구강 조직 샘플에 대한 흡연의 영향

연구 설계 및 설정 이것은 단일 센터, 조사자 눈가림, 단면 연구였습니다. 작업은 2018년 11월부터 2019년 7월까지 터키 이스탄불의 치주과에서 진행되었습니다. 연구 절차는 헬싱키 선언문의 지침에 따라 수행되었으며 대학 윤리위원회의 승인을 받았습니다(프로토콜 코드: 10840098-604.01.01-E.47596&10840098-604.01.01-E.4759; 승인일: 2018년 10월 30일). 이전 연구에서 건강한 치주염을 가진 6명의 비흡연 참가자의 데이터도 이 연구에 사용되었습니다. 적격 피험자에게 연구에 대해 구두로 설명한 후 참여 의사가 있는 피험자는 서면 동의서에 서명했습니다. 피험자에 대한 개인 식별 정보는 기밀로 유지되었습니다. 이 연구는 역학 관찰 연구 보고 강화 지침에 따라 검토되었습니다.

참가자 80명의 체계적으로 건강한 피험자(남녀 모두)가 연구에 등록되었습니다. 대상자는 2018년 11월부터 2019년 7월까지 치주검사를 위해 본원에 내원한 환자를 모집하였다. 임상적으로 건강한 치주 및 일반화된 치주염 III-IV기/B-C등급의 진단은 치주 및 임플란트 주위 질병 및 상태 분류에 관한 2017년 세계 워크샵에 따라 수행되었습니다. 피험자는 일반화 치주염 흡연자(SGP; n = 20), 일반화 치주염 비흡연자(NGP; n = 20), 임상적으로 건강한 치주염 흡연자(SHP; n = 20) 및 비흡연자의 4개 그룹으로 구분되었습니다. 임상적으로 건강한 치주염(NHP; n = 20). 치주염 대상자로 간주되기 위해 충족되어야 하는 다음 기준: 일반화된 치주염의 존재, 최소 20개의 치아의 존재, 치은절제술의 징후가 있는 어금니의 존재, 치관 연장 또는 프로빙 깊이 ≥ 5mm로 추출, 임상 부착 손실 ≥ 5mm, 및 프로빙 깊이 ≥ 5mm인 치아가 10개 이상 존재합니다. 다음 기준은 임상적으로 건강한 치주를 나타냅니다: 건강하고 온전한 치주, 탐침 깊이 없음 및 탐침 시 출혈.

임상 절차 모든 대상자는 연령, 성별 및 교육 수준을 평가하는 설문지에 응답했습니다. 치주질환에 대한 임상적 평가는 국제기준에 따라 실시하였다. 치태 지수, 탐침 깊이, 탐침 시 출혈, 임상 부착 소실을 포함한 CPP는 동일한 연구원이 치주 탐침을 사용하여 각 피험자의 치아당 6개 부위에서 기록했습니다. 샘플 수집 및 조직 병리학 적 평가 절차는 이전 보고서에서와 같이 수행되었습니다. 간단히 말해서, 두 개의 별도 멸균 사이토브러시를 사용하여 상악 소구치-대구치 부위의 부착된 치은 점막과 일치하는 뺨의 협점막으로부터 스미어 샘플을 수집했습니다. 샘플을 유리 슬라이드에 고정했습니다. 수술용 블레이드를 사용하여 발치 또는 치관 연장 중에 상악 대구치의 전정 영역에서 생검 샘플을 채취하고 분석할 때까지 10% 포르말린에 고정했습니다. 현미경 검사 동안 각 피험자는 샘플을 채취하기 전에 입을 헹구어 염색질 잔류물을 통한 인공물의 가능성을 줄였습니다.

실험실 절차 소핵 카운트(일차 결과)를 포함하는 박리된 구강 상피 세포를 평가하기 위해, Feulgen 반응이 모든 스미어 샘플에 대해 수행되었습니다. Schiff 시약을 사용하여 핵 염색 및 분석을 위해 세포를 고정액에 넣었습니다. 협측 및 치은 도말 샘플의 소핵은 1000배 배율로 오일 침지 상태에서 관찰하여 분석했습니다. 1,000개의 세포를 확인하고 존재하는 소핵의 수를 평가했습니다. 세포 내 2개의 핵의 존재, Feulgen 음성 밴드로 조여진 핵, 축소된 핵, 응축된 염색질, 핵 완전성의 상실을 수반하는 핵 분해 및 핵 용해와 같은 핵 형태학적 변화의 발생이 추정되었다. 지그재그 전략을 사용하여 세포를 계산했습니다.

염증 세포 및 혈관 밀도에 초점을 맞추어 조직병리학적 손상(2차 결과)을 평가했습니다. 손상은 0에서 3까지의 척도(0: 없음, 1: 약함, 2: 중간, 3: 강함)를 사용하는 수정된 반정량적 조직병리학적 평가 방법을 사용하여 평가되었습니다. 조직 샘플을 파라핀 왁스로 고정하고 4μm 두께로 연속 절단한 후 헤마톡실린-에오신으로 염색하고 400배 확대하여 검사했습니다. 모든 스미어 및 조직 샘플은 동일한 블라인드 조사관에 의해 동일한 실험실에서 동시에 분석되었습니다.

편향 각 참가자의 전신 건강 상태, 치과 병력 및 흡연 습관에 대한 평가는 공식 의료 기록과 관계없이 자기 보고 정보를 기반으로 했습니다. 한 연구원은 참가자로부터 데이터와 샘플을 수집하고 다른 연구원은 실험실 조사를 수행했습니다. 편견을 피하기 위해 조직 검사 중에 5개의 샘플 영역을 무작위로 선택했습니다.

연구 크기 샘플 크기는 G*Power 버전 3.1.9.4를 사용하여 결정되었습니다. 알파 유의 수준 0.05, 베타 값 0.1, 검정력 90%를 가정합니다. 4개의 스터디 그룹이 있었고 그룹당 20명의 참가자가 필요했기 때문에 80명의 피험자가 연구에 포함되었습니다.

통계 방법 모든 통계 분석에는 Number Cruncher Statistical System 2007 소프트웨어 프로그램이 사용되었습니다. 기술 통계(평균, 표준 편차, 중앙값)를 사용하여 데이터를 평가했습니다. 3개 이상의 정규 분포 매개변수의 평균을 비교하기 위해 일원 분산 분석 테스트를 사용했습니다. Bonferroni 테스트를 사용하여 그룹 간 쌍별 비교의 유의미한 차이를 확인했습니다. Pearson chi-square test는 질적 데이터를 비교하는 데 사용되었습니다. 유의성은 p<0.01 및 p<0.05 수준에서 평가되었습니다.