Bruk av autologe eksosomer vs blodplatevekstfaktorer for å regenerere eggstokken hos kvinner med infertilitet (Exosomas2024-1) (Exosom2024-1)

METODIKK OG STUDIEUTVIKLING

Denne studien er en observasjonell, prospektiv, randomisert, komparativ, dobbeltblind og analytisk undersøkelse utført ved en fertilitetsklinikk i Caracas, Venezuela, fra januar 2024 til september 2024. Studien involverte en ovariebiostimulering eller bioregenereringsprosedyre utført på 30 pasienter i alderen 38 til 46 år med lav ovariereserve som ønsket å bli gravid med sine egne egg og avslo eggdonasjon.

Pasientseleksjonskriterier var basert på parametere som indikerte redusert ovariereserve ved studiens start. Disse inkluderte hormonelle nivåer målt på den tredje dagen av hver pasients menstruasjonssyklus: follikkelstimulerende hormon (FSH) større enn 12 mIU/ml, østradiol mindre enn 35 pg/mL og anti-müllerisk hormon (AMH) mindre enn 0,7 ng/ ml. I tillegg måtte pasientene presentere et totalt antral follikkelantall på færre enn fem follikler på tvers av begge eggstokkene, noe som bekrefter lav eggstokkreserve eller eggstokkresistens, sammen med en dokumentert avslag på å bruke donoregg.

En intraovarie injeksjonsprotokoll ble implementert basert på tre forskjellige behandlingsgrupper:

Autologe eksosomer hentet fra pasientens blodplater, Activated Platelet Growth Factors og Physiological Solution (kontrollgruppe).

Denne prosedyren ble utført over fire sykluser, en gang per måned, på dagene 7, 8 eller 9 av menstruasjonen. Pasientene ble tilfeldig fordelt i en av de tre gruppene ved hjelp av en randomisert liste administrert av en utdannet sykepleier som bestemte tildeling basert på rekkefølgen av ankomst. Gruppene ble fordelt som følger:

Gruppe 1: Pasienter som får autologe eksosomer avledet fra sine egne blodplater.

Gruppe 2: Pasienter som får aktiverte blodplatevekstfaktorer. Gruppe 3: Pasienter som får en fysiologisk løsning som placebo.

Inkluderings- og eksklusjonskriterier

Inkluderingskriterier:

• Kvinnelige pasienter i alderen 38 til 46 år.
• Pasienter som ønsker å bli gravide.
• Pasienter med en kroppsmasseindeks (BMI) mellom 23 og 30.
• Pasienter diagnostisert med ovariesvikt, basert på spesifiserte parametere.
• Pasienter som nekter eggdonasjon.
• Pasienter som ga informert samtykke etter å ha forstått studien fullt ut.
• Pasienter uten aktive ovarie- eller andre onkologiske patologier, endometriomer eller mistenkte svulster.
• Pasienter med blodplatetall over 250 000 og ingen historie med hematologiske sykdommer.
• Pasienter som ikke gjennomgår antikoagulasjonsbehandling eller har aktive infeksjoner.

Ekskluderingskriterier:

• Pasienter utenfor spesifisert aldersgruppe (38-46 år).
• Pasienter som ikke ønsker å bli gravide.
• Pasienter med en BMI utenfor området 23-30.
• Pasienter uten ovariesvikt eller som nektet å delta og ikke ga informert samtykke.
• Pasienter med onkologiske sykdommer eller mistenkt svulst.
• Pasienter med blodplatetall under 250 000.
• Pasienter med en historie med hematologiske sykdommer, pågående antikoagulasjonsbehandling eller aktive infeksjoner.

Etter den innledende evalueringen ble informert samtykke innhentet, og baseline laboratorietester ble utført. Blodprøver ble tatt fra hver pasient på den tredje dagen av deres menstruasjonssyklus før den første biostimuleringen for å måle FSH, LH, Estradiol, AMH og antral follikkeltelling i hver eggstokk. De samme testene ble gjentatt etter den fjerde biostimuleringen og før man startet fertilitetsprosedyrer.

Alle blodprøver ble frosset og analysert samtidig ved et klinisk laboratorium i Caracas for å minimere skjevhet. Pasientene ble rådet til å følge en diett fri for meieriprodukter og bearbeidede karbohydrater i fem dager før og etter hver prosedyre. I tillegg ble de oppfordret til å konsumere unflavored gelatin to ganger daglig for å forbedre blodplatekvaliteten.

Prosedyrene ble utført under kontrollert sedasjon på klinikkens operasjonsrom. Perifert blod ble samlet inn fra alle pasienter ved å bruke et PRP-sett med separatorgel, noe som sikret identiske innsamlings- og behandlingsprotokoller på tvers av alle grupper. Blodprøver ble tatt fra cubitalvenen ved bruk av et vacutainer-system under skånsom kompresjon (for å unngå bruk av tourniquet) og sentrifugert ved 270 g i 10 minutter.

Behandlingsgrupper:

Autolog eksosomgruppe: PRP ble behandlet ved å bruke EXOSMART-settet for å isolere blodplateeksosomer. Et konsentrat på 6 cc inneholdende 5-6 billioner eksosomer per milliliter ble oppnådd, og 3 cc ble injisert i hver eggstokk.

Blodplatevekstfaktorgruppe: Aktivert PRP ble fremstilt, og 3 cc ble injisert i hver eggstokk.

Kontrollgruppe: Pasientene fikk 3 cc fysiologisk oppløsning injisert i hver eggstokk.

Injeksjoner ble utført transvaginalt ved bruk av en follikulær aspirasjonsnål ledet av transvaginal ultralyd. Prosedyrene ble utført i den tidlige follikkelfasen (dag 7-9) under kirurgisk sedasjon.