Сфинголипотоксичность и трансдифференцировка жировой ткани при ожирении (SFINGOTRANS) (SFINGOTRANS)

Материалы и методы. Пациенты: будут набраны 90 взрослых обоего пола, из которых 30 с нормальным весом (возраст: 18-50 лет; ИМТ < 25 кг/м2), 30 с ожирением без метаболического синдрома (возраст: 18-35 лет; ИМТ). > 35 кг/м2) и 30 человек с ожирением и метаболическим синдромом (возраст: 18–35 лет; ИМТ > 35 кг/м2), согласно критериям IDF 2009 г. Субъекты с нормальным весом будут набраны из числа медицинского/фельдшерского персонала, а пациенты с ожирением — из числа госпитализированных в отделении метаболических заболеваний Istituto Auxologico Italiano, Пьянкавалло (VB), Италия, для участия в 3-недельной междисциплинарной программе снижения веса (BWRP), которая включает низкокалорийную диету, физические упражнения, психологическую поддержку и обучение правильному питанию.

Субъекты с другими патологиями, кроме ожирения, будут исключены из исследования, в том числе получавшие антикоагулянтные и антитромбоцитарные препараты, поскольку будет предусмотрена оценка внутритромбоцитарного уровня сфинголипидов.

В исходных условиях будут собираться основные антропометрические данные (вес, рост, окружность талии, окружность бедер, ИМТ), оцениваться состав тела методом биоимпеданса, фиксироваться основные сердечно-сосудистые параметры (артериальное давление и частота сердечных сокращений), будет проведено калориметрическое обследование, сбор температуры тела (утром и вечером), запрос температуры окружающей среды, воздействию которой человек обычно подвергается в течение дня, и определение с помощью автоматизированных методов клинической биохимии следующих биохимических параметров: глюкоза, общий холестерин, триглицериды, ЛПНП, ЛПВП, неэтерифицированные жирные кислоты, инсулин, гликированный гемоглобин, катехоламины и С-реактивный белок.

Определение липидомного профиля в плазме и клеточных экстрактах. Липидомику проводят в плазме и клеточных экстрактах эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов. Уровни отдельных аналитов будут определяться с помощью технологически продвинутого аналитического оборудования, состоящего из тройного четверного гибридного масс-спектрометра с линейной ионной ловушкой (QTRAP 5500, AB Sciex), соединенного со сверхвысокоэффективным жидкостным хроматографом (УВЭЖХ).

Будут измеряться плазменные и клеточные уровни следующих сфинголипидов: церамиды и дигидроцерамиды от C16 до C24, включая 2 ненасыщенных (C18:1 и C24:1), сфингомиелины (от C16 до C24 и один C24:1), сфингозин, сфинганин, сфингозин-1-фосфат и сфинганин-1-фосфат.

Определение уровней лейкоцитарной мРНК регуляторов генов. Из аликвоты, содержащей лейкоциты, хранящиеся ad hoc, экстрагируют общую мРНК и с помощью метода ОТ/ПЦР определяют уровни лейкоцитарной мРНК следующих генов: Cidea, Hoxc9 и Cpt1a.