Autológ exoszómák és vérlemezke-növekedési faktorok alkalmazása a meddőségben szenvedő nők petefészkének regenerálására (Exosomas2024-1) (Exosom2024-1)

MÓDSZERTAN ÉS TANULMÁNYFEJLESZTÉS

Ez a tanulmány egy megfigyeléses, prospektív, randomizált, összehasonlító, kettős vak és analitikus vizsgálat, amelyet a venezuelai caracasi termékenységi klinikán végeztek 2024 januárja és 2024 szeptembere között. A vizsgálatban petefészek biostimulációs vagy bioregenerációs eljárást végeztek 30 olyan 38 és 46 év közötti, alacsony petefészektartalékkal rendelkező betegen, akik saját petesejteik felhasználásával kívántak teherbe esni, és elutasították a petesejt adományozását.

A betegek kiválasztásának kritériumai azokon a paramétereken alapultak, amelyek a vizsgálat kezdetén csökkent petefészek-tartalékot jeleztek. Ezek közé tartozott az egyes betegek menstruációs ciklusának harmadik napján mért hormonszint: a tüszőstimuláló hormon (FSH) 12 mIU/ml-nél nagyobb, az ösztradiol kevesebb, mint 35 pg/ml, és az anti-Mülleri hormon (AMH) kevesebb, mint 0,7 ng/ml ml. Ezenkívül a betegeknek mindkét petefészekben ötnél kevesebb tüszőt kellett bemutatniuk, ami megerősítette az alacsony petefészek-tartalékot vagy a petefészek-rezisztenciát, valamint dokumentáltan megtagadták a donor petesejtek használatát.

Három különböző kezelési csoporton alapuló intraovariális injekciós protokollt vezettek be:

A páciens vérlemezkéiből nyert autológ exoszómák, aktivált vérlemezke növekedési faktorok és fiziológiai oldat (kontrollcsoport).

Ezt az eljárást négy ciklusban végezték el, havonta egyszer, a menstruáció 7., 8. vagy 9. napján. A betegeket véletlenszerűen besorolták a három csoport egyikébe egy randomizált listán, amelyet egy képzett nővér kezelt, aki az érkezési sorrend alapján határozta meg az elosztást. A csoportok a következőképpen oszlottak meg:

1. csoport: A saját vérlemezkéikből származó autológ exoszómákat kapó betegek.

2. csoport: aktivált vérlemezke növekedési faktort kapó betegek. 3. csoport: fiziológiás oldatot placeboként kapó betegek.

Befogadási és kizárási kritériumok

Bevételi kritériumok:

• 38-46 éves nőbetegek.
• Foganni vágyó betegek.
• 23 és 30 közötti testtömegindexű (BMI) betegek.
• Petefészekelégtelenséggel diagnosztizált betegek, a megadott paraméterek alapján.
• A petesejt adományozását megtagadó betegek.
• Azok a betegek, akik tájékozott beleegyezést adtak a vizsgálat teljes megértése után.
• Olyan betegek, akiknek nincs aktív petefészek- vagy egyéb onkológiai patológiája, endometriómája vagy daganat gyanúja.
• Olyan betegek, akiknek vérlemezkeszáma meghaladja a 250 000-et, és akiknek a kórelőzményében nincs hematológiai betegség.
• Olyan betegek, akik nem részesülnek antikoaguláns kezelésben, vagy akik aktív fertőzést mutatnak.

Kizárási kritériumok:

• A meghatározott életkoron kívüli betegek (38-46 év).
• Fogantatásra nem hajlandó betegek.
• A 23-30 tartományon kívüli BMI-vel rendelkező betegek.
• Olyan betegek, akiknek nincs petefészek-elégtelensége, vagy akik megtagadták a részvételt, és nem adtak beleegyező nyilatkozatot.
• Onkológiai megbetegedésben vagy daganatgyanús betegek.
• 250 000 alatti vérlemezkeszámú betegek.
• Olyan betegek, akiknek a kórelőzményében hematológiai betegségek szerepelnek, véralvadásgátló kezelésben vagy aktív fertőzésben szenvednek.

Az első értékelést követően tájékozott beleegyezést szereztek, és elvégezték az alapszintű laboratóriumi vizsgálatokat. Minden betegtől vérmintát vettünk a menstruációs ciklusuk harmadik napján az első biostimuláció előtt, hogy megmérjük az FSH, LH, ösztradiol, AMH és antrális tüszőszámot minden petefészekben. Ugyanezeket a teszteket megismételtük a negyedik biostimuláció után és a termékenységi eljárások megkezdése előtt.

Minden vérmintát lefagyasztottak és egyidejűleg elemeztek egy caracasi klinikai laboratóriumban, hogy minimalizálják a torzítást. A betegeknek azt tanácsolták, hogy minden egyes eljárás előtt és után öt napig tejtermékektől és feldolgozott szénhidrátoktól mentes étrendet kövessenek. Ezenkívül arra ösztönözték őket, hogy ízesítetlen zselatint fogyasszanak naponta kétszer, hogy javítsák a vérlemezkék minőségét.

A beavatkozásokat ellenőrzött nyugtatás mellett végezték a klinika műtőjében. Minden betegtől perifériás vért gyűjtöttek egy elválasztó géllel ellátott PRP készlettel, biztosítva az azonos gyűjtési és feldolgozási protokollokat minden csoportban. Vérmintákat vettünk a cubitalis vénából vacutainer rendszerrel, enyhe összenyomással (elkerülve az érszorító használatát), és 270 g-vel centrifugáltuk 10 percig.

Kezelési csoportok:

Autológ exoszómacsoport: A PRP-t az EXOSMART készlettel dolgozták fel a vérlemezke-exoszómák izolálására. 6 cm3-es koncentrátumot kaptunk, amely milliliterenként 5-6 billió exoszómát tartalmazott, és mindegyik petefészekbe 3 cm3-t injektáltunk.

Thrombocyta növekedési faktor csoport: Aktivált PRP-t készítettünk, és 3 cm3-t injektáltunk mindegyik petefészekbe.

Kontroll csoport: A betegek 3 cm3 fiziológiás oldatot kaptak mindegyik petefészekbe.

Az injekciókat transzvaginálisan hajtották végre, follikuláris aspirációs tűvel, amelyet transzvaginális ultrahang vezet. Az eljárásokat a korai follikuláris fázisban (7-9. nap) végeztük sebészeti szedáció mellett.