Osteopontine bij patiënten met gemetastaseerde borstkanker

Analyse van polymorfismen in het OPN-regelgevingsgebied:

De PCR-amplificatie van het promotorregulerende gebied van het geëxtraheerde DNA door gebruik te maken van de volgende primers -3 (forward primer 5" -CAA GCT ACT GCA TAC TCG AAA TCA CA-3" ; reverse primer 5" - ACA ACC AAG CCC TCC CAG AAT TTA-3"). PCR werd uitgevoerd met 50 ng DNA als sjabloon onder de volgende omstandigheden: 95 °C gedurende 10 minuten, vervolgens 36 cycli van 94 °C gedurende 30 seconden, een annealingstemperatuur gedurende 60 seconden en 72 °C gedurende 60 seconden, met een uiteindelijke verlenging bij 72°C gedurende 15 min. Na affiniteitsmembraanzuivering met behulp van de QIAquick Gel Extraction-kit (Qiagen, Carlsbad, CA, VS), werden de PCR-producten onderworpen aan cyclussequencing met de respectievelijke voorwaartse en achterwaartse primer met behulp van een geautomatiseerde ABI 310 DNA-sequencer.

Meting van serumniveau van osteopontine:

OPN-niveau werd gemeten met behulp van Enzyme-linked immnosorbent (ELISA) Kit geleverd door IBL (Immuno-Biological laboratories Co. Ltd., Japan). 30 normale vrouwtjes werden uitgevoerd met dezelfde leeftijd met een mediane osteopontineserumspiegel van 15, dus dit niveau werd toegewezen als een afkapwaarde.

Het serumniveau vóór de behandeling en het polymorfisme van oteopontine waren gecorreleerd met verschillende klinisch-pathologische criteria van de patiënten, respons op de behandeling, PFS en OS.