Sfingo-lipotoxiciteit en transdifferentiatie van vetweefsel bij obesitas (SFINGOTRANS) (SFINGOTRANS)

Materialen en methoden Patiënten: 90 volwassenen van beide geslachten worden gerekruteerd, van wie 30 met een normaal gewicht (leeftijd: 18-50 jaar; BMI < 25 kg/m2), 30 zwaarlijvig zonder metabool syndroom (leeftijd: 18-35 jaar; BMI > 35 kg/m2) en 30 zwaarlijvig met metabool syndroom (leeftijd: 18-35 jaar; BMI > 35 kg/m2), volgens de IDF-criteria van 2009. Proefpersonen met een normaal gewicht zullen worden gerekruteerd uit medisch/paramedisch personeel, terwijl zwaarlijvige patiënten uit het ziekenhuis worden opgenomen bij de afdeling Metabole Ziekten, Istituto Auxologico Italiano, Piancavallo (VB), Italië, voor een 3 weken durend multidisciplinair programma voor gewichtsvermindering (BWRP), dat omvat een caloriearm dieet, lichaamsbeweging, psychologische ondersteuning en voedingsvoorlichting.

Proefpersonen met andere pathologieën dan obesitas zullen worden uitgesloten van de studie, inclusief degenen die worden behandeld met anticoagulantia en plaatjesaggregatieremmers, aangezien de evaluatie van intraplatelet-niveaus van sfingolipiden zal worden voorzien.

In basale omstandigheden zullen de belangrijkste antropometrische gegevens worden verzameld (gewicht, lengte, middelomtrek, heupomtrek, BMI), de lichaamssamenstelling zal worden geëvalueerd met een bio-impedantietechniek, de belangrijkste cardiovasculaire parameters zullen worden geregistreerd (bloeddruk en hartslag), een calorimetrisch onderzoek zal worden uitgevoerd, verzameling van lichaamstemperatuur (ochtend en avond), opvragen van de omgevingstemperatuur waaraan men doorgaans overdag wordt blootgesteld en bepaald, met geautomatiseerde klinische biochemische technieken, de volgende biochemische parameters: glucose, totaal cholesterol, triglyceriden, LDL, HDL, niet-veresterde vetzuren, insuline, geglyceerd Hb, catecholamines en C-reactief proteïne.

Bepaling van het lipidomisch profiel in plasma en celextracten Een lipidomics zal uitgevoerd worden in plasma en in cellulaire extracten van erytrocyten, leukocyten en bloedplaatjes. De niveaus van de individuele analyten zullen worden bepaald met een technologisch geavanceerde analytische instrumentatie, bestaande uit een triple quadruple hybride massaspectrometer met lineaire ionenval (QTRAP 5500, AB Sciex), gekoppeld aan een ultrahoge prestatie vloeistofchromatograaf (UHPLC).

Plasma- en cellulaire niveaus van de volgende sfingolipiden zullen worden gemeten: ceramiden en dihydroceramiden van C16 tot C24, inclusief 2 onverzadigde (C18:1 en C24:1), de sfingomyelinen (die van C16 tot C24 en die van C24:1), sfingosine, sfinganine, sfingosine-1-fosfaat en sfinganine-1-fosfaat.

Bepaling van leukocyten-mRNA-niveaus van genregulatoren Uit een aliquot met leukocyten, ad hoc opgeslagen, zal het totale mRNA worden geëxtraheerd en, met RT/PCR-techniek, zullen de leukocyten-mRNA-niveaus van de volgende genen worden bepaald: Cidea, Hoxc9 en Cpt1a.