Sphingo-lipotoxicité et trans-différenciation du tissu adipeux dans l'obésité (SFINGOTRANS) (SFINGOTRANS)

Matériels et méthodes Patients : 90 adultes des deux sexes seront recrutés, dont 30 de poids normal (âge : 18-50 ans ; IMC < 25 kg/m2), 30 obèses sans syndrome métabolique (âge : 18-35 ans ; IMC > 35 kg/m2) et 30 obèses avec syndrome métabolique (âge : 18-35 ans ; IMC > 35 kg/m2), selon les critères IDF 2009. Les sujets de poids normal seront recrutés parmi le personnel médical/paramédical, tandis que les patients obèses hospitalisés à la Division des maladies métaboliques, Istituto Auxologico Italiano, Piancavallo (VB), Italie, pour un programme multidisciplinaire de réduction de poids (BWRP) de 3 semaines, qui comprend un régime hypocalorique, de l'exercice physique, un soutien psychologique et une éducation nutritionnelle.

Les sujets atteints d'autres pathologies autres que l'obésité seront exclus de l'étude, y compris ceux traités avec des médicaments anticoagulants et antiplaquettaires, puisque l'évaluation des taux intraplaquettaires de sphingolipides sera prévue.

En conditions basales, les principales données anthropométriques seront collectées (poids, taille, tour de taille, tour de hanches, IMC), la composition corporelle sera évaluée avec une technique de bioimpédance, les principaux paramètres cardiovasculaires seront enregistrés (pression artérielle et fréquence cardiaque), un examen calorimétrique sera effectué, recueil de la température corporelle (matin et soir), demande de la température ambiante à laquelle on est généralement exposé au cours de la journée et détermination, avec des techniques automatisées de biochimie clinique, des paramètres biochimiques suivants : glucose, cholestérol total, triglycérides, LDL, HDL, acides gras non estérifiés, insuline, Hb glyquée, catécholamines et protéine C-réactive.

Détermination du profil lipidomique dans le plasma et les extraits cellulaires Une lipidomique sera réalisée dans le plasma et dans les extraits cellulaires d'érythrocytes, de leucocytes et de plaquettes. Les niveaux des analytes individuels seront déterminés avec une instrumentation analytique technologiquement avancée, consistant en un spectromètre de masse hybride triple quadruple avec piège à ions linéaire (QTRAP 5500, AB Sciex), interfacé avec un chromatographe liquide à ultra haute performance (UHPLC).

Les taux plasmatiques et cellulaires des sphingolipides suivants seront mesurés : les céramides et les dihydrocéramides de C16 à C24, dont 2 insaturés (C18 :1 et C24 :1), les sphingomyélines (celles de C16 à C24 et celle de C24 :1), sphingosine, sphinganine, sphingosine-1-phosphate et sphinganine-1-phosphate.

Détermination des niveaux d'ARNm leucocytaire des régulateurs de gènes A partir d'un aliquot contenant des leucocytes, stocké ad hoc, l'ARNm total sera extrait et, avec la technique RT/PCR, les niveaux d'ARNm leucocytaire des gènes suivants seront déterminés : Cidea, Hoxc9 et Cpt1a.