Moleculaire diagnose van afstoting van allogene harttransplantaten met behulp van intra-graft gerichte genexpressieprofilering. (Nano-Heart)

Harttransplantatie (HTx) blijft de meest waardevolle therapeutische optie voor patiënten met hartfalen in het eindstadium die ongevoelig zijn voor optimale medische therapie. Ondanks belangrijke verbeteringen op het gebied van immunosuppressie en transplantatiezorg, blijven acute en chronische afstotingsgeïnduceerde allograftletsels een van de belangrijkste oorzaken van mortaliteit en morbiditeit na harttransplantatie, waardoor de levensverwachting van de ontvanger wordt beperkt. Een verbetering van het algehele beheer van afstoting blijft een onvervulde medische behoefte. Als eerste stap is een nauwkeurige diagnose van afstoting cruciaal om de patiëntenzorg te begeleiden en het management te optimaliseren.

Tegenwoordig berust de diagnose van cardiale afstoting uitsluitend op de pathologische beoordeling van endomyocardiale biopsieën (EMB’s) door het identificeren en beoordelen van cellulaire infiltraten en myocardiale schade. Hoewel er belangrijke vooruitgang is geboekt bij de standaardisatie van de afstotingsdiagnose, blijft pathologie een onvolmaakte gouden standaard, vooral vanwege de variabiliteit tussen waarnemers, steekproefbias en het gebruik van kwalitatieve of semi-kwantitatieve schalen die complexe fenotypes te simpel maken. Bovendien zijn de ernst van de ziekte, de mate van myocardletsel en het progressiestadium cruciale stukjes informatie die slecht worden vastgelegd in de huidige werkformuleringen. Al deze grenzen vormen grote obstakels voor het stellen van een nauwkeurige en betrouwbare diagnose van afstoting.

In deze context ontstond de analyse van genexpressieprofilering van verse myocardmonsters verkregen tijdens een extra-core biopsie en met behulp van een volledige transcriptoombenadering als een potentieel objectief begeleidend instrument van de pathologie om de diagnose van afstoting te verfijnen. Belangrijke nadelen hebben echter de routinematige klinische toepasbaarheid van op hele transcriptoom gebaseerde moleculaire diagnose beperkt, inclusief extra-core sampling bias, lage reproduceerbaarheid, technische en analytische zwaarte, met kosten en monsterdoorloop die niet compatibel zijn met een klinische setting.

Recente technologieën kunnen deze beperking overwinnen door analyse mogelijk te maken van hetzelfde weefsel dat wordt gebruikt voor histologische beoordeling. Gerichte moleculaire profilering die toepasbaar is op in formaline gefixeerde, in paraffine ingebedde (FFPE) endomyocardiale biopsieën kan de implementatie van moleculaire diagnose in de klinische routine mogelijk maken. Onlangs hebben we aangetoond dat het Banff Human Organ Transplant Panel (B-HOT) panel, een door het consortium goedgekeurd consensueel gericht panel met 770 genen, ontwikkeld door de Banff Molecular Diagnostics Working Group, nauwkeurig de belangrijkste moleculaire patronen van antilichaam-gemedieerde afstoting heeft vastgelegd. AMR) in allograftbiopten van het hart en kan dienen als proxy voor volledige op transcriptoom gebaseerde analyses.

Het doel van de huidige studie is daarom om genexpressiesignaturen voor AMR en acute cellulaire afstoting bij harttransplantaties te identificeren en om een ​​moleculair diagnostisch systeem voor hartafstoting te ontwikkelen en te valideren, gebaseerd op gericht transcriptoom, als een nieuw monitoringhulpmiddel voor precisiediagnostiek van allograftharten, toepasbaar op FFPE-EMB.