Molekulární diagnostika rejekce srdečního aloštěpu pomocí profilování genové exprese cílené uvnitř štěpu. (Nano-Heart)

Transplantace srdce (HTx) zůstává nejcennější terapeutickou možností pro pacienty v konečném stádiu srdečního selhání refrakterního na optimální léčebnou terapii. Navzdory významným zlepšením v imunosupresi a transplantační péči zůstávají akutní a chronická rejekce způsobená poraněním aloštěpu jednou z hlavních příčin úmrtnosti a morbidity po transplantaci srdce, což omezuje očekávanou délku života příjemců. Zlepšení celkového řízení rejekce zůstává nenaplněnou lékařskou potřebou. Prvním krokem je přesná diagnóza rejekce, která je zásadní pro vedení péče o pacienta a optimalizaci léčby.

V dnešní době se diagnostika srdeční rejekce opírá výhradně o patologické hodnocení endomyokardiálních biopsií (EMB) pomocí identifikace a klasifikace buněčných infiltrátů a poškození myokardu. I když byl učiněn významný pokrok ve standardizaci diagnózy odmítnutí, patologie zůstává nedokonalým zlatým standardem, zejména kvůli variabilitě mezi pozorovateli, zkreslení vzorků a použití kvalitativních nebo semikvantitativních škál, které příliš zjednodušují komplexní fenotypy. Závažnost onemocnění, stupeň poškození myokardu a stádium progrese jsou navíc zásadními informacemi, které současné fungující formulace špatně zachycují. Všechny tyto limity představují hlavní překážky pro dosažení přesné a spolehlivé diagnózy rejekce.

V tomto kontextu vyvstala analýza profilování genové exprese čerstvých vzorků myokardu získaných během extra-core biopsie a využívající celý transkriptomový přístup jako potenciální objektivní doprovodný nástroj patologie k upřesnění diagnózy rejekce. Nicméně důležité nevýhody omezily rutinní klinickou použitelnost molekulární diagnostiky založené na celém transkriptomu, včetně extra-core vzorkování, nízké reprodukovatelnosti, technické a analytické náročnosti, s náklady a obratem vzorku, který není kompatibilní s klinickým nastavením.

Nedávné technologie mohou toto omezení překonat tím, že umožní analýzu stejné tkáně použité pro histologické hodnocení. Cílené molekulární profilování použitelné na endomyokardiální biopsie fixované v parafinu (FFPE) ve formalínu může umožnit implementaci molekulární diagnostiky do klinické rutiny. Nedávno jsme ukázali, že panel Banff Human Organ Transplant Panel (B-HOT), konsorciem schválený konsenzuální cílený panel zahrnující 770 genů, vyvinutý Banff Molecular Diagnostics Working Group, přesně zachytil klíčové molekulární vzorce odmítnutí zprostředkovaného protilátkou ( AMR) v biopsiích srdečního aloštěpu a může sloužit jako proxy pro analýzu založenou na celém transkriptomu.

Cílem této studie je proto identifikovat signatury genové exprese pro AMR a akutní buněčnou rejekci při transplantaci srdce a vyvinout a ověřit diagnostický systém molekulární rejekce srdce založený na cíleném transkriptomu jako nový doprovodný monitorovací nástroj pro přesnou diagnostiku srdečního aloštěpu. FFPE-EMB.