Desenvolvendo um Biomarcador para Monitorar Resultados Clínicos em Crianças com Lipoma Espinhal.

Estudo clínico para buscar biomarcadores metabólicos, detectáveis ​​por espectrometria de massa, que possam ser usados ​​para "estratificar" pacientes com lipoma assintomático. Tendo em vista a natureza frequentemente extensa dos lipomas associados à medula espinhal inferior, levantamos a hipótese de que os componentes lipídicos, ou metabólitos derivados deles, podem entrar na corrente sanguínea da criança. Os lipomas mais infiltrativos carregam um risco maior de deterioração sintomática e, argumentamos, também deveriam ter uma chance maior de gerar uma 'assinatura' lipídica no sangue e/ou urina. Fase 1 - Amostras de líquido cefalorraquidiano, sangue e urina serão obtidas de pacientes com lipoma espinhal submetidos à cirurgia (n = 3 a 5). O consentimento informado, após a aprovação apropriada do comitê de ética, será implementado. Sangue e urina serão amostrados no pré-operatório, e amostras intra-operatórias de líquido cefalorraquidiano serão obtidas. A análise por espectrometria de massa identificará as espécies lipídicas presentes no líquido cefalorraquidiano desses pacientes e até que ponto elas também são detectáveis ​​no sangue e/ou urina do paciente. Qualquer espécie lipídica detectada no líquido cefalorraquidiano e no sangue/urina representará biomarcadores em potencial e formará o foco da próxima fase do estudo. A Fase 2 avaliará então o valor discriminatório desses potenciais biomarcadores comparando seus perfis no sangue e/ou urina de três grupos clínicos: (i) Pacientes com lipomas espinhais que apresentam sintomas/sinais neurológicos e estão indo para o hospital para cirurgia (ou seja, pacientes semelhantes aos da Fase 1). Amostras de sangue/urina serão coletadas no pré-operatório, para representar o grupo de 'alto risco'. (ii) Pacientes com lipomas espinhais que permaneceram assintomáticos após vários anos de acompanhamento.

Estes representam o grupo de 'baixo risco'; (iii) Pacientes com problemas de coluna que não envolvam lipoma. Estes representam nosso grupo de controle 'negativo'. Os tamanhos dos grupos serão determinados por cálculos de poder usando dados de variância das medições do paciente na Fase 1. A análise estatística será por ANOVA de 1 via, ou equivalente não paramétrico, para testar diferenças significativas entre os três grupos. A espectrometria de massa (Figura 2) será realizada no Institute of Child Health Center for Proteomics, Metabolomics and Lipidomics usando nano cromatografia líquida de ultra desempenho e cromatografia de convergência de ultra desempenho - espectrometria de massa de tempo de vôo quadrupolo, uma nova tecnologia espectral de massa para lipidômica e metabolômica análise. A cromatografia de convergência de ultra desempenho é uma tecnologia de cromatografia que utiliza o dióxido de carbono presente em um estado de fluido supercrítico como fase móvel e permite o fracionamento de metabólitos e lipídios de acordo com sua classe e não hidrofobicidade. Ele permite a quantificação de todas as principais classes de lipídios presentes em um tecido, incluindo fosfolipídios, ácidos graxos livres, ácidos graxos esterificados, ésteres de colesterol e esteróis. Moléculas não lipídicas (por exemplo, colina) também pode mostrar abundância alterada em pacientes com lipoma e, portanto, uma análise metabolômica mais geral também será realizada, se o tempo permitir.