Sphingo-lipotoksicitet og transdifferentiering af fedtvæv ved fedme (SFINGOTRANS) (SFINGOTRANS)

Materialer og metoder Patienter: 90 voksne af begge køn rekrutteres, heraf 30 normalvægtige (alder: 18-50 år; BMI < 25 kg/m2), 30 overvægtige uden metabolisk syndrom (alder: 18-35 år; BMI > 35 kg/m2) og 30 overvægtige med metabolisk syndrom (alder: 18-35 år; BMI > 35 kg/m2), ifølge 2009 IDF-kriterierne. Personer med normal vægt vil blive rekrutteret fra medicinsk/paramedicinsk personale, mens overvægtige patienter fra indlagt på afdelingen for metaboliske sygdomme, Istituto Auxologico Italiano, Piancavallo (VB), Italien, til et 3-ugers multidisciplinært vægtreduktionsprogram (BWRP), som omfatter kaloriefattig diæt, fysisk træning, psykologisk støtte og ernæringsundervisning.

Forsøgspersoner med andre patologier end fedme vil blive udelukket fra undersøgelsen, herunder dem, der er behandlet med antikoagulerende og trombocythæmmende lægemidler, da evaluering af intrablodpladeniveauer af sphingolipider vil blive forudset.

Under basale forhold vil de vigtigste antropometriske data blive indsamlet (vægt, højde, taljeomkreds, hofteomkreds, BMI), kropssammensætning vil blive evalueret med en bioimpedansteknik, de vigtigste kardiovaskulære parametre vil blive registreret (blodtryk og hjertefrekvens), en kalorimetrisk undersøgelse vil blive udført, opsamling af kropstemperatur (morgen og aften), anmodning om den miljøtemperatur, som man generelt udsættes for i løbet af dagen og fastlagt, med automatiserede kliniske biokemiske teknikker, følgende biokemiske parametre: glucose, total kolesterol, triglycerider, LDL, HDL, ikke-esterificerede fedtsyrer, insulin, glykeret Hb, katekolaminer og C-reaktivt protein.

Bestemmelse af den lipidomiske profil i plasma og celleekstrakter En lipidomic vil blive udført i plasma og i cellulære ekstrakter fra erytrocytter, leukocytter og blodplader. Niveauerne af de enkelte analytter vil blive bestemt med en teknologisk avanceret analytisk instrumentering, bestående af et tredobbelt firdobbelt hybrid massespektrometer med lineær ionfælde (QTRAP 5500, AB Sciex), forbundet med en ultrahøj ydeevne væskekromatograf (UHPLC).

Plasma- og cellulære niveauer af følgende sphingolipider vil blive målt: ceramider og dihydroceramider fra C16 til C24, inklusive 2 umættede (C18:1 og C24:1), sphingomyelinerne (dem fra C16 til C24 og den ene C24:1), sphingosin, sphinganin, sphingosin-1-phosphat og sphinganin-1-phosphat.

Bestemmelse af leukocyt-mRNA-niveauer af genregulatorer Fra en aliquot indeholdende leukocytter, lagret ad hoc, vil det samlede mRNA blive ekstraheret, og med RT/PCR-teknik vil leukocyt-mRNA-niveauerne af følgende gener blive bestemt: Cidea, Hoxc9 og Cpt1a.