Разработка биомаркера для мониторинга клинических исходов у детей с липомой позвоночника.

Клиническое исследование для поиска метаболических биомаркеров, обнаруживаемых с помощью масс-спектрометрии, которые можно использовать для «стратификации» пациентов с бессимптомной липомой. Ввиду часто обширного характера липом, связанных с низким расположением спинного мозга, мы предполагаем, что липидные компоненты или полученные из них метаболиты могут попасть в кровоток ребенка. Более инфильтративные липомы несут более высокий риск симптоматического ухудшения и, как мы утверждаем, также должны иметь более высокую вероятность образования липидной «сигнатуры» в крови и/или моче. Фаза 1. Образцы спинномозговой жидкости, крови и мочи будут получены у пациентов с липомой позвоночника, перенесших операцию (n = 3–5). Информированное согласие будет реализовано после соответствующего одобрения комитета по этике. Перед операцией будут взяты образцы крови и мочи, а также будут получены интраоперационные образцы спинномозговой жидкости. Масс-спектрометрический анализ позволит определить виды липидов, присутствующих в спинномозговой жидкости этих пациентов, и степень их обнаружения в крови и/или моче пациента. Любые виды липидов, обнаруженные как в спинномозговой жидкости, так и в крови/моче, будут представлять собой потенциальные биомаркеры и будут находиться в центре внимания следующего этапа исследования. Затем на этапе 2 будет оцениваться дискриминационная ценность этих потенциальных биомаркеров путем сравнения их профилей в крови и/или моче в трех клинических группах: (i) пациенты с липомами позвоночника, которые имеют неврологические симптомы/признаки и обращаются в больницу для хирургического вмешательства (т. те же пациенты, что и в фазе 1). Образцы крови/мочи будут взяты до операции, чтобы представить группу «высокого риска». (ii) Пациенты с липомами позвоночника, которые оставались бессимптомными после нескольких лет наблюдения.

Они представляют группу «низкого риска»; (iii) Пациенты с заболеваниями позвоночника, не связанными с липомой. Они представляют нашу «отрицательную» контрольную группу. Размеры групп будут определяться расчетами мощности с использованием данных дисперсии измерений пациентов на этапе 1. Статистический анализ будет проводиться с помощью однофакторного дисперсионного анализа или непараметрического эквивалента для проверки значительных различий между тремя группами. Масс-спектрометрия (рис. 2) будет проводиться в Центре протеомики, метаболомики и липидомики Института детского здоровья с использованием наноультраэффективной жидкостной хроматографии и ультраэффективной конвергентной хроматографии - квадрупольной времяпролетной масс-спектрометрии, новой масс-спектральной технологии для липидомных и метаболомных исследований. анализ. Сверхэффективная конвергентная хроматография — это технология хроматографии, в которой в качестве подвижной фазы используется диоксид углерода, находящийся в сверхкритическом жидком состоянии, и которая позволяет фракционировать метаболиты и липиды в соответствии с их классом, а не гидрофобностью. Он позволяет проводить количественный анализ всех основных классов липидов, присутствующих в ткани, включая фосфолипиды, свободные жирные кислоты, этерифицированные жирные кислоты, сложные эфиры холестерина и стеролы. Нелипидные молекулы (например, холин) также может демонстрировать измененное содержание у пациентов с липомой, поэтому, если позволит время, будет проведен более общий метаболический анализ.