Ontwikkeling van een biomarker voor het monitoren van klinische resultaten bij kinderen met spinale lipoom.

Klinische studie om te zoeken naar een metabole biomarker(s), detecteerbaar door massaspectrometrie, die kunnen worden gebruikt om patiënten met asymptomatisch lipoom te 'stratificeren'. Gezien de vaak uitgebreide aard van lipomen geassocieerd met het lage ruggenmerg, veronderstellen we dat lipidecomponenten, of metabolieten die daarvan zijn afgeleid, toegang kunnen krijgen tot de bloedbaan van het kind. De meer infiltratieve lipomen hebben een hoger risico op symptomatische verslechtering en zouden volgens ons ook een grotere kans moeten hebben op het genereren van een lipide-'handtekening' in het bloed en/of de urine. Fase 1 - Monsters van cerebrospinaal vocht, bloed en urine zullen worden verkregen van patiënten met spinale lipoom die een operatie ondergaan (n = 3 tot 5). Geïnformeerde toestemming, na goedkeuring van de juiste ethische commissie, zal worden geïmplementeerd. Preoperatief worden bloed en urine afgenomen en tijdens de operatie worden hersenvocht afgenomen. Massaspectrometrie-analyse zal de lipidensoorten identificeren die aanwezig zijn in de cerebrospinale vloeistof van deze patiënten, en de mate waarin deze ook detecteerbaar zijn in het bloed en/of de urine van de patiënt. Elke lipidesoort die wordt gedetecteerd in zowel cerebrospinale vloeistof als bloed/urine, vertegenwoordigt potentiële biomarkers en vormt de focus van de volgende fase van het onderzoek. Fase 2 zal vervolgens de discriminerende waarde van deze potentiële biomarkers beoordelen door hun profielen in bloed en/of urine van drie klinische groepen te vergelijken: (i) Patiënten met spinale lipomen die neurologische symptomen/symptomen hebben en die naar het ziekenhuis gaan voor een operatie (d.w.z. vergelijkbare patiënten als in fase 1). Preoperatief worden bloed/urine afgenomen om de 'hoog risico' groep te vertegenwoordigen. (ii) Patiënten met spinale lipomen die na verscheidene jaren follow-up asymptomatisch zijn gebleven.

Deze vertegenwoordigen de groep 'laag risico'; (iii) Patiënten met spinale aandoeningen waarbij geen lipoom betrokken is. Deze vertegenwoordigen onze 'negatieve' controlegroep. Groepsgroottes zullen worden bepaald door powerberekeningen met behulp van variantiegegevens van de patiëntmetingen in fase 1. Statistische analyse zal plaatsvinden door middel van 1-weg ANOVA, of niet-parametrisch equivalent, om te testen op significante verschillen tussen de drie groepen. Massaspectrometrie (Figuur 2) zal worden uitgevoerd in het Institute of Child Health Center for Proteomics, Metabolomics and Lipidomics met behulp van nano ultra performance vloeistofchromatografie en ultra performance convergentiechromatografie - quadrupool time of flight massaspectrometrie, een nieuwe massaspectrale technologie voor lipidomics en metabolomics analyse. Ultra performance convergentiechromatografie is een chromatografietechnologie die gebruik maakt van koolstofdioxide dat aanwezig is in een superkritische vloeibare toestand als een mobiele fase en de fractionering van metabolieten en lipiden mogelijk maakt op basis van hun klasse en niet op hydrofobiciteit. Het maakt kwantificering mogelijk van alle belangrijke lipideklassen die in een weefsel aanwezig zijn, waaronder fosfolipiden, vrije vetzuren, veresterde vetzuren, cholesterolesters en sterolen. Niet-lipidemoleculen (bijv. choline) zou ook een veranderde overvloed kunnen vertonen bij lipoompatiënten en daarom zal ook een meer algemene metabolomics-analyse worden uitgevoerd, als de tijd het toelaat.