Sviluppo di un biomarcatore per il monitoraggio degli esiti clinici nei bambini con lipoma spinale.

Studio clinico per ricercare uno o più biomarcatori metabolici, rilevabili mediante spettrometria di massa, che possano essere utilizzati per "stratificare" i pazienti con lipoma asintomatico. In considerazione della natura spesso estesa dei lipomi associati al basso midollo spinale, ipotizziamo che i componenti lipidici, oi metaboliti da essi derivati, possano entrare nel flusso sanguigno del bambino. I lipomi più infiltrativi comportano un rischio maggiore di deterioramento sintomatico e, sosteniamo, dovrebbero anche avere una maggiore possibilità di generare una "firma" lipidica nel sangue e/o nelle urine. Fase 1 - Saranno prelevati campioni di liquido cerebrospinale, sangue e urina da pazienti con lipoma spinale sottoposti a intervento chirurgico (n = da 3 a 5). Il consenso informato, dopo l'appropriata approvazione del comitato etico, sarà implementato. Il sangue e l'urina saranno prelevati prima dell'intervento e saranno prelevati campioni di liquido cerebrospinale intraoperatorio. L'analisi della spettrometria di massa identificherà le specie lipidiche presenti nel liquido cerebrospinale di questi pazienti e la misura in cui queste sono rilevabili anche nel sangue e/o nelle urine del paziente. Qualsiasi specie lipidica rilevata sia nel liquido cerebrospinale che nel sangue/urina rappresenterà potenziali biomarcatori e costituirà il fulcro della fase successiva dello studio. La fase 2 valuterà quindi il valore discriminatorio di questi potenziali biomarcatori confrontando i loro profili nel sangue e/o nelle urine di tre gruppi clinici: (i) Pazienti con lipomi spinali che presentano sintomi/segni neurologici e si stanno ricoverando in ospedale per un intervento chirurgico (ad es. pazienti simili a quelli della Fase 1). Verranno prelevati campioni di sangue/urina prima dell'intervento, per rappresentare il gruppo "ad alto rischio". (ii) Pazienti con lipomi spinali che sono rimasti asintomatici dopo diversi anni di follow-up.

Questi rappresentano il gruppo "a basso rischio"; (iii) Pazienti con condizioni spinali che non comportano lipoma. Questi rappresentano il nostro gruppo di controllo "negativo". Le dimensioni del gruppo saranno determinate dai calcoli di potenza utilizzando i dati di varianza dalle misurazioni del paziente nella Fase 1. L'analisi statistica sarà mediante ANOVA a 1 via, o equivalente non parametrico, per verificare differenze significative tra i tre gruppi. La spettrometria di massa (Figura 2) sarà eseguita presso l'Institute of Child Health Center for Proteomics, Metabolomics and Lipidomics utilizzando la cromatografia liquida nano ultra performante e la cromatografia di convergenza ultra performante - spettrometria di massa quadrupolare a tempo di volo, una nuova tecnologia spettrale di massa per lipidomica e metabolomica analisi. La cromatografia a convergenza ultra performante è una tecnologia cromatografica che utilizza l'anidride carbonica presente in uno stato fluido supercritico come fase mobile e consente il frazionamento di metaboliti e lipidi in base alla loro classe e non all'idrofobicità. Consente la quantificazione di tutte le principali classi lipidiche presenti in un tessuto, inclusi fosfolipidi, acidi grassi liberi, acidi grassi esterificati, esteri del colesterolo e steroli. Molecole non lipidiche (es. colina) potrebbe anche mostrare un'abbondanza alterata nei pazienti con lipoma e quindi verrà intrapresa anche un'analisi metabolomica più generale, se il tempo lo consente.