Determinación de las propiedades anabólicas musculares del ácido fosfatídico. (PA-AGE)

Los investigadores reclutarán a 16 hombres ancianos sanos (no obesos, no diabéticos, no fumadores) de 65 a 80 años de edad para completar un estudio de diseño paralelo doble ciego, en el que se les asignará aleatoriamente a un ácido fosfatídico (N = 8; PA) o grupo de tratamiento con placebo (N=8; PL), emparejado estrechamente en cuanto a características antropométricas. Los participantes serán recreativamente activos, pero no participarán en un entrenamiento de ejercicio estructurado. Todos los procedimientos del estudio se explicarán claramente y se obtendrá el consentimiento por escrito antes de la participación en el estudio.

Evaluaciones preliminares Después de la explicación del estudio y la adquisición del consentimiento informado, los participantes se presentarán en nuestro laboratorio a las 08:00 en ayunas durante la noche y sin haber realizado actividad física extenuante durante >24 horas. Los participantes serán pesados ​​en una balanza digital con una precisión de 0,1 kg con ropa ligera. Se realizará una exploración de absorciometría dual de rayos X (DXA) para determinar la composición corporal (masa grasa y sin grasa). Después de la exploración DXA, se determinará la fuerza máxima de una repetición (1RM) con una sola pierna para las máquinas de ejercicios de extensión de rodilla y prensa de piernas. La selección de la extremidad a ejercitar (dominante o no dominante) será aleatoria.

Pruebas experimentales Entre 4 y 14 días después de las evaluaciones preliminares, los participantes se presentarán en el laboratorio a las 07:00 horas después de un ayuno nocturno, después de haberse abstenido de realizar actividad física extenuante durante las 72 horas previas. Se insertará un catéter en una vena del antebrazo de ambos brazos para muestras de sangre frecuentes (∼80 ml en total) y una infusión continua de un trazador de aminoácidos de isótopo estable (L-[anillo] 13C6 fenilalanina). Los participantes permanecerán en posición supina durante todo el ensayo con la excepción de la serie de ejercicios. Después de 150 min de infusión de trazador en estado estacionario, se obtendrá una biopsia muscular del músculo vastus lateralis cuádriceps de una pierna seleccionada al azar bajo anestesia local (lidocaína al 1 %) utilizando la técnica de aguja de biopsia de Bergström. A partir de entonces, los participantes realizarán una serie de ejercicios de resistencia con una sola pierna en la pierna opuesta. El ejercicio consistirá en 6 series de ejercicios de resistencia de extensión de rodilla al 75 % de la 1RM predeterminada; un protocolo diseñado para obtener de 8 a 12 repeticiones por serie antes del inicio de la fatiga voluntaria. Inmediatamente después del ejercicio, los participantes ingerirán 750 mg de PA o un placebo (ambos en forma de cápsula no identificable) con agua y otros 750 mg de PA o placebo 60 minutos después del ejercicio. A partir de entonces, los participantes permanecerán en posición supina durante el resto de la prueba. Una persona sin participación directa en el estudio administrará los tratamientos de manera doble ciego. Los investigadores no estarán cegados a los brazos de tratamiento al finalizar el análisis de datos. A los 150 y 300 min del consumo del tratamiento se obtendrán biopsias musculares de ambas piernas. Por lo tanto, se obtendrán un total de 5 biopsias musculares invasivas durante el ensayo, lo que impide el uso de un diseño cruzado en personas mayores. Cada biopsia se obtendrá de una incisión separada con una separación de ∼3 cm. Este modelo de diseño de estudio nos permitirá determinar las tasas de síntesis de proteínas musculares en el estado postabsortivo y durante el curso de tiempo temprano (0-2.5 h), tardío (2.5-5 h) y agregado (0-5 h).

Análisis de datos Para calcular la síntesis de proteínas musculares, los investigadores adoptarán técnicas sofisticadas de espectrometría de masas para determinar el enriquecimiento de trazadores isotópicos en plasma y proteínas musculares aisladas por biopsia. Las "señales anabólicas" intramusculares (en el objetivo mecánico de la vía de la rapamicina, un regulador clave del tamaño celular) se determinarán mediante Western Blot (una técnica para detectar el contenido de fosfoproteínas específicas). Las concentraciones de insulina en plasma se medirán mediante inmunoensayo y los perfiles de lípidos en plasma mediante cromatografía de gases y espectrometría de masas.