Fastställande av fosfatidinsyras muskelanabola egenskaper. (PA-AGE)

Utredarna kommer att rekrytera 16 friska (icke-överviktiga, icke-diabetiker, icke-rökare) äldre män i åldern 65-80 år för att slutföra en dubbelblind, parallelldesignad studie, där de kommer att slumpmässigt tilldelas en fosfatidinsyra (N) = 8; PA) eller placebo (N=8; PL) behandlingsgrupp, nära matchad för antropometriska egenskaper. Deltagarna kommer att vara fritidsaktiva, men inte involverade i strukturerad träning. Alla studieprocedurer kommer att förklaras tydligt och skriftligt medgivande erhålls innan studiedeltagandet.

Preliminära bedömningar Efter förklaring av studien och inhämtande av informerat samtycke kommer deltagarna att rapportera till vårt laboratorium kl. 0800 i fastande över natten och efter att ha avstått från ansträngande fysisk aktivitet i >24 timmar. Deltagarna kommer att vägas på en digital våg till närmaste 0,1 kg i lätta kläder. En dubbel röntgenabsorptiometri (DXA) skanning kommer att utföras för att bestämma kroppssammansättning (fett- och fettfri massa). Efter DXA-skanning kommer maximal styrka (1RM) med ett ben att bestämmas för träningsmaskiner för knäförlängning och benpress. Valet av den lem som ska tränas (dominant eller icke-dominant) kommer att göras slumpmässigt.

Experimentella prövningar Mellan 4 och 14 dagar efter de preliminära bedömningarna kommer deltagarna att rapportera till laboratoriet klockan ~0700 efter en fasta över natten, efter att ha avstått från ansträngande fysisk aktivitet i 72 timmar tidigare. En kateter kommer att föras in i en underarmsven i båda armarna för frekvent blodprovtagning (~80 ml totalt) och en kontinuerlig infusion av en stabil isotopaminosyraspårare (L-[ring] 13C6 fenylalanin). Deltagarna kommer att förbli i ryggläge under hela försöket med undantag för träningspasset. Efter 150 minuters infusion av steady-state spårämne kommer en muskelbiopsi att erhållas från vastus lateralis quadriceps-muskeln i ett slumpmässigt utvalt ben under lokalbedövning (1 % lidokain) med hjälp av Bergström biopsinålteknik. Därefter kommer deltagarna att utföra ett anfall av enbensmotståndsövning på det motsatta benet. Träningen kommer att bestå av 6 uppsättningar av knäförlängningsmotståndsövningar på 75 % av den förutbestämda 1RM; ett protokoll utformat för att framkalla 8-12 repetitioner per uppsättning före början av viljemässig trötthet. Omedelbart efter träningen kommer deltagarna att inta 750 mg PA eller placebo (båda i icke identifierbar kapselform) med vatten och ytterligare 750 mg PA eller placebo 60 minuter efter träningen. Därefter kommer deltagarna att ligga i ryggläge under resten av försöket. En individ som inte är direkt involverad i studien kommer att administrera behandlingar på ett dubbelblindt sätt. Utredarna kommer att bli avblindade för behandlingsarmarna när dataanalysen är klar. Vid 150 och 300 min efter behandlingskonsumtion kommer muskelbiopsier att tas från båda benen. Således kommer totalt 5 invasiva muskelbiopsier att erhållas under försöket, vilket utesluter användningen av en crossover-design hos äldre individer. Varje biopsi kommer att erhållas från ett separat snitt med ett avstånd på ~3 cm från varandra. Denna modell för studiedesign kommer att tillåta oss att bestämma hastigheten för muskelproteinsyntes i det postabsorptiva tillståndet och under den tidiga (0-2,5 timmar), sena (2,5-5 timmar) och sammanlagda (0-5 timmar) tidsförloppet.

Dataanalyser För att beräkna muskelproteinsyntes kommer forskarna att anta sofistikerade masspektrometritekniker för att fastställa isotopiska spårämnens anrikning i biopsiisolerade muskelproteiner och plasma. Intramuskulära "anabola signaler" (i det mekanistiska målet för rapamycinvägen, en nyckelregulator för cellstorlek) kommer att bestämmas via Western Blot (en teknik för att detektera innehållet av specifika fosfoproteiner). Plasmainsulinkoncentrationer kommer att mätas genom immunanalys och plasmalipidprofiler med gaskromatografimasspektrometri.