Deze pagina is automatisch vertaald en de nauwkeurigheid van de vertaling kan niet worden gegarandeerd. Raadpleeg de Engelse versie voor een brontekst.

Mitochondriale nt3243 A> G-mutatie in Taiwan

13 april 2014 bijgewerkt door: National Taiwan University Hospital

Klinische kenmerken en prognostische factoren van mitochondriale nt3243 A>G-mutatie in Taiwan

Mitochondriale ziekten zijn multisysteemaandoeningen die zich presenteren met een breed scala aan klinische manifestaties. Mitochondriaal DNA nt3243A>G-mutatie is een van de meest voorkomende mutaties die worden gezien bij mitochondriale ziekten. Syndromen geassocieerd met deze mutatie omvatten mitochondriale encefalopathie, lactaatacidose en beroerte-achtige episodes (MELAS), maternaal overgeërfde diabetes en doofheid (MIDD), myoclonische epilepsie met rafelige rode vezels (MERRF) en chronische progressieve externe oftalmoplegie (CPEO). Klinische analyses van mitochondriaal DNA nt3243A>G-mutatie uit Taiwan blijven schaars. De huidige studie heeft tot doel de klinische kenmerken en prognostische factoren van patiënten met mt3243A> G-mutatie in Taiwan te onderzoeken.

Studie Overzicht

Toestand

Onbekend

Conditie

Gedetailleerde beschrijving

Patiënten en klinische kenmerken. De studie zal worden uitgevoerd in het National Taiwan University Hospital, een tertiair medisch centrum in Taipei. De afdeling Medische Genetica van het National Taiwan University Hospital ontvangt verwijzingen en voert genetische tests uit voor ziekenhuizen in heel Taiwan. We zullen de medische kaart bekijken van alle patiënten met gedocumenteerde mitochondriaal DNA nt3243 puntmutatie. Demografische gegevens, leeftijd bij aanvang van de symptomen, klinische kenmerken (waaronder beroerte, epileptische episode, melkzuurniveau, diabetes mellitus, gehoorstoornis, myopathie, elektrocardiogramafwijking, chronische progressieve externe oftalmoplegie), relevante familiegeschiedenis, behandeling en resultaat zullen worden opgenomen. Het volledige MELAS-fenotype werd gedefinieerd als de aanwezigheid van focale gebeurtenissen in het centrale zenuwstelsel, epileptische aanvallen, beroertes of beide.

Genetische analyse. Genomisch DNA werd geëxtraheerd uit perifere bloedleukocyten met behulp van de Puregene DNA-zuiveringskit (Gentra Systems, Minneapolis, Minnesota, VS). Polymerase kettingreactie (PCR) voor mitochondriaal DNA nt3243 puntmutatie werd uitgevoerd door linker primer 5'-cggagtaatccaggtcggtt-3' en rechter primer 5'-ggaattgaacctctgactgt-3'. Aanwezigheid van mitochondriaal DNA nt3243 A>G-mutatie werd gedetecteerd na digestie met Hae III-restrictie-enzym.

Heteroplasmie van mitochondriale nt3243A>G-mutatie werd gedetecteerd door real-time amplificatie refractaire mutatiesysteem kwantitatieve PCR (ARMS-qPCR) assay zoals eerder gerapporteerd [19]. In het kort werden wild-type en mutant-target primers, elk 500 nM, toegevoegd aan een 10-ml PCR-reactie die 1X KAPA SYBR® FAST ABI Prism® qPCR Master Mix (KAPABIOSYSTEMS, Cat No. KK4603) en 4 ng genomische DNA. Real-time PCR-omstandigheden waren 2 min bij 50°C, 20 seconden bij 95°C, gevolgd door 40 cycli van 15 seconden denaturatie bij 95°C en 30 seconden annealing/extensie bij 62°C. Gegevens van kruispunt en concentratie fluorescentiesignaalintensiteit van PCR-producten werden geregistreerd en geanalyseerd door ABI StepOnePlusTM Real-Time PCR-systeem (Applied Biosystems) en StepOne-software v2.1 (Applied Biosystems). De drempelcyclus (CT-waarde) binnen de lineaire exponentiële fase werd gebruikt om de standaardcurve te construeren en om het originele aantal kopieën van de DNA-template te meten. Het percentage van het mutante mtDNA werd berekend met de onderstaande formule: Heteroplasmie %= 1/(1+ 1/2△CT).

Statistische analyse. SPSS 17.0 (SPSS, Chicago, IL, VS) werd gebruikt voor statistische analyse. Resultaten werden gegeven als mediaan en bereik, of gemiddelde ± 1 SD, indien van toepassing. Student's t-test werd gebruikt om ongepaarde groepen te vergelijken. Fisher's exact-test werd gebruikt om associaties tussen twee categorische variabelen te bepalen. Het Cox-regressiemodel werd gebruikt om mogelijke prognostische factoren te analyseren. Intergroepsverschillen bij uitkomst werden vergeleken door Kaplan-Meier-schatting en log-rank-test. De correlatie van Pearson werd gebruikt om heteroplasmie te correleren met de leeftijd van diagnose. Een p-waarde < 0,05 werd als statistisch significant beschouwd.

Studietype

Observationeel

Inschrijving (Verwacht)

Contacten en locaties

In dit gedeelte vindt u de contactgegevens van degenen die het onderzoek uitvoeren en informatie over waar dit onderzoek wordt uitgevoerd.

Studie Locaties

Taiwan
- - Taipei, Taiwan, 100
    - Werving
    - National Taiwan University Hospital
    - Contact:
      
      Han-Chung Hsiue, MD
      
      Telefoonnummer: 66064 886-23123456
      
      E-mail: hanchunghsiue@gmail.com
    - Hoofdonderzoeker:
      
      Pei-Lin Lee, MD, PhD
    - Onderonderzoeker:
      
      Ni-Chung Lee, MD, PhD

Deelname Criteria

Onderzoekers zoeken naar mensen die aan een bepaalde beschrijving voldoen, de zogenaamde geschiktheidscriteria. Enkele voorbeelden van deze criteria zijn iemands algemene gezondheidstoestand of eerdere behandelingen.

Geschiktheidscriteria

Leeftijden die in aanmerking komen voor studie

VOLWASSEN
OUDER_ADULT
KIND

Accepteert gezonde vrijwilligers

Nee

Geslachten die in aanmerking komen voor studie

Allemaal

Bemonsteringsmethode

Niet-waarschijnlijkheidssteekproef

Studie Bevolking

Patiënten met mitochondriaal DNA nt3243 A>G-mutatie gedetecteerd in het National Taiwan University Hospital.

Beschrijving

Inclusiecriteria:

-Patiënten met mitochondriaal DNA nt3243 A>G-mutatie

Uitsluitingscriteria:

-Patiënten zonder bevestigd mitochondriaal DNA nt3243 A>G-mutatie

Studie plan

Dit gedeelte bevat details van het studieplan, inclusief hoe de studie is opgezet en wat de studie meet.

Hoe is de studie opgezet?

Ontwerpdetails

Wat meet het onderzoek?

Primaire uitkomstmaten

Uitkomstmaat	Maatregel Beschrijving	Tijdsspanne
Prognostische factoren voor een slecht resultaat Tijdsspanne: Binnen de follow-up periode, die wordt geschat op gemiddeld 5 jaar.	Een slechte uitkomst omvat overlijden en ontwikkeling van slechte prestaties (een gewijzigde Rankin-schaal 4 of hoger). Univariate en multivariate analyses zullen worden gebruikt om te bestuderen of specifieke klinische presentaties (bijvoorbeeld de aanwezigheid van een beroerte, epileptische aanvallen, diabetes, enz.) en de mate van heteroplasmie geassocieerd zijn met een slechte uitkomst.	Binnen de follow-up periode, die wordt geschat op gemiddeld 5 jaar.

Medewerkers en onderzoekers

Hier vindt u mensen en organisaties die betrokken zijn bij dit onderzoek.

Sponsor

National Taiwan University Hospital

Medewerkers

National Cheng-Kung University Hospital

Onderzoekers

Hoofdonderzoeker: Pei-Lin Lee, MD, PhD, National Taiwan University Hospital

Studie record data

Deze datums volgen de voortgang van het onderzoeksdossier en de samenvatting van de ingediende resultaten bij ClinicalTrials.gov. Studieverslagen en gerapporteerde resultaten worden beoordeeld door de National Library of Medicine (NLM) om er zeker van te zijn dat ze voldoen aan specifieke kwaliteitscontrolenormen voordat ze op de openbare website worden geplaatst.

Bestudeer belangrijke data

Studie start

1 januari 2014

Primaire voltooiing (VERWACHT)

1 januari 2015

Studie voltooiing (VERWACHT)

1 januari 2015

Studieregistratiedata

Eerst ingediend

9 februari 2014

Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria

13 april 2014

Eerst geplaatst (SCHATTING)

15 april 2014

Updates van studierecords

Laatste update geplaatst (SCHATTING)