Utilisation d'exosomes autologues par rapport aux facteurs de croissance plaquettaires pour régénérer l'ovaire chez les femmes souffrant d'infertilité (Exosomas2024-1) (Exosom2024-1)

MÉTHODOLOGIE ET ​​DÉVELOPPEMENT DE L'ÉTUDE

Cette étude est une enquête observationnelle, prospective, randomisée, comparative, en double aveugle et analytique menée dans une clinique de fertilité à Caracas, au Venezuela, de janvier 2024 à septembre 2024. L'étude impliquait une procédure de biostimulation ou de biorégénération ovarienne réalisée sur 30 patientes âgées de 38 à 46 ans présentant une faible réserve ovarienne qui souhaitaient concevoir en utilisant leurs propres ovules et refusaient le don d'ovules.

Les critères de sélection des patientes étaient basés sur des paramètres indiquant une diminution de la réserve ovarienne au début de l'étude. Ceux-ci comprenaient des niveaux hormonaux mesurés le troisième jour du cycle menstruel de chaque patiente : hormone folliculo-stimulante (FSH) supérieure à 12 mUI/mL, estradiol inférieur à 35 pg/mL et hormone anti-müllérienne (AMH) inférieure à 0,7 ng/mL. mL. De plus, les patientes devaient présenter un nombre total de follicules antraux inférieur à cinq follicules dans les deux ovaires, confirmant une faible réserve ovarienne ou une résistance ovarienne, ainsi qu'un refus documenté d'utiliser des ovules de donneuses.

Un protocole d’injection intraovarienne a été mis en œuvre basé sur trois groupes de traitement différents :

Exosomes autologues obtenus à partir des plaquettes du patient, facteurs de croissance plaquettaires activés et solution physiologique (groupe témoin).

Cette procédure a été réalisée sur quatre cycles, une fois par mois, aux jours 7, 8 ou 9 de la menstruation. Les patients ont été répartis au hasard dans l'un des trois groupes à l'aide d'une liste randomisée gérée par une infirmière qualifiée qui déterminait la répartition en fonction de l'ordre d'arrivée. Les groupes étaient répartis comme suit :

Groupe 1 : Patients recevant des exosomes autologues dérivés de leurs propres plaquettes.

Groupe 2 : Patients recevant des facteurs de croissance plaquettaires activés. Groupe 3 : Patients recevant une solution physiologique comme placebo.

Critères d'inclusion et d'exclusion

Critères d'intégration :

• Patientes âgées de 38 à 46 ans.
• Patientes désireuses de concevoir.
• Patients ayant un indice de masse corporelle (IMC) compris entre 23 et 30.
• Patientes diagnostiquées avec une insuffisance ovarienne, sur la base des paramètres spécifiés.
• Patients refusant le don d'ovules.
• Patients ayant donné leur consentement éclairé après avoir pleinement compris l'étude.
• Patientes sans pathologie ovarienne active ou autre pathologie oncologique, sans endométriome ou tumeur suspectée.
• Patients ayant une numération plaquettaire supérieure à 250 000 et sans antécédents de maladies hématologiques.
• Patients ne suivant pas de traitement anticoagulant ou présentant des infections actives.

Critères d'exclusion :

• Patients en dehors de la tranche d’âge spécifiée (38-46 ans).
• Les patients ne veulent pas concevoir.
• Patients avec un IMC en dehors de la fourchette 23-30.
• Patientes sans insuffisance ovarienne ou ayant refusé de participer et n'ayant pas donné leur consentement éclairé.
• Patients atteints de maladies oncologiques ou de tumeurs suspectées.
• Patients ayant une numération plaquettaire inférieure à 250 000.
• Patients ayant des antécédents de maladies hématologiques, un traitement anticoagulant en cours ou des infections actives.

Suite à l'évaluation initiale, un consentement éclairé a été obtenu et des tests de laboratoire de base ont été effectués. Des échantillons de sang ont été prélevés sur chaque patiente le troisième jour de son cycle menstruel avant la première biostimulation pour mesurer la FSH, la LH, l'estradiol, l'AMH et le nombre de follicules antraux dans chaque ovaire. Ces mêmes tests ont été répétés après la quatrième biostimulation et avant de lancer les procédures de fertilité.

Tous les échantillons de sang ont été congelés et analysés simultanément dans un laboratoire clinique de Caracas afin de minimiser les biais. Il a été conseillé aux patients de suivre un régime sans produits laitiers ni glucides transformés pendant cinq jours avant et après chaque procédure. De plus, ils ont été encouragés à consommer de la gélatine sans saveur deux fois par jour pour améliorer la qualité des plaquettes.

Les procédures ont été réalisées sous sédation contrôlée dans la salle d’opération de la clinique. Le sang périphérique a été collecté chez tous les patients à l'aide d'un kit PRP avec gel séparateur, garantissant ainsi des protocoles de collecte et de traitement identiques dans tous les groupes. Des échantillons de sang ont été prélevés dans la veine cubitale à l'aide d'un système Vacutainer sous compression douce (en évitant l'utilisation de garrot) et centrifugés à 270 g pendant 10 minutes.

Groupes de traitement :

Groupe d'exosomes autologues : le PRP a été traité à l'aide du kit EXOSMART pour isoler les exosomes plaquettaires. Un concentré de 6 cc contenant 5 à 6 billions d’exosomes par millilitre a été obtenu et 3 cc ont été injectés dans chaque ovaire.

Groupe facteur de croissance plaquettaire : du PRP activé a été préparé et 3 cc ont été injectés dans chaque ovaire.

Groupe témoin : Les patientes ont reçu 3 cc de solution physiologique injectée dans chaque ovaire.

Les injections ont été réalisées par voie transvaginale à l’aide d’une aiguille d’aspiration folliculaire guidée par échographie transvaginale. Les procédures ont été réalisées au début de la phase folliculaire (jours 7 à 9) sous sédation chirurgicale.