Использование аутологичных экзосом в сравнении с факторами роста тромбоцитов для регенерации яичников у женщин с бесплодием (Exosomas2024-1) (Exosom2024-1)

МЕТОДОЛОГИЯ И РАЗВИТИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Это исследование представляет собой наблюдательное, проспективное, рандомизированное, сравнительное, двойное слепое и аналитическое исследование, проведенное в клинике репродуктивной медицины в Каракасе, Венесуэла, с января 2024 года по сентябрь 2024 года. В исследование включена процедура биостимуляции или биорегенерации яичников, проведенная у 30 пациенток в возрасте от 38 до 46 лет с низким овариальным резервом, пожелавших зачать ребенка с использованием собственных яйцеклеток и отказавшихся от донорства яйцеклеток.

Критерии отбора пациенток основывались на параметрах, свидетельствующих о снижении овариального резерва в начале исследования. К ним относятся гормональные уровни, измеренные на третий день менструального цикла каждой пациентки: фолликулостимулирующий гормон (ФСГ) более 12 мМЕ/мл, эстрадиол менее 35 пг/мл и антимюллеров гормон (АМГ) менее 0,7 нг/мл. мл. Кроме того, пациентки должны были предоставить общее количество антральных фолликулов менее пяти в обоих яичниках, что подтверждало низкий овариальный резерв или резистентность яичников, а также документально подтвержденный отказ от использования донорских яйцеклеток.

Протокол интраовариальных инъекций был реализован на основе трех различных групп лечения:

Аутологичные экзосомы, полученные из тромбоцитов пациента, активированных факторов роста тромбоцитов и физиологического раствора (контрольная группа).

Эту процедуру проводили в течение четырех циклов один раз в месяц, на 7, 8 или 9 дни менструации. Пациенты были случайным образом распределены в одну из трех групп с использованием рандомизированного списка, которым руководила обученная медсестра, которая определяла распределение в зависимости от порядка прибытия. Группы распределились следующим образом:

Группа 1: Пациенты, получающие аутологичные экзосомы, полученные из собственных тромбоцитов.

Группа 2: Пациенты, получающие активированные факторы роста тромбоцитов. Группа 3: Пациенты, получающие физиологический раствор в качестве плацебо.

Критерии включения и исключения

Критерии включения:

• Пациентки женского пола в возрасте от 38 до 46 лет.
• Пациентки, желающие забеременеть.
• Пациенты с индексом массы тела (ИМТ) от 23 до 30.
• У пациенток диагностирована недостаточность яичников на основании указанных показателей.
• Пациенты отказываются от донорства яйцеклеток.
• Пациенты, предоставившие информированное согласие после полного понимания сути исследования.
• Пациентки без активных яичников или других онкологических патологий, эндометриом или подозрений на опухоли.
• Пациенты с количеством тромбоцитов более 250 000 и отсутствием гематологических заболеваний в анамнезе.
• Пациенты, не получающие антикоагулянтную терапию или имеющие активную инфекцию.

Критерии исключения:

• Пациенты вне указанного возрастного диапазона (38-46 лет).
• Пациенты, не желающие зачать ребенка.
• Пациенты с ИМТ вне диапазона 23-30.
• Пациентки без недостаточности функции яичников или отказавшиеся от участия и не предоставившие информированное согласие.
• Пациенты с онкологическими заболеваниями или подозрением на опухоли.
• Пациенты с количеством тромбоцитов ниже 250 000.
• Пациенты с гематологическими заболеваниями в анамнезе, продолжающейся антикоагулянтной терапией или активными инфекциями.

После первоначальной оценки было получено информированное согласие и проведены базовые лабораторные исследования. Образцы крови собирали у каждой пациентки на третий день менструального цикла перед первой биостимуляцией для измерения ФСГ, ЛГ, эстрадиола, АМГ и количества антральных фолликулов в каждом яичнике. Эти же тесты были повторены после четвертой биостимуляции и перед началом процедур бесплодия.

Все образцы крови были заморожены и проанализированы одновременно в клинической лаборатории в Каракасе, чтобы минимизировать систематическую ошибку. Пациентам рекомендовалось соблюдать диету без молочных продуктов и обработанных углеводов в течение пяти дней до и после каждой процедуры. Кроме того, им рекомендовали употреблять неароматизированный желатин два раза в день, чтобы улучшить качество тромбоцитов.

Процедуры проводились под контролируемой седацией в операционной клиники. Периферическую кровь собирали у всех пациентов с использованием набора PRP с разделительным гелем, что обеспечивало одинаковые протоколы сбора и обработки во всех группах. Образцы крови брали из локтевой вены с использованием системы вакутайнеров при легком сжатии (без использования жгута) и центрифугировали при 270 g в течение 10 минут.

Группы лечения:

Группа аутологичных экзосом: PRP обрабатывали с использованием набора EXOSMART для выделения экзосом тромбоцитов. Был получен концентрат объемом 6 куб.см, содержащий 5-6 триллионов экзосом на миллилитр, и по 3 куб.см вводили в каждый яичник.

Группа факторов роста тромбоцитов: готовили активированную PRP и вводили по 3 см3 в каждый яичник.

Контрольная группа: пациенткам вводили по 3 мл физиологического раствора в каждый яичник.

Инъекции выполнялись трансвагинально с использованием фолликулярной аспирационной иглы под контролем трансвагинального ультразвука. Процедуры проводились в раннюю фолликулярную фазу (7-9 дни) под хирургической седацией.