Virkninger af rygning på orale vævsprøver

Undersøgelsesdesign og rammer Dette var et enkelt-center, investigator-blindet, tværsnitsstudie. Arbejdet blev udført på afdelingen for periodontologi i Istanbul, Tyrkiet, mellem november 2018 og juli 2019. Undersøgelsesproceduren blev udført i overensstemmelse med retningslinjerne i Helsinki-erklæringen og godkendt af universitetets etiske komité (protokolkode: 10840098-604.01.01-E.47596&10840098-604.01.01-E.4759; dato for godkendelse: 30. oktober 2018). Data fra seks ikke-rygende deltagere med sundt parodontium fra vores tidligere undersøgelser blev også brugt i denne undersøgelse. Efter at undersøgelsen var blevet mundtligt forklaret til berettigede forsøgspersoner, underskrev de, der var villige til at deltage, en skriftlig, informeret samtykkeerklæring. Personlige, identificerbare oplysninger om emnerne blev holdt fortrolige. Undersøgelsen blev gennemgået efter retningslinjerne for styrkelse af rapporteringen af ​​observationsstudier i epidemiologi.

Deltagere Firs systemisk sunde forsøgspersoner, både mænd og kvinder, blev indskrevet i undersøgelsen. Deltagerne blev rekrutteret fra patienter, der kom til vores afdeling til parodontale undersøgelser mellem november 2018 og juli 2019. Diagnoser af klinisk sundt parodontium og generaliseret parodontitis stadier III-IV/grad B-C blev udført i henhold til 2017 World Workshop on the Classification of Periodontal and Peri-implant Diseases and Conditions. Forsøgspersoner blev opdelt i fire grupper: rygere med generaliseret paradentose (SGP; n = 20), ikke-rygere med generaliseret parodontitis (NGP; n = 20), rygere med klinisk sundt parodontium (SHP; n = 20) og ikke-rygere med klinisk sundt parodontium (NHP; n = 20). Følgende kriterier skulle være opfyldt for at blive betragtet som en paradentosepatient: tilstedeværelsen af ​​generaliseret parodontitis, tilstedeværelsen af ​​mindst 20 tænder, tilstedeværelsen af ​​en kindtand med indikation af gingivektomi, kroneforlængelse eller ekstraktion med en sonderingsdybde ≥ 5 mm, klinisk tilknytningstab ≥ 5 mm, og tilstedeværelsen af ​​mindst ti tænder med en sonderingsdybde ≥ 5 mm. Følgende kriterier indikerede et klinisk sundt parodontium: et sundt og intakt parodontium, ingen sonderingsdybde og blødning ved sondering.

Klinisk procedure Alle forsøgspersoner besvarede et spørgeskema, der vurderede alder, køn og uddannelsesniveau. En klinisk evaluering af periodontal sygdom blev udført i henhold til internationale standarder. CPP'erne, inklusive plakindeks, sonderingsdybde, blødning ved sondering og klinisk tilknytningstab, blev registreret fra seks steder pr. tand fra hvert individ under anvendelse af en parodontal probe af den samme forsker. Prøveindsamlingen og histopatologiske evalueringsprocedurer blev udført som i vores tidligere rapport. Kort fortalt blev udstrygningsprøver indsamlet fra den vedhæftede tandkødsslimhinde i det øvre præmolar-molare område og den bukkale slimhinde på den matchende kind ved hjælp af to separate sterile cytobørster. Prøver blev fastgjort på objektglas. Biopsiprøver blev taget fra det vestibulære område af de maksillære kindtænder under tandudtrækning eller kroneforlængelse ved hjælp af et kirurgisk blad og fikseret i 10 % formalin indtil analyse. Under mikroskopisk inspektion skyllede hvert forsøgsperson deres mund, før der blev taget prøver for at reducere muligheden for artefakter gennem kromatinrester.

Laboratorieprocedure For at evaluere de eksfolierede orale epitelceller, der indeholder mikrokernetal (det primære resultat), blev Feulgen-reaktionen udført på alle udstrygningsprøver. Celler blev anbragt i et fiksativ til nuklear farvning og analyse under anvendelse af Schiffs reagens. Mikrokerner i de bukkale og tandkødsudstrygningsprøver blev analyseret ved at observere dem i olienedsænkning ved 1000x forstørrelse. Et tusinde celler blev kontrolleret, og antallet af tilstedeværende mikrokerner blev vurderet. Forekomsten af ​​nukleare morfologiske ændringer, såsom tilstedeværelsen af ​​to kerner i en celle, kerner, der så ud til at være cinched med et Feulgen negativt bånd, krympede kerner, kondenseret kromatin, nuklear disintegration involverer tab af nuklear integritet og nuklear opløsning blev estimeret. En zigzag-strategi blev brugt til at beregne cellerne.

Histopatologiske skader (det sekundære resultat) blev evalueret ved at fokusere på inflammatoriske celle- og vaskulære tætheder. Skaden blev vurderet ved hjælp af en modificeret semi-kvantitativ histopatologisk vurderingsmetode ved hjælp af en skala fra 0 til 3 (0: ingen, 1: mild, 2: moderat og 3: intens). Vævsprøver blev fikseret i paraffinvoks, serielt sektioneret i en tykkelse på 4 µm, farvet med hæmatoxylin-eosin og undersøgt ved 400x forstørrelse. Alle udstrygnings- og vævsprøver blev analyseret samtidigt og i det samme laboratorium af den samme blindede investigator.

Bias Evalueringen af ​​hver deltagers systemiske helbredsstatus, tandhistorie og rygevaner var baseret på selvrapporterede oplysninger uanset officielle lægejournaler. En forsker indsamlede data og prøver fra deltagerne, mens en anden forsker foretog laboratorieundersøgelserne. For at undgå bias blev fem prøveområder tilfældigt udvalgt under de histologiske undersøgelser.

Undersøgelsesstørrelse Prøvestørrelsen blev bestemt ved hjælp af G*Power version 3.1.9.4, under antagelse af et alfa-signifikansniveau på 0,05, en betaværdi på 0,1 og 90 % effekt. Da der var fire undersøgelsesgrupper og behov for 20 deltagere pr. gruppe, blev firs forsøgspersoner inkluderet i undersøgelsen.

Statistiske metoder Softwareprogrammet Number Cruncher Statistical System 2007 blev brugt til alle statistiske analyser. Beskrivende statistik (middelværdi, standardafvigelse, median) blev brugt til at evaluere dataene. Envejsvariansanalysen blev brugt til at sammenligne middelværdierne af tre eller flere normalfordelte parametre. Bonferroni-testen blev brugt til at bestemme de signifikante forskelle i parvise sammenligninger mellem grupperne. Pearson chi-square-testen blev brugt til at sammenligne kvalitative data. Signifikans blev evalueret ved niveauerne p<0,01 og p<0,05.