불임 여성의 난소 재생을 위한 자가 엑소좀과 혈소판 성장 인자의 사용(Exosomas2024-1) (Exosom2024-1)

방법론 및 연구 개발

본 연구는 2024년 1월부터 2024년 9월까지 베네수엘라 카라카스의 한 불임 클리닉에서 실시된 관찰, 전향적, 무작위, 비교, 이중 맹검 및 분석 조사입니다. 이 연구에는 자신의 난자를 사용하여 임신을 원하고 난자 기증을 거부한 낮은 난소 예비력을 가진 38~46세의 환자 30명을 대상으로 수행된 난소 생체 자극 또는 생체 재생 절차가 포함되었습니다.

환자 선택 기준은 연구 시작 시 난소 예비력 감소를 나타내는 매개변수를 기반으로 했습니다. 여기에는 각 환자의 월경 주기 3일째에 측정된 호르몬 수치가 포함됩니다. 여포 자극 호르몬(FSH)은 12mIU/mL 이상, 에스트라디올은 35pg/mL 미만, 항뮐러 호르몬(AMH)은 0.7ng/mL 미만입니다. mL. 또한 환자는 기증 난자 사용을 거부하는 기록과 함께 낮은 난소 예비력 또는 난소 저항성을 확인하면서 양쪽 난소에 걸쳐 총 5개 미만의 난포가 있는 전엽 난포를 제시해야 했습니다.

세 가지 다른 치료 그룹을 기반으로 난소내 주사 프로토콜이 구현되었습니다.

환자의 혈소판, 활성화된 혈소판 성장 인자 및 생리학적 용액에서 얻은 자가 엑소좀(대조군).

이 절차는 월경 7, 8, 9일에 한 달에 한 번씩 4주기에 걸쳐 수행되었습니다. 환자들은 도착 순서에 따라 할당을 결정한 숙련된 간호사가 관리하는 무작위 목록을 사용하여 세 그룹 중 하나에 무작위로 할당되었습니다. 그룹은 다음과 같이 배포되었습니다.

그룹 1: 자신의 혈소판에서 추출한 자가 엑소좀을 투여받은 환자.

그룹 2: 활성화된 혈소판 성장 인자를 투여받은 환자. 그룹 3: 위약으로 생리학적 용액을 투여받는 환자.

포함 및 제외 기준

포함 기준:

• 38~46세의 여성 환자.
• 임신을 원하는 환자.
• 체질량지수(BMI)가 23~30인 환자.
• 지정된 매개변수에 기초하여 난소부전으로 진단된 환자.
• 난자 기증을 거부하는 환자들.
• 연구를 충분히 이해한 후 사전동의를 제공한 환자.
• 활동성 난소 또는 기타 종양학적 병리, 자궁내막종 또는 의심되는 종양이 없는 환자.
• 혈소판 수가 250,000개를 초과하고 혈액학적 질환의 병력이 없는 환자.
• 항응고제 치료를 받고 있지 않거나 활동성 감염을 보이는 환자.

제외 기준:

• 지정된 연령 범위(38~46세)를 벗어난 환자.
• 임신을 원하지 않는 환자.
• BMI가 23-30 범위를 벗어난 환자.
• 난소부전이 없거나 참여를 거부하고 사전 동의를 제공하지 않은 환자.
• 종양학적 질환이 있거나 종양이 의심되는 환자.
• 혈소판 수가 250,000 미만인 환자.
• 혈액질환의 병력이 있거나 항응고제 치료를 계속하고 있거나 활동성 감염이 있는 환자.

초기 평가 후 사전 동의를 얻었고 기본 실험실 테스트가 수행되었습니다. 각 환자의 FSH, LH, Estradiol, AMH 및 각 난소의 전낭수를 측정하기 위해 첫 번째 생체 자극 전 월경 주기 3일째에 각 환자로부터 혈액 샘플을 채취했습니다. 4차 생체자극 후 및 임신 촉진 절차를 시작하기 전에 동일한 테스트를 반복했습니다.

모든 혈액 샘플은 편견을 최소화하기 위해 카라카스의 임상 실험실에서 동시에 냉동 및 분석되었습니다. 환자들은 각 시술 전후 5일 동안 유제품과 가공 탄수화물이 없는 식이요법을 따르도록 권고받았습니다. 또한 혈소판 품질을 향상시키기 위해 하루에 두 번 무향 젤라틴을 섭취하도록 권장되었습니다.

수술은 병원 수술실에서 통제된 진정 하에 시행되었습니다. 분리 젤이 포함된 PRP 키트를 사용하여 모든 환자로부터 말초 혈액을 수집하여 모든 그룹에서 동일한 수집 및 처리 프로토콜을 보장했습니다. 혈액 샘플은 부드럽게 압축(지혈대 사용을 피함) 하에 진공관 시스템을 사용하여 팔뚝 정맥에서 채취하고 10분 동안 270g에서 원심분리했습니다.

치료 그룹:

자가 엑소좀 그룹: 혈소판 엑소좀을 분리하기 위해 EXOSMART 키트를 사용하여 PRP를 처리했습니다. 밀리리터당 5~6조 개의 엑소좀을 함유한 6cc의 농축액을 얻었고, 각 난소에 3cc를 주입했습니다.

혈소판 성장 인자 그룹: 활성화된 PRP를 준비하고 각 난소에 3cc를 주입했습니다.

대조군: 환자들은 각 난소에 3cc의 생리용액을 주입받았습니다.

주사는 질경유 초음파에 의해 안내되는 난포 흡인 바늘을 사용하여 질경유하여 수행되었습니다. 절차는 수술 진정 하에 초기 난포 단계(7-9일) 동안 수행되었습니다.