dit onderzoeksmodel stelt ons in staat de snelheden van spiereiwitsynthese te bepalen in de postabsorptieve toestand en over het vroege (0-2,5 uur), late (2,5-5 uur) en geaggregeerde (0-5 uur) tijdsverloop.

Gegevensanalyses Om de spiereiwitsynthese te berekenen, zullen de onderzoekers geavanceerde massaspectrometrische technieken gebruiken om isotopische tracerverrijking in biopsie-geïsoleerde spiereiwitten en plasma te bepalen. Intramusculaire "anabole signalen" (in het mechanistische doelwit van de rapamycineroute, een belangrijke regulator van de celgrootte) zullen worden bepaald via Western Blot (een techniek om het gehalte aan specifieke fosfo-eiwitten te detecteren). Plasma-insulineconcentraties zullen worden gemeten door middel van immunoassay en plasmalipidenprofielen door gaschromatografie massaspectrometrie.