Combinatiebehandeling van 5% natamycine en 1% voriconazol bij schimmelkeratitis (NATA_VORI)

PROTOCOL VOOR INDIENING EN GOEDKEURING VAN ONDERZOEKSPROJECT

TITEL:

Combinatiebehandeling van 5% natamycine en 1% voriconazol bij schimmelkeratitis: een prospectieve, gerandomiseerde, dubbelblinde klinische studie ONDERZOEKSLOCATIE LV Prasad Eye Institute, GMR Varalakshmi Campus, Visakhapatnam, Andhra Pradesh, India ONDERZOEKERS Dr. Merle Fernandes Consultant, Cornea and Anterior Segment Service LV Prasad Eye Institute, GMR Varalakshmi Campus Visakhapatnam, Andhra Pradesh, India Dr. Antonio Di Zazzo Fellow, Cornea and Anterior Segment Service LV Prasad Eye Institute, GMR Varalakshmi Campus Visakhapatnam, Andhra Pradesh, India

Dr. JV Raghava Consultant, Cornea and Anterior Segment Service LV Prasad Eye Institute, GMR Varalakshmi Campus Visakhapatnam, Andhra Pradesh, India

Dr. Sayali Sane Fellow, Cornea and Anterior Segment Service LV Prasad Eye Institute, GMR Varalakshmi Campus Visakhapatnam, Andhra Pradesh, India

Dr Siddarth Yadav Fellow, Cornea and Anterior Segment Service LV Prasad Eye Institute, GMR Varalakshmi Campus Visakhapatnam, Andhra Pradesh, India

INLEIDING Schimmelkeratitis Microbiële keratitis is wereldwijd een van de belangrijkste oorzaken van monoculaire blindheid, en staat op de tweede plaats na cataract volgens het WHO-bulletin.[1]Schimmelkeratitis. keratitis vertegenwoordigt bijna de helft van alle gevallen van etterige keratitis in sommige delen van de derde wereld[2] en omvat 30-40% van alle gevallen van cultuur-positieve infectieuze keratitis, met name in Zuid-India[3, 4]. Draadschimmels zijn gemeld als veroorzakers van grote hoeveelheden mycotische hoornvlieszweren in tropische klimaten in vergelijking met gematigde klimaten [1].

Ondanks de hoge prevalentie van schimmelkeratitis, is de behandeling van schimmelkeratitis uitdagender dan bacteriële keratitis om verschillende redenen, waaronder maar niet beperkt tot de volgende: weinig commercieel verkrijgbare lokale antischimmelmiddelen, schimmelwerende geneesmiddelen, beperkte oculaire penetratie, niet-substantieel onderzoek en ontwikkeling naar nieuwere agenten. Onderzoeken van langere duur verduidelijken dat verlies van monoculair gezichtsvermogen door schimmelzweren in het hoornvlies een impact had op het psychosociaal functioneren, afgezien van het effect op mobiliteit en activiteitsbeperking, vooral bij degenen met ernstig gezichtsverlies in het betrokken oog.[5, 6] Bovendien is het algemeen bekend dat een slecht gezichtsvermogen in verband wordt gebracht met depressie. [7] Huidige behandeling van schimmelkeratitis Er zijn maar weinig gepubliceerde gerandomiseerde gecontroleerde onderzoeken die alternatieve antischimmeltherapie vergelijken voor mycotische keratitis [8, 9], en er zijn geen nieuwe oculaire antischimmelmedicijnen goedgekeurd door de Food and Drug Administration sinds amfotericine B en natamycine werden goedgekeurd in de 1960 [10].

Momenteel zijn schimmelinfecties van het hoornvlies moeilijk uit te roeien, omdat schimmels vaak weerstand bieden aan behandeling. Behandeling van schimmelkeratitis vereist een tijdige diagnose van de infectie en toediening van geschikte antischimmeltherapie. Antischimmelmiddelen zijn nog steeds de belangrijkste therapeutische opties bij schimmelkeratitis, waarbij het succes afhangt van het vermogen van het middel om in het water te dringen en therapeutische niveaus te bereiken [11].

Natamycin Natamycin, het enige door de FDA goedgekeurde middel voor de behandeling van schimmelkeratitis, is een fungicide tetraeen-polyeen-antibioticum, afgeleid van Streptomyces natalensis dat in vitro activiteit bezit tegen een verscheidenheid aan gisten en draadschimmels, waaronder Candida, Aspergillus, Cephalosporium, Fusarium en Penicillium-soorten[12]. Daarom is Natamycine het voorkeursgeneesmiddel voor keratitis door filamenteuze schimmels. Topische natamycine dringt slecht door in een intact epitheel en vereist vaak handmatig debridement van het hoornvliesepitheel voor een grotere werkzaamheid. Het heeft een antimicrobiële werking die even effectief is als Econazole[8], effectiever dan Itraconazole[13] en sneller werkt dan Terbinafine[14]. Topisch natamycine is superieur aan topisch voriconazol voor de behandeling van filamenteuze schimmelzweren van het hoornvlies, en in het bijzonder die kweekpositief voor Fusarium-soorten [15, 16].

Voriconazol Nieuwere triazolen (voriconazol, posaconazol en ravuconazol) zijn voorgesteld als betere alternatieven voor de behandeling van schimmelkeratitis die niet reageert op conventionele antischimmelmiddelen. Ze zijn fungistatisch en remmen de biosynthese van ergosterol, een essentieel onderdeel van de celwand van schimmels[17]. Voriconazol is actief tegen zowel filamenteuze schimmels als Candida-soorten en is recentelijk de voorkeursbehandeling geworden voor systemische ziekten zoals pulmonale aspergillose [18]. Talrijke casusrapporten in de oogheelkundige literatuur hebben het gebruik van Voriconazol bij schimmelkeratitis beschreven [17, 19-24]. De superioriteit van deze middelen in vergelijking met natamycine is niet vastgesteld Topisch voriconazol heeft een goede penetratie in het oog (0,61-3,30 mg/L in het kamerwater na 1 uur topische toediening)[25]. Recente gerandomiseerde controles hebben geen grotere werkzaamheid gemeld van 1% voriconazol (gereconstitueerd uit injectieflacon) in vergelijking met 5% natamycine oogdruppels (geïmporteerd uit de VS) bij schimmelkeratitis [16, 26].

Hoewel Natamycin een goed medicijn is om schimmelkeratitis te behandelen, zijn door verschillende auteurs mislukte behandelingen gemeld [27]. Natamycine is gerapporteerd als de meest effectieve medicatie tegen draadschimmels, maar grote ulcera, hypopyon en Aspergillus als veroorzakend organisme zijn gerapporteerd als voorspellers van een slecht resultaat met topische 5% natamycine monotherapie [28]. De zoektocht naar een beter antischimmelmedicijn met een breed spectrum voor de behandeling van schimmelkeratitis gaat door. Er zijn onderzoeken geweest waarbij een combinatie van antischimmelmiddelen werd gebruikt om een ​​multidrug-therapie te ontwikkelen [29, 30]. Van amphoptericine B en flucytosine is beschreven dat ze synergetische effecten hebben.15 terwijl Natamycin en Etoconazol ook effectief zijn gebruikt in een diermodel van Aspergillus keratitis [18]. Een gerandomiseerde klinische studie die de werkzaamheid testte van 2% econazol als topisch preparaat toegevoegd aan 5% natamycine voor de behandeling van schimmelkeratitis in Zuid-India[2, 8] liet geen enkel voordeel zien in vergelijking met monotherapie met natamycine [2]. Een combinatie van een polyeen (amfotericine B) en een triazool (voriconazol) zijn synergetisch bij lage mediane concentraties wanneer ze in vitro worden getest tegen Aspergillus-soorten, wat een concentratie-afhankelijke interactie tussen het 2-geneesmiddel suggereert.

De werkzaamheid van een gelijktijdige behandeling met natamycine en voriconazol is niet systematisch onderzocht, evenals het mogelijke synergetische effect dat deze combinatie zou kunnen hebben op de behandeling van schimmelinfectie van het hoornvlies.

DOEL Het evalueren van de werkzaamheid en veiligheid van de gelijktijdige behandeling van 5% natamycine en 1% voriconazol bij patiënten met fungale keratitis METHODEN EN MATERIALEN ONDERZOEKSPOPULATIE Patiënten met uitstrijkje en/of kweek bewezen fungale keratitis die zich bij onze instituten aandienden, kwamen in aanmerking voor inschrijving.

ONDERZOEKSOPZET Prospectief dubbel gemaskeerd gerandomiseerd klinisch onderzoek. Het vak wordt ingeschreven in 2 groepen van elk 20 vakken. De eerste groep zal starten met een gelijktijdige topische behandeling van 5% natamycine en 1% voriconazol per uur, de tweede groep zal beginnen met een gelijktijdige topische behandeling van 5% natamycine en placebo (voriconazolvehikel) één uur. Alle patiënten zullen ook worden gestart met lokale cycloplegica, oraal ketoconazol en orale niet-steroïde anti-inflammatoire middelen en antiglaucoommedicatie indien nodig.

Opnamecriteria Proefpersonen > 18 jaar Bereid om de juiste geïnformeerde toestemming te geven Aanwezigheid van hoornvlieszweer van > 2 mm in verticale en horizontale dimensies bij presentatie (epitheeldefect en tekenen van stromale ontsteking) Microbiologisch bewijs van schimmel op uitstrijkje en/of kweekmedia Bereid om terug te keren voor alle vervolgbezoeken Uitsluitingscriteria Patiënten die geen toestemming willen geven Patiënten die niet kunnen meewerken aan de procedure Patiënt met dreigende of daadwerkelijke perforatie of bilaterale corneale ulcera of sclerale betrokkenheid Voorgeschiedenis van eerdere oogchirurgie Bewijs van bacteriële, parasitaire of virale infectie of co -infectie Eerder hoornvlieslitteken Bekende allergie voor de onderzoeksmedicatie (geneesmiddel of conserveringsmiddel) Zwangere of zogende vrouwen Immuungecompromitteerde patiënten

EINDPUNTEN

Definities

Zweren genezen, keratitis oplossen of keratitis verergeren:

Een zweer wordt als genezen beschouwd als de zweer geneest met de vorming van een hoornvlieslitteken De laesie wordt geclassificeerd als genezende keratitis als het hoornvliesinfiltraat met ten minste 1 mm kleiner wordt en/of de endotheliale plaque of satellietlaesies, het verschijnen van littekens, vergezeld van door vermindering van de symptomen Een zweer wordt geacht geen respons te vertonen of verergert wanneer het een gebrek aan verbetering of verslechtering van de scores voor ontstekingssymptomen of stroma-infiltraatafmetingen of hoornvliessmelting en verslechtering van enige klinische onderzoeksfactor vertoont.

Primair eindpunt:

Volledig succes: volledige oplossing van het infiltraat met vorming van een litteken alleen bij medische behandeling Gedeeltelijk succes: volledige oplossing van het infiltraat bij medische behandeling en gebruik van cyanoacrylaatlijm en verbandcontactlens Mislukking: verslechtering van de zweer die therapeutische penetrerende keratoplastiek van het verwijderen van de ingewanden noodzakelijk maakt

Secundair eindpunt:

Best gecorrigeerde gezichtsscherpte (logaritme van de minimale resolutiehoek (logMAR)).

Bewijs van toxische reactie op het oogoppervlak beoordeeld door folliculaire reactie in de onderste forniceale conjunctiva, oppervlakkige keratopathie punctata, congestie in de onderste bulbaire conjunctiva

TOESTEMMING Alle proefpersonen zullen geïnformeerde toestemming geven alvorens deel te nemen. Het onderzoeksprotocol zal voldoen aan de principes van de Verklaring van Helsinki.

PROCEDURE Patiënten worden geselecteerd op de polikliniek en gescreend voor deelname aan het onderzoek. 20 proefpersonen zullen worden gerandomiseerd naar Natamycin+Voriconazol en 20 naar Natamycin +Vehicle met behulp van een computerondersteunde random number generator (bijlage 1).

Alle proefpersonen ondergaan een gedetailleerde geschiedenis, refractie, zonder hulp en best gecorrigeerde LogMAR-opname van de gezichtsscherpte, applanatie-tonometrie in het onaangetaste oog, biomicroscopische spleetlampevaluatie en meting van het epitheeldefect en de zweer over de maximale lengte en loodrecht hierop langs de maximale breedte, percentage verdunning, diepte van het infiltraat, aanwezigheid van satellietlaesies, endotheliaal exsudaten, hoogte van hypopyon en indirecte oftalmoscopie of ultrasone biomicroscopie voor fundusevaluatie, waar nodig.

De details met betrekking tot de symptomen die verband houden met de hoornvlieszweer, het begin, de duur en de progressie ervan, en de geschiedenis van predisponerende factoren zoals trauma, gebruik van steroïden, gebruik van verbandlenzen, reeds bestaande oculaire oppervlakteaandoening en diabetes zullen ook worden onthuld.

Alle patiënten met microbiële keratitis zullen een gedetailleerde microbiologische evaluatie ondergaan met een hoornvliesschraapsel met behulp van een #15 mes voor Gram-kleuring en 10% kaliumhydroxide-calcofluorwit natte montage en vervolgens geplateerd voor culturen (bloedagar, chocolade-agar, Saboraud's dextrose-agar, aardappeldextrose agar. niet-nutriëntenagar, thioglycollaatbouillon, hersenhartinfusiebouillon.

RANDOMISATIE, TOEWIJZING VERHORGEN EN TOEDIENING VAN MEDICIJN Zodra de patiënt is gerandomiseerd naar een van de 2 groepen met behulp van door de computer gegenereerde randomisatieblokken, zal de ziekenhuisapotheker de juiste medicijnen verstrekken. De behandelend oogarts, microbioloog en patiënten worden gemaskeerd voor het medicijn door soortgelijke flesjes te gebruiken. De ene groep krijgt elk uur 1% voriconazol oogdruppel (Aurolab, Madurai, India) + 5% Natamycin oogdruppels en de andere groep krijgt elk uur oogdruppels + 5% Natamycine oogdruppels (USP 5% Natamet, M.J. Pharmaceuticals, Mumbai , Indië).

De proefpersonen worden minimaal 2 weken in het ziekenhuis opgenomen met medicijnen die worden gegeven door de wijkverpleegkundige.

Patiënten zullen na ontslag elke week worden gevolgd totdat volledige verbetering is opgemerkt.

SPLEETLAMPFOTOGRAFIE Spleetlampfoto's zullen bij presentatie en wekelijks worden genomen tot volledige resolutie.

MICROBIOLOGISCH ONDERZOEK Hoornvliesschraapsels worden verzameld met mes nr. 15, onder plaatselijke verdoving bij de spleetlamp volgens ons eerder beschreven protocol van het Instituut. (Referentie). De objectglaasjes worden gekleurd met Gram-kleuring en 10% kaliumhydroxide met 0,1% calcofluorwit natte montage voor directe microscopie. Hoornvliesschraapsels zullen worden geïnoculeerd in de volgende kweekmedia: BA, CA, PDA, SDA, BHI, thioglyocollate, NNA. Alle media worden 2 weken bewaard in geval van geen groei voordat het monster als steriel wordt verklaard.

Hoe vaak en hoe worden ze geselecteerd?

Patiënten worden geselecteerd uit de polikliniek en gescreend voor deelname aan het onderzoek. Er wordt een steekproefgrootte van 40 proefpersonen geselecteerd met 20 proefpersonen in elke leeftijdsgroep

Hoe vaak en hoeveel zullen er worden bestudeerd? Er wordt een steekproefgrootte van 40 proefpersonen geselecteerd met 20 proefpersonen in elke leeftijdsgroep, totdat het infiltraat volledig is opgelost. De vervolgbezoeken zullen gebaseerd zijn op de klinische toestand.

Welke consulent(en) zullen verantwoordelijk zijn voor de patiënten? Alle hoornvliesconsulenten van de LVPEI GMR Varalakshmi-campus zullen verantwoordelijk zijn voor de onderwerpen.

Normale vrijwilligers - Waar worden ze geworven? Hoeveel? Niet toepasbaar

Zullen de proefpersonen op het moment van hun deelname aan het onderzoek betrokken zijn bij ander experimenteel werk? Geef details.

NEE

Maak een lijst van de exacte procedures en hoe vaak de proefpersonen aan dergelijke procedures zullen worden onderworpen, d.w.z. verzameling van urine en feces, venapunctie, intubatie, speciaal dieet, medicijnen toegediend met een dosis exclusief radio-isotopen of bestraling.

Volledig oogonderzoek Microbiologische beoordeling (indien nodig, bij screeningbezoek) Spleetlamp Fotografie Medicijntoediening (5% Natamycine oftalmische suspensie oogdruppels, 1% Voriconazol oogdruppels, elk uur, dagelijks) Vermeld alle mogelijke of bekende gevaren van de hierboven vermelde procedures. Hoe denkt de onderzoeker deze te ondervangen? NVT

Geef details over procedures waarbij radio-isotopen of bestraling betrokken zijn. NVT

Wat is de persoonlijke ervaring van de onderzoeker met de voorgestelde techniek? Goed Nvt Hoe wordt de geïnformeerde toestemming verkregen en door wie? De toestemming zal worden verkregen door de deelnemende onderzoekers en hun begeleiders.

Geef aan of de proefpersonen de gemaakte kosten tijdens deelname aan het onderzoek moeten vergoeden en ook of er al dan niet wordt overwogen om hen een geschenk of een vorm van attentie te geven. Zo ja, vermeld dan het exacte bedrag.

NA

Is het protocol, kopie patiëntgegevens en toestemmingsformulier bij de aanvraag gevoegd.

Ja

Actieplan voor het melden van bijwerkingen aan de ethische commissie en andere deelnemers aan het onderzoek.

Maandelijks vindt er een vergadering van de ethische commissie plaats. Bijwerkingen worden geregistreerd in het meldingsformulier Incident en ook in het CRF (klinisch onderzoeksdossier). De informatie wordt gepresenteerd aan het faculteitslid dat deel uitmaakt van de EC en zal worden gepresenteerd aan de EC tijdens de volgende vergadering.

Uitkomstmaten: Volledige oplossing van infiltraat resulterend in littekenvorming

Alle andere informatie die u aan de ethische commissie wilt verstrekken. Nee

Handtekeningen van de onderzoekers en mede-onderzoekers.

REFERENTIES

1. Srinivasan, M., Schimmelkeratitis. Curr Opin Oftalmol, 2004. 15(4): p. 321-7.
2. Prajna, NV, et al., Gelijktijdig gebruik van 5% natamycine en 2% econazol voor de behandeling van schimmelkeratitis. Hoornvlies, 2004. 23(8): p. 793-6.
3. Bharathi, MJ, et al., Epidemiologische kenmerken en laboratoriumdiagnose van schimmelkeratitis. Een driejarige studie. Indiase J Ophthalmol, 2003. 51(4): p. 315-21.
4. Chowdhary, A. en K. Singh, Spectrum van schimmelkeratitis in Noord-India. Hoornvlies, 2005. 24(1): p. 8-15.
5. Mathews, P.M., et al., De ernst van het verlies van het gezichtsvermogen staat in wisselwerking met woordspecifieke kenmerken om hardop lezen bij DrDeramus te beïnvloeden. Investeer Ophthalmol Vis Sci, 2015. 56(3): p. 1537-45.
6. Finger, R.P., et al., De impact van de ernst van visusverlies op visusspecifiek functioneren in een Duitse ambulante populatie - een observationele studie. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol, 2011. 249(8): p. 1245-53.
7. Qian, Y., et al., Depressie en visueel functioneren bij patiënten met oculaire ontstekingsziekte. Am J Ophthalmol, 2012. 153(2): p. 370-378 e2.
8. Prajna, NV, et al., Een gerandomiseerde klinische studie waarin 2% econazol en 5% natamycine werden vergeleken voor de behandeling van schimmelkeratitis. Br J Ophthalmol, 2003. 87(10): p. 1235-7.
9. Sharma, S., et al., Herbeoordeling van actueel 1% voriconazol en 5% natamycine bij de behandeling van schimmelkeratitis in een gerandomiseerde studie. Br J Ophthalmol, 2015. 99(9): p. 1190-5.
10. Whitcher, J.P., M. Srinivasan en M.P. Upadhyay, hoornvliesblindheid: een mondiaal perspectief. Bull Wereldgezondheidsorgaan, 2001. 79(3): p. 214-21.
11. Manzouri, B., GC Vafidis en R.K. Wyse, farmacotherapie van schimmelinfecties van het oog. Deskundige mening Pharmacother, 2001. 2(11): p. 1849-57.
12. O'Day, DM, Selectie van geschikte antischimmeltherapie. Hoornvlies, 1987. 6(4): p. 238-45.
13. Kalavathy, C.M., et al., Vergelijking van topisch itraconazol 1% met topisch natamycine 5% voor de behandeling van filamenteuze schimmelkeratitis. Hoornvlies, 2005. 24(4): p. 449-52.
14. Liang, Q.F., et al., Effect van plaatselijke toepassing van terbinafine op schimmelkeratitis. Chin Med J (Engels), 2009. 122(16): p. 1884-8.
15. Rose-Nussbaumer, J., et al., Risicofactoren voor slechtziendheid in de Mycotic Ulcer Treatment Trial: een gerandomiseerde studie waarin natamycine wordt vergeleken met voriconazol. Br J Ophthalmol, 2015.
16. Prajna, NV, et al., The mycotic ulcer treatment trial: een gerandomiseerde studie waarin natamycine versus voriconazol wordt vergeleken. JAMA Oftalmol, 2013. 131(4): p. 422-9.
17. Kofla, G. en M. Ruhnke, Voriconazol: beoordeling van een antischimmelmiddel met breed spectrum triazool. Deskundige mening Pharmacother, 2005. 6(7): p. 1215-29.
18. Komadina, TG, et al., Behandeling van Aspergillus fumigatus keratitis bij konijnen met oraal en topisch ketoconazol. Am J Ophthalmol, 1985. 99(4): p. 476-9.
19. Creti, A., et al., Curatieve behandeling met Voriconazol voor Acremonium-keratitis ontwikkeld bij een patiënt met gelijktijdige Staphylococcus aureus-hoornvliesinfectie: een casusrapport. In Vivo, 2006. 20(1): p. 169-71.
20. Ozbek, Z., et al., Voriconazol bij de behandeling van Alternaria-keratitis. Hoornvlies, 2006. 25(2): p. 242-4.
21. Bernal, M.D., et al., Uitbraak van Fusarium-keratitis bij dragers van zachte contactlenzen in San Francisco. Boog Ophthalmol, 2006. 124(7): p. 1051-3.
22. Klont, R.R., et al., Succesvolle behandeling van Fusarium-keratitis met hoornvliestransplantatie en topisch en systemisch voriconazol. Clin Infect Dis, 2005. 40(12): p. e110-2.
23. Dupuis, A., et al., Bereiding en stabiliteit van voriconazol-oogdruppeloplossing. Antimicrobiële middelen Chemother, 2009. 53(2): p. 798-9.
24. Hariprasad, S.M., et al., Voriconazol bij de behandeling van schimmelinfecties in het oog: een overzicht van de huidige literatuur. Br J Ophthalmol, 2008. 92(7): p. 871-8.
25. Thiel, M.A., et al., Voriconazol-concentratie in humaan kamerwater en plasma tijdens topische of gecombineerde topische en systemische toediening voor schimmelkeratitis. Antimicrobiële middelen Chemother, 2007. 51(1): p. 239-44.
26. Prajna, NV, et al., Vergelijking van natamycine en voriconazol voor de behandeling van schimmelkeratitis. Boog Ophthalmol, 2010. 128(6): p. 672-8.
27. FlorCruz, NV en JR Evans, Medische interventies voor schimmelkeratitis. Cochrane Database Syst Rev, 2015. 4: p. CD004241.
28. Lalitha, P., et al., Risicofactoren voor het behandelresultaat bij schimmelkeratitis. Oogheelkunde, 2006. 113(4): p. 526-30.
29. Lee, SJ, JJ Lee, en S.D. Kim, actueel en oraal voriconazol bij de behandeling van schimmelkeratitis. Koreaanse J Ophthalmol, 2009. 23(1): p. 46-8.
30. Bunya, V.Y., et al., Actueel en oraal voriconazol bij de behandeling van schimmelkeratitis. Am J Ophthalmol, 2007. 143(1): p. 151-3.
31. O'Shaughnessy, EM, et al., Schimmeldodende interacties binnen de drievoudige combinatie van amfotericine B, caspofungine en voriconazol tegen Aspergillus-soorten. J Antimicrob Chemother, 2006. 58(6): p. 1168-76.

VERMOGENSBEREKENING:

α = significantieniveau (0,05)

1-β = power van de test(80%) σ = standaarddeviatie (9%, verondersteld) ε= klinisch relevant verschil (5%, verondersteld) Totale steekproefomvang 50 + 10% lost to follow(5)=55 De vereiste steekproefomvang om een ​​vermogen van 80% te bereiken bij een significantieniveau van 5% voor het detecteren van een klinisch relevant verschil (stel dat een verschil van 5% in genezing wordt beschouwd als een klinisch relevant verschil) met de aanname dat de standaarddeviatie 9% is, is 55 voor elke groep (Gr1 Nata + placebo=55, Gr2 Nata + Vori =55).

Statistische test te gebruiken voor het analyseren van de resultaten: verkennende data-analyse (EDA), ANOVA, T-test, lineaire modellen met gemengd effect.