당뇨병성 궤양의 혈장 및 반흔

당뇨병성 발은 종종 절단으로 이어지는 흉부 진화 궤양을 동반하는 진성 당뇨병의 파괴적인 합병증입니다. 매년 백만 명이 넘는 사람들이 이 원인으로 인해 사지 말뚝을 잃습니다. 발 궤양은 당뇨병 환자의 가장 흔한 합병증이며 평생 동안 최대 15%에 영향을 미치는 것으로 생각됩니다(8, 9).

약 4주 동안 진행되지 않는 궤양은 재평가해야 합니다. 여러 연구에서는 일반적으로 만성 궤양과 특히 당뇨병성 족부 궤양이 섬유아세포 증식, 성장 인자, 금속단백분해효소(MMP) 및 세포외 기질 리모델링 사이의 균형에 변화가 있음을 보여주었습니다(2, 8, 9).

매트릭스 메탈로프로테이나제 수준의 변화, 활성화 시 조절, 정상 T 세포 발현 및 분비, 인터루킨 및 프로칼시토닌은 상처 치유와 관련이 있습니다(10). 메탈로프로테이나제와 그 조절제인 매트릭스 메탈로프로테이나제 조직 억제제(TIMPes)는 상처가 적절한 수준에서 정확한 위치에서 정확한 기간 동안 적절하게 치유되는 데 필요합니다. 이러한 측면은 당뇨병 기원의 궤양과 같은 만성 상처에서는 충족되지 않는 것으로 추정됩니다(11).

상처 부위에 적용된 자가 성장 인자가 풍부한 혈장(PRFC)은 혈관신생, 상피화 및 재생을 조절하는 수십 개의 성장 인자, 케모카인 및 사이토카인을 방출합니다(15, 16). 그들은 과립에 의해 분비되며 시간이 감소함에 따라 자연 치유 과정의 속도를 높이는 데 기여하는 것으로 밝혀졌습니다(4).

혈소판 풍부 혈장은 혈소판 농도가 기준치보다 높은 자가 또는 동종 혈소판 유도체로 정의됩니다. 자가 성장 인자가 풍부한 혈장(PRFC)은 원심 분리에 의해 처리된 후 혈소판 농도가 더 높고 기본 성장 인자보다 더 높은 자가 혈액에서 유래한 혈장의 일부입니다(8). 폐쇄형과 개방형의 두 가지 획득 기술이 있습니다. "폐쇄 기법"으로 입수하는 경우 사용 방법은 각 상용 시스템에서 사용되는 일회용 키트에 설명된 지침을 따라야 합니다. 반면에 "개방형 기술"은 더 낮은 혈액량과 간단한 장비로 더 높은 농도의 성장 인자를 얻을 수 있게 합니다(25).

자가 조직 특성을 고려할 때 PRFC는 정의상 기증자 혈액 물질의 사용과 관련된 질병 전파의 잠재적 위험이 없는 안전한 제품입니다. 일부 저자가 제안한 PRFC의 발암 가능성과 관련하여 이를 뒷받침할 수 있는 증거는 없습니다.

주요 출시 인자로는 PDGF(platelet-derived growth factor), TGF-b(beta transforming growth factor), PF4(platelet factor 4), IL-1(interleukin 1), PDAF(혈소판 유래 혈관신생 인자), 성장 인자(VEGF), 표피 성장 인자(EGF), 혈소판 유래 내피 성장 인자(PDEGF), 상피 세포 성장 인자(ECGF), 인슐린(IGF-1), 오스테오칼신, 오스테오넥틴, 피브리노겐, 피브로넥틴 및 트롬보스폰딘(TSP) (11,27). 활성화된 혈소판에서 분비되는 이러한 단백질은 치유의 여러 측면에 영향을 미칩니다.

PRFC는 일반 외과, 외상학 및 스포츠 의학, 치과 및 수술 성형 및 재건 수술, 피부과, 신경과 및 신경외과와 같은 다양한 의학 분야의 여러 임상 적용을 통해 상처 치유 과정을 개선하기 위해 재생 의학의 다양한 영역에서 사용되었습니다(28, 8 ).

성장 인자 및 혈소판 풍부 혈장(15,16,17,20,27,28)을 포함하는 당뇨병성 족부 궤양의 치료에서 새로운 전략의 구현은 이를 기반으로 한 역사를 가지고 있습니다.

이러한 견고한 생물학적 기반에도 불구하고 혈소판 유래 성장인자를 사용한 피부궤양의 치료 결과는 다양하고 통제된 연구는 상대적으로 적습니다. 혈소판 풍부 혈장을 평가한 연구에서 광범위한 제품(혈소판 및 백혈구의 다양한 농도, 다양한 적용 기술 및 빈도, 치료할 다양한 유형의 손상, 매우 이질적이고 데이터를 비교하고 결론을 도출하는 것을 거의 불가능하게 만드는(29, 30)

혈소판이 있는 이러한 생물학적 보충제가 상처 치유 및 치유의 보조제로서 제공하는 효과에 대해 지금까지 있었던 결과를 평가하는 리뷰가 있습니다. 만성 상처 치유에 대한 PRFC의 효과를 평가하는 10개의 무작위 임상 시험이 포함된 2016년에 발표된 메타 분석. 이 무작위 임상 시험 중 3건은 당뇨병성 궤양과 관련이 있었고 3건의 연구는 하지 정맥성 궤양과 관련되었습니다. 전반적인 분석은 PRFC의 효과를 밝히지 않았지만 결과는 자가 PRFC가 표준 치료에 비해 당뇨병성 궤양의 치유를 향상시킬 수 있지만 증거의 가치는 낮습니다(46).

이것이 우리가 PRFC의 사용이 관리가 어려운 당뇨병 기원의 만성 궤양의 치유에 미치는 영향을 명확하고 간단하지만 완전한 설명으로 평가할 수 있는 연구를 수행하는 것이 적절하다고 믿는 이유입니다.

연구 가설. 성장인자(PRFC)가 풍부한 혈장을 4주간 피내 투여하면 당뇨로 인한 관리가 어려운 만성 궤양의 치유시간, 상처의 크기를 줄이고 조직학적 수준의 변화를 유도하여 통증감소와 피부질환 개선에 기여 이용 가능한 최상의 치료와 비교하여 환자의 삶의 질.

재료 및 방법. 평가 및 치료를 위해 León 지역 종합 병원의 상처 클리닉에 오는 당뇨병 기원의 만성 궤양(4주 이상 진행) 환자를 대상으로 무작위 임상 시험을 실시했습니다.

샘플 크기는 그룹(대조 그룹 및 연구 그룹)당 20명의 환자에서 계산되었으며, 기동 종료 시 만성 궤양 크기의 감소에서 최소 50%의 차이를 감지했으며 통계적 유의성은 0.05%였습니다. 그리고 포텐 80%. 환자는 편의를 위해 비확률적 샘플링으로 선택됩니다.

절차. 레온 지역 종합 병원의 상처 클리닉 및 혈액학과를 통해 환자를 연구에 포함시키고 절차에 대한 설명을 한 후 참여하도록 초대하고 수락하는 사람은 서명을 요청합니다. 동의. 연구 참여에 동의한 환자는 같은 병원의 혈액학 서비스에서 대사 및 혈액학적 평가를 받게 됩니다. 실험실 연구(혈액 생체 측정, 혈액 화학, HbA1C, 지질 프로필 및 응고 시간)가 수행됩니다. 환자는 주 1회 Wound Clinic에서 인용되며, 생리 및 소독액, 생물막 괴사 조직 제거, 비흡수성 거즈, 건조 거즈 및 비흡수성 거즈로 폐색된 조직을 사용한 치유로 구성된 두 그룹 모두에서 고급 궤양 치료가 수행됩니다. 두 그룹의 붕대. 연구 그룹은 또한 치유 후 PRFC의 피내 적용을 가질 것입니다. 스터디 그룹도 첫 주(PRFC 적용 전)와 치료 종료 시(prFC 마지막 적용 후 1주)에 펀치(5mm x 5mm, 작은 부분을 고려)에 의한 생검으로 채취할 것입니다. 궤양이 완전히 봉합된 환자의 경우 추가 궤양 발생을 방지하기 위해 최종 생검을 실시하지 않습니다. 이는 당뇨병 기원의 궤양에 대한 조직학적 수준에서 성장 인자가 풍부한 혈장의 효과를 결정하기 위한 것입니다. 이러한 절차는 학생이 수행해야 합니다. 각 예약 시, 치료가 완료되기 전에 궤양의 주요 직경과 최소 직경을 측정하고 면적을 전산화된 면적 측정을 통해 계산합니다. 이것은 각 환자가 속한 그룹을 가리는 상처 클리닉을 담당하는 일반 외과의가 수행합니다. 또한 각 환자는 매주 시각적 통증 아날로그 척도(EVA) 및 SF-12 라이프스타일 설문지를 통해 평가됩니다. 유효성이 유효한 두 척도(49, 50). 연구 기간 동안, 궤양의 진화 및 각 환자의 치료에 대한 반응을 평가하기 위해 매주 궤양 사진 모니터링을 수행할 것입니다. 평가와 사진 후속 조치는 모두 학생이 수행합니다.

원심분리 기술 및 PRFC 획득. 8시간 금식 후, 혈액 샘플링(20cc)은 척골 동맥 천자에 의해 수행될 것이며, 이는 항응고제로서 3.8% 구연산 나트륨과 함께 멸균 튜브에 수집될 것입니다. 샘플은 사전 원심분리 혈소판 수를 수행하는 데 사용됩니다. 나머지 혈액 샘플은 실온에서 15분 동안 분당 3200회전(rpm)으로 원심분리됩니다. 실온에서 1800rpm에서 8분 동안 다시 원심분리되는 다양한 혈소판 함량을 갖는 획득된 혈장(약 3-4ml)의 피펫팅에 의한 분리. 이어서 세심한 피펫팅에 의해 혈장으로부터 얻은 분획물을 위에서 분리하고, 마지막 분획물(약 1-5 내지 2 ml, 튜브 하부에 위치)이 되도록 분리된 멸균 튜브에 수집한다. 성장 인자 또는 PRFC가 풍부한 혈장에 해당합니다(26). 이 PRFC 분획에서 0.5ml 샘플을 채취하여 혈소판 수를 측정하고 각 환자 및 적용 분야에서 원심분리 후 혈소판 성능을 결정합니다. 이 값은 각 환자의 혈소판 농도 증가를 결정하기 위해 기록됩니다. 남은 분획(1.5 ml)은 수집 즉시 피내 주사를 통해 적용됩니다. 이 절차는 연구 전반에 걸쳐 절차에 익숙하고 훈련을 받은 동일한 사람이 레온 종합 병원의 실험실에서 수행할 것입니다. 구연산 칼슘은 PRFC가 콜라겐 섬유와 접촉하게 되면 연조직에서 성장 인자의 활성화가 일어난다는 문헌에 따라 간주되기 때문에 활성제로서 첨가되지 않을 것입니다.

PRFC의 기술적 적용 위의 방법으로 궤양이 치유되고 거즈를 부착하기 전에 연구 그룹은 3cc 주사기로 tod 또는 궤양 주변에 피내 주사를 통해 얻은 PRFC의 2/3를 적용합니다. 및 피하 주사바늘. 나머지 세 번째는 드립 기법으로 궤양 침대에 적용됩니다. 그 위에 비흡수성 거즈를 얹고 마지막으로 마른 거즈와 붕대로 덮는다. 이는 다음 PRFC 신청(1주)까지 제거됩니다.

통계 분석. 연속 변수는 평균 +/- 표준 편차로 보고되고 범주형 변수는 빈도 및 백분율로 보고됩니다. 변수 유형에 따라 학습 그룹과 X2의 초기 비교를 위해 Student T를 수행합니다. 가설을 테스트하기 위해 반복 측정의 ANOVA와 Tukey의 사후 테스트를 수행합니다. 다중 상관 분석은 궤양의 치유 시간에 영향을 미치는 다른 요인의 가능한 연관성을 결정합니다.