Användning av autologa exosomer vs trombocyttillväxtfaktorer för att regenerera äggstocken hos kvinnor med infertilitet (Exosomas2024-1) (Exosom2024-1)

METOD OCH STUDIEUTVECKLING

Denna studie är en observationell, prospektiv, randomiserad, jämförande, dubbelblind och analytisk undersökning som genomfördes på en fertilitetsklinik i Caracas, Venezuela, från januari 2024 till september 2024. Studien involverade en äggstocksbiostimulering eller bioregenereringsprocedur utförd på 30 patienter i åldrarna 38 till 46 år med låg äggstocksreserv som ville bli gravid med sina egna ägg och avböjde äggdonation.

Patienturvalskriterier baserades på parametrar som tyder på minskad äggstocksreserv vid studiens början. Dessa inkluderade hormonella nivåer mätta på den tredje dagen av varje patients menstruationscykel: follikelstimulerande hormon (FSH) större än 12 mIU/ml, Estradiol mindre än 35 pg/ml och anti-Müllerian Hormone (AMH) mindre än 0,7 ng/ ml. Dessutom var patienterna tvungna att uppvisa ett totalt antralt follikeltal på färre än fem folliklar över båda äggstockarna, vilket bekräftade låg äggstocksreserv eller äggstocksresistens, tillsammans med en dokumenterad vägran att använda donatorägg.

Ett intraovarial injektionsprotokoll implementerades baserat på tre olika behandlingsgrupper:

Autologa exosomer erhållna från patientens blodplättar, aktiverade trombocyttillväxtfaktorer och fysiologisk lösning (kontrollgrupp).

Denna procedur utfördes under fyra cykler, en gång per månad, dag 7, 8 eller 9 av menstruationen. Patienterna fördelades slumpmässigt till en av de tre grupperna med hjälp av en randomiserad lista som hanterades av en utbildad sjuksköterska som bestämde tilldelningen baserat på ankomstordningen. Grupperna fördelade sig enligt följande:

Grupp 1: Patienter som får autologa exosomer som härrör från sina egna blodplättar.

Grupp 2: Patienter som får aktiverade trombocyttillväxtfaktorer. Grupp 3: Patienter som får en fysiologisk lösning som placebo.

Inklusions- och uteslutningskriterier

Inklusionskriterier:

• Kvinnliga patienter i åldern 38 till 46 år.
• Patienter som vill bli gravida.
• Patienter med ett Body Mass Index (BMI) mellan 23 och 30.
• Patienter som diagnostiserats med ovariesvikt, baserat på de angivna parametrarna.
• Patienter som vägrar äggdonation.
• Patienter som lämnat informerat samtycke efter att ha förstått studien fullt ut.
• Patienter utan aktiva äggstocks- eller andra onkologiska patologier, endometriom eller misstänkta tumörer.
• Patienter med ett trombocytantal som överstiger 250 000 och ingen historia av hematologiska sjukdomar.
• Patienter som inte genomgår antikoagulantbehandling eller uppvisar aktiva infektioner.

Uteslutningskriterier:

• Patienter utanför det angivna åldersintervallet (38-46 år).
• Patienter som inte vill bli gravida.
• Patienter med ett BMI utanför intervallet 23-30.
• Patienter utan ovariesvikt eller som avböjt att delta och inte lämnat informerat samtycke.
• Patienter med onkologiska sjukdomar eller misstänkta tumörer.
• Patienter med ett trombocytantal under 250 000.
• Patienter med en historia av hematologiska sjukdomar, pågående antikoagulantiabehandling eller aktiva infektioner.

Efter den första utvärderingen erhölls informerat samtycke och baslinjelaboratorietester utfördes. Blodprover togs från varje patient på den tredje dagen av sin menstruationscykel före den första biostimuleringen för att mäta FSH, LH, Estradiol, AMH och antral follikelantal i varje äggstock. Dessa samma tester upprepades efter den fjärde biostimuleringen och innan fertilitetsprocedurer påbörjades.

Alla blodprover frystes och analyserades samtidigt på ett kliniskt laboratorium i Caracas för att minimera bias. Patienterna rekommenderades att följa en diet fri från mejeriprodukter och bearbetade kolhydrater i fem dagar före och efter varje procedur. Dessutom uppmuntrades de att konsumera gelatin utan smak två gånger dagligen för att förbättra trombocytkvaliteten.

Ingreppen utfördes under kontrollerad sedering i klinikens operationssal. Perifert blod samlades in från alla patienter med hjälp av ett PRP-kit med separatorgel, vilket säkerställde identiska insamlings- och bearbetningsprotokoll i alla grupper. Blodprover togs från kubitalvenen med användning av ett vacutainer-system under försiktig kompression (undvikande av tourniquet-användning) och centrifugerades vid 270 g under 10 minuter.

Behandlingsgrupper:

Autolog exosomgrupp: PRP bearbetades med användning av EXOSMART-kitet för att isolera blodplättsexosomer. Ett koncentrat på 6 cc innehållande 5-6 biljoner exosomer per milliliter erhölls och 3 cc injicerades i varje äggstock.

Trombocyttillväxtfaktorgrupp: Aktiverad PRP framställdes och 3 cc injicerades i varje äggstock.

Kontrollgrupp: Patienterna fick 3 cc fysiologisk lösning injicerad i varje äggstock.

Injektioner utfördes transvaginalt med användning av en follikulär aspirationsnål styrd av transvaginalt ultraljud. Procedurerna utfördes under den tidiga follikulära fasen (dagarna 7-9) under kirurgisk sedering.