Desarrollo de un biomarcador para monitorear los resultados clínicos en niños con lipoma espinal.

Estudio clínico para buscar uno o más biomarcadores metabólicos, detectables por espectrometría de masas, que puedan usarse para 'estratificar' a los pacientes con lipoma asintomático. En vista de la naturaleza a menudo extensa de los lipomas asociados con la médula espinal baja, planteamos la hipótesis de que los componentes lipídicos, o los metabolitos derivados de ellos, pueden ingresar al torrente sanguíneo del niño. Los lipomas más infiltrativos conllevan un mayor riesgo de deterioro sintomático y, argumentamos, también deberían tener una mayor probabilidad de generar una "firma" de lípidos en la sangre y/u orina. Fase 1: se obtendrán muestras de líquido cefalorraquídeo, sangre y orina de pacientes con lipoma espinal sometidos a cirugía (n = 3 a 5). Se implementará el consentimiento informado, luego de la aprobación apropiada del comité de ética. Se tomarán muestras de sangre y orina antes de la operación y se obtendrán muestras de líquido cefalorraquídeo intraoperatorio. El análisis de espectrometría de masas identificará las especies de lípidos presentes en el líquido cefalorraquídeo de estos pacientes y la medida en que también son detectables en la sangre y/o la orina del paciente. Cualquier especie de lípido detectada tanto en el líquido cefalorraquídeo como en la sangre/la orina representará biomarcadores potenciales y formará el foco de la siguiente fase del estudio. Luego, la Fase 2 evaluará el valor discriminatorio de estos posibles biomarcadores comparando sus perfiles en sangre y/u orina de tres grupos clínicos: (i) Pacientes con lipomas espinales que tienen síntomas/signos neurológicos y que asisten al hospital para cirugía (es decir, pacientes similares a los de la Fase 1). Se tomarán muestras de sangre/orina antes de la operación, para representar el grupo de "alto riesgo". (ii) Pacientes con lipomas espinales que han permanecido asintomáticos después de varios años de seguimiento.

Estos representan el grupo de 'bajo riesgo'; (iii) Pacientes con condiciones espinales que no involucren lipoma. Estos representan nuestro grupo de control 'negativo'. Los tamaños de los grupos se determinarán mediante cálculos de potencia utilizando los datos de varianza de las mediciones de los pacientes en la Fase 1. El análisis estadístico se realizará mediante ANOVA de 1 vía, o equivalente no paramétrico, para probar las diferencias significativas entre los tres grupos. La espectrometría de masas (Figura 2) se realizará en el Centro de Proteómica, Metabolómica y Lipidómica del Instituto de Salud Infantil utilizando cromatografía líquida nano de ultra rendimiento y cromatografía de convergencia de ultra rendimiento: espectrometría de masas de tiempo de vuelo de cuadrupolo, una nueva tecnología de espectro de masas para lipidómica y metabolómica. análisis. La cromatografía de convergencia de ultra rendimiento es una tecnología de cromatografía que utiliza dióxido de carbono presente en un estado fluido supercrítico como fase móvil y permite el fraccionamiento de metabolitos y lípidos según su clase y no hidrofobicidad. Permite la cuantificación de todas las principales clases de lípidos presentes en un tejido, incluidos fosfolípidos, ácidos grasos libres, ácidos grasos esterificados, ésteres de colesterol y esteroles. Moléculas no lipídicas (p. colina) también podría mostrar una abundancia alterada en pacientes con lipoma, por lo que también se llevará a cabo un análisis metabolómico más general, si el tiempo lo permite.