Brug af autologe exosomer vs blodpladevækstfaktorer til at regenerere æggestokken hos kvinder med infertilitet (Exosomas2024-1) (Exosom2024-1)

METODOLOGI OG STUDIEUDVIKLING

Denne undersøgelse er en observationel, prospektiv, randomiseret, komparativ, dobbeltblind og analytisk undersøgelse udført på en fertilitetsklinik i Caracas, Venezuela, fra januar 2024 til september 2024. Undersøgelsen involverede en ovariebiostimulation eller bioregenereringsprocedure udført på 30 patienter i alderen 38 til 46 år med lav ovariereserve, som ønskede at blive gravide med deres egne æg og afviste ægdonation.

Patientudvælgelseskriterier var baseret på parametre, der indikerer nedsat ovariereserve ved studiets begyndelse. Disse omfattede hormonniveauer målt på den tredje dag i hver patients menstruationscyklus: Follikelstimulerende hormon (FSH) større end 12 mIU/ml, østradiol mindre end 35 pg/ml og anti-müllerisk hormon (AMH) mindre end 0,7 ng/ ml. Derudover skulle patienterne præsentere et totalt antral follikeltal på mindre end fem follikler på tværs af begge æggestokke, hvilket bekræftede lav ovariereserve eller ovarieresistens, sammen med et dokumenteret afslag på at bruge donoræg.

En intraovarie injektionsprotokol blev implementeret baseret på tre forskellige behandlingsgrupper:

Autologe exosomer opnået fra patientens blodplader, aktiverede blodpladevækstfaktorer og fysiologisk opløsning (kontrolgruppe).

Denne procedure blev udført over fire cyklusser, en gang om måneden, på dag 7, 8 eller 9 af menstruationen. Patienterne blev tilfældigt fordelt til en af ​​de tre grupper ved hjælp af en randomiseret liste administreret af en uddannet sygeplejerske, som bestemte tildelingen baseret på ankomstrækkefølgen. Grupperne var fordelt som følger:

Gruppe 1: Patienter, der modtager autologe exosomer afledt af deres egne blodplader.

Gruppe 2: Patienter, der får aktiverede blodpladevækstfaktorer. Gruppe 3: Patienter, der får en fysiologisk opløsning som placebo.

Inklusions- og eksklusionskriterier

Inklusionskriterier:

• Kvindelige patienter i alderen 38 til 46 år.
• Patienter, der ønsker at blive gravide.
• Patienter med et Body Mass Index (BMI) mellem 23 og 30.
• Patienter diagnosticeret med ovariesvigt, baseret på de angivne parametre.
• Patienter, der nægter ægdonation.
• Patienter, der gav informeret samtykke efter fuldt ud at have forstået undersøgelsen.
• Patienter uden aktive ovarie- eller andre onkologiske patologier, endometriomer eller formodede tumorer.
• Patienter med et trombocyttal på over 250.000 og ingen historie med hæmatologiske sygdomme.
• Patienter, der ikke gennemgår antikoagulantbehandling eller udviser aktive infektioner.

Ekskluderingskriterier:

• Patienter uden for det angivne aldersinterval (38-46 år).
• Patienter, der ikke er villige til at blive gravide.
• Patienter med et BMI uden for intervallet 23-30.
• Patienter uden ovariesvigt, eller som afviste at deltage og ikke gav informeret samtykke.
• Patienter med onkologiske sygdomme eller mistænkte tumorer.
• Patienter med et blodpladetal under 250.000.
• Patienter med en historie med hæmatologiske sygdomme, igangværende antikoagulantbehandling eller aktive infektioner.

Efter den indledende evaluering blev informeret samtykke indhentet, og der blev udført baseline laboratorietests. Blodprøver blev indsamlet fra hver patient på den tredje dag af deres menstruationscyklus før den første biostimulation for at måle FSH, LH, Estradiol, AMH og antral follikeltal i hver ovarie. Disse samme test blev gentaget efter den fjerde biostimulation og før påbegyndelse af fertilitetsprocedurer.

Alle blodprøver blev frosset og analyseret samtidigt på et klinisk laboratorium i Caracas for at minimere bias. Patienterne blev rådet til at følge en diæt fri for mejeriprodukter og forarbejdede kulhydrater i fem dage før og efter hver procedure. Derudover blev de opfordret til at indtage uaromatiseret gelatine to gange dagligt for at forbedre blodpladekvaliteten.

Indgrebene blev udført under kontrolleret sedation på klinikkens operationsstue. Perifert blod blev indsamlet fra alle patienter ved hjælp af et PRP-kit med separatorgel, hvilket sikrede identiske indsamlings- og behandlingsprotokoller på tværs af alle grupper. Blodprøver blev udtaget fra cubitalvenen under anvendelse af et vacutainer-system under forsigtig kompression (undgå brug af tourniquet) og centrifugeret ved 270 g i 10 minutter.

Behandlingsgrupper:

Autolog Exosome Group: PRP blev behandlet ved hjælp af EXOSMART-kittet til at isolere blodplade-exosomer. Et koncentrat på 6 cm3 indeholdende 5-6 billioner exosomer pr. milliliter blev opnået, og 3 cm3 blev injiceret i hver æggestok.

Blodpladevækstfaktorgruppe: Aktiveret PRP blev fremstillet, og 3 cc blev injiceret i hver ovarie.

Kontrolgruppe: Patienterne fik 3 cc fysiologisk opløsning injiceret i hver ovarie.

Injektioner blev udført transvaginalt under anvendelse af en follikulær aspirationsnål styret af transvaginal ultralyd. Procedurerne blev udført i den tidlige follikulære fase (dage 7-9) under kirurgisk sedation.