Verwendung autologer Exosomen im Vergleich zu Thrombozytenwachstumsfaktoren zur Regeneration des Eierstocks bei Frauen mit Unfruchtbarkeit (Exosomas2024-1) (Exosom2024-1)

METHODIK UND STUDIENENTWICKLUNG

Bei dieser Studie handelt es sich um eine beobachtende, prospektive, randomisierte, vergleichende, doppelblinde und analytische Untersuchung, die von Januar 2024 bis September 2024 in einer Fruchtbarkeitsklinik in Caracas, Venezuela, durchgeführt wurde. Die Studie umfasste ein ovarielles Biostimulations- oder Bioregenerationsverfahren, das an 30 Patientinnen im Alter von 38 bis 46 Jahren mit geringer Eierstockreserve durchgeführt wurde, die mit ihren eigenen Eizellen schwanger werden wollten und eine Eizellspende ablehnten.

Die Patientenauswahlkriterien basierten auf Parametern, die zu Beginn der Studie auf eine verminderte ovarielle Reserve hindeuteten. Dazu gehörten die Hormonspiegel, die am dritten Tag des Menstruationszyklus jeder Patientin gemessen wurden: Follikelstimulierendes Hormon (FSH) über 12 mIU/ml, Östradiol unter 35 pg/ml und Anti-Müller-Hormon (AMH) unter 0,7 ng/ml. ml. Darüber hinaus mussten die Patientinnen eine Gesamtzahl an Antrumfollikeln von weniger als fünf Follikeln in beiden Eierstöcken vorweisen, was eine geringe Eierstockreserve oder Eierstockresistenz bestätigte, sowie eine dokumentierte Weigerung, Spendereizellen zu verwenden.

Basierend auf drei verschiedenen Behandlungsgruppen wurde ein intraovarielles Injektionsprotokoll implementiert:

Aus den Blutplättchen des Patienten gewonnene autologe Exosomen, aktivierte Blutplättchenwachstumsfaktoren und physiologische Lösung (Kontrollgruppe).

Dieses Verfahren wurde über vier Zyklen einmal pro Monat an den Tagen 7, 8 oder 9 der Menstruation durchgeführt. Die Patienten wurden anhand einer randomisierten Liste, die von einer ausgebildeten Krankenschwester verwaltet wurde und die Zuteilung anhand der Reihenfolge ihres Eintreffens festlegte, zufällig einer der drei Gruppen zugeordnet. Die Gruppen wurden wie folgt aufgeteilt:

Gruppe 1: Patienten, die autologe Exosomen aus ihren eigenen Blutplättchen erhalten.

Gruppe 2: Patienten, die aktivierte Thrombozytenwachstumsfaktoren erhalten. Gruppe 3: Patienten, die eine physiologische Lösung als Placebo erhalten.

Einschluss- und Ausschlusskriterien

Einschlusskriterien:

• Weibliche Patienten im Alter von 38 bis 46 Jahren.
• Patientinnen mit Kinderwunsch.
• Patienten mit einem Body-Mass-Index (BMI) zwischen 23 und 30.
• Patienten, bei denen anhand der angegebenen Parameter eine Ovarialinsuffizienz diagnostiziert wurde.
• Patienten, die eine Eizellspende ablehnen.
• Patienten, die ihre Einverständniserklärung abgegeben haben, nachdem sie die Studie vollständig verstanden hatten.
• Patienten ohne aktive Eierstock- oder andere onkologische Pathologien, Endometriome oder vermutete Tumoren.
• Patienten mit einer Thrombozytenzahl von mehr als 250.000 und ohne Vorgeschichte hämatologischer Erkrankungen.
• Patienten, die sich keiner gerinnungshemmenden Therapie unterziehen oder aktive Infektionen aufweisen.

Ausschlusskriterien:

• Patienten außerhalb des angegebenen Altersbereichs (38–46 Jahre).
• Patienten, die nicht schwanger werden wollen.
• Patienten mit einem BMI außerhalb des Bereichs 23–30.
• Patienten ohne Eierstockversagen oder Patienten, die die Teilnahme verweigerten und keine Einverständniserklärung abgegeben haben.
• Patienten mit onkologischen Erkrankungen oder Verdacht auf Tumoren.
• Patienten mit einer Thrombozytenzahl unter 250.000.
• Patienten mit hämatologischen Erkrankungen in der Vorgeschichte, laufender Antikoagulanzientherapie oder aktiven Infektionen.

Nach der ersten Bewertung wurde eine Einverständniserklärung eingeholt und grundlegende Labortests durchgeführt. Von jeder Patientin wurden am dritten Tag ihres Menstruationszyklus vor der ersten Biostimulation Blutproben entnommen, um die FSH-, LH-, Östradiol-, AMH- und Antralfollikelzahl in jedem Eierstock zu messen. Dieselben Tests wurden nach der vierten Biostimulation und vor Beginn der Fruchtbarkeitsverfahren wiederholt.

Alle Blutproben wurden eingefroren und gleichzeitig in einem klinischen Labor in Caracas analysiert, um Verzerrungen zu minimieren. Den Patienten wurde empfohlen, fünf Tage vor und nach jedem Eingriff eine Diät ohne Milchprodukte und verarbeitete Kohlenhydrate einzuhalten. Darüber hinaus wurden sie dazu angehalten, zweimal täglich geschmacksneutrale Gelatine zu sich zu nehmen, um die Qualität der Blutplättchen zu verbessern.

Die Eingriffe wurden unter kontrollierter Sedierung im Operationssaal der Klinik durchgeführt. Bei allen Patienten wurde peripheres Blut mithilfe eines PRP-Kits mit Trenngel gesammelt, wodurch in allen Gruppen identische Entnahme- und Verarbeitungsprotokolle sichergestellt wurden. Mit einem Vacutainer-System wurden Blutproben aus der Vena cubitalis unter sanfter Kompression (Vermeidung der Verwendung von Tourniquets) entnommen und 10 Minuten lang bei 270 g zentrifugiert.

Behandlungsgruppen:

Autologe Exosomengruppe: PRP wurde mit dem EXOSMART-Kit verarbeitet, um Thrombozyten-Exosomen zu isolieren. Es wurde ein Konzentrat von 6 ml erhalten, das 5–6 Billionen Exosomen pro Milliliter enthielt, und 3 ml wurden in jeden Eierstock injiziert.

Gruppe der Thrombozytenwachstumsfaktoren: Es wurde aktiviertes PRP hergestellt und 3 ml in jeden Eierstock injiziert.

Kontrollgruppe: Den Patienten wurden 3 ml physiologische Lösung in jeden Eierstock injiziert.

Die Injektionen wurden transvaginal mit einer Follikelaspirationsnadel durchgeführt, die durch transvaginalen Ultraschall geführt wurde. Die Eingriffe wurden in der frühen Follikelphase (Tage 7–9) unter chirurgischer Sedierung durchgeführt.