Udvikling af en biomarkør til overvågning af kliniske resultater hos børn med spinal lipom.

Klinisk undersøgelse for at søge en eller flere metaboliske biomarkører, som kan påvises ved massespektrometri, som kan bruges til at 'stratificere' patienter med asymptomatisk lipom. I lyset af den ofte omfattende karakter af lipomer forbundet med den lave rygmarv, antager vi, at lipidkomponenter, eller metabolitter afledt af dem, kan få adgang til barnets blodbane. De mere infiltrative lipomer har en højere risiko for symptomatisk forværring, og vi hævder, bør også have en større chance for at generere en lipid-'signatur' i blodet og/eller urinen. Fase 1 - Cerebrospinalvæske, blod og urinprøver vil blive udtaget fra patienter med spinal lipom, der skal opereres (n = 3 til 5). Informeret samtykke, efter passende godkendelse af etisk udvalg, vil blive implementeret. Blod og urin udtages præoperativt, og intraoperativ cerebrospinalvæskeprøver vil blive udtaget. Massespektrometrianalyse vil identificere lipidarter, der er til stede i cerebrospinalvæsken hos disse patienter, og i hvilket omfang disse også kan påvises i patientens blod og/eller urin. Enhver lipidart påvist i både cerebrospinalvæske og blod/urin vil repræsentere potentielle biomarkører og vil danne fokus for den næste fase af undersøgelsen. Fase 2 vil derefter vurdere den diskriminerende værdi af disse potentielle biomarkører ved at sammenligne deres profiler i blod og/eller urin fra tre kliniske grupper: (i) Patienter med spinale lipomer, som har neurologiske symptomer/tegn, og som er på hospitalet til operation (dvs. lignende patienter som i fase 1). Blod/urinprøver vil blive taget præoperativt for at repræsentere 'højrisiko'-gruppen. (ii) Patienter med spinale lipomer, som er forblevet asymptomatiske efter flere års opfølgning.

Disse repræsenterer 'lavrisiko'-gruppen; (iii) Patienter med spinale tilstande, der ikke involverer lipom. Disse repræsenterer vores 'negative' kontrolgruppe. Gruppestørrelser vil blive bestemt ved effektberegninger ved hjælp af variansdata fra patientmålingerne i fase 1. Statistisk analyse vil være ved 1-vejs ANOVA, eller ikke-parametrisk ækvivalent, for at teste for signifikante forskelle mellem de tre grupper. Massespektrometri (figur 2) vil blive udført i Institute of Child Health Center for Proteomics, Metabolomics and Lipidomics ved hjælp af nano ultra performance væskekromatografi og ultra performance konvergenskromatografi - quadrupol time of flight massespektrometri, en ny massespektral teknologi til lipidomisk og metabolomisk analyse. Ultra-performance konvergenskromatografi er en kromatografiteknologi, der bruger kuldioxid til stede i en superkritisk væsketilstand som en mobil fase og tillader fraktionering af metabolitter og lipider i henhold til deres klasse og ikke hydrofobicitet. Det muliggør kvantificering af alle de vigtigste lipidklasser, der er til stede i et væv, herunder phospholipider, frie fedtsyrer, esterificerede fedtsyrer, kolesterolestere og steroler. Ikke-lipidmolekyler (f.eks. cholin) kan også vise ændret forekomst hos lipompatienter, og derfor vil der også blive foretaget en mere generel metabolomisk analyse, hvis tiden tillader det.