Diagnóstico molecular de rejeição de aloenxerto cardíaco usando perfil de expressão gênica direcionada intra-enxerto. (Nano-Heart)

O transplante cardíaco (HTx) continua sendo a opção terapêutica mais valiosa para pacientes com insuficiência cardíaca em estágio terminal refratária à terapia médica ideal. Apesar das grandes melhorias na imunossupressão e nos cuidados de transplante, as lesões agudas e crónicas dos aloenxertos induzidas pela rejeição continuam a ser uma das principais causas de mortalidade e morbilidade após o transplante cardíaco, limitando assim a esperança de vida dos receptores. Uma melhoria no tratamento global da rejeição continua a ser uma necessidade médica não satisfeita. Como primeiro passo, um diagnóstico preciso de rejeição é crucial para orientar o atendimento ao paciente e otimizar o manejo.

Atualmente, o diagnóstico de rejeição cardíaca baseia-se exclusivamente na avaliação anatomopatológica de biópsias endomiocárdicas (BEM), identificando e graduando infiltrados celulares e danos miocárdicos. Embora avanços importantes tenham sido feitos na padronização do diagnóstico de rejeição, a patologia continua sendo um padrão-ouro imperfeito, principalmente devido à variabilidade interobservador, ao viés amostral e ao uso de escalas qualitativas ou semiquantitativas que simplificam demais fenótipos complexos. Além disso, a gravidade da doença, o grau de lesão miocárdica e o estágio de progressão são informações cruciais mal capturadas pelas atuais formulações de trabalho. Todos esses limites representam grandes barreiras para se alcançar um diagnóstico preciso e confiável da rejeição.

Nesse contexto, a análise do perfil de expressão gênica de amostras frescas de miocárdio recuperadas durante uma biópsia extra-core e usando uma abordagem de transcriptoma completo surgiu como uma potencial ferramenta objetiva complementar da patologia para refinar o diagnóstico de rejeição. No entanto, desvantagens importantes limitaram a aplicabilidade clínica rotineira do diagnóstico molecular baseado no transcriptoma completo, incluindo viés de amostragem extra-core, baixa reprodutibilidade, peso técnico e analítico, com custos e retorno de amostra que não é compatível com um ambiente clínico.

Tecnologias recentes podem superar esta limitação, permitindo a análise do mesmo tecido utilizado para avaliação histológica. O perfil molecular direcionado aplicável às biópsias endomiocárdicas fixadas em formalina e embebidas em parafina (FFPE) pode permitir a implementação do diagnóstico molecular na rotina clínica. Recentemente, mostramos que o painel Banff Human Organ Transplant Panel (B-HOT), um painel direcionado consensual aprovado pelo consórcio, incluindo 770 genes, desenvolvido pelo Banff Molecular Diagnostics Working Group, capturou com precisão os principais padrões moleculares de rejeição mediada por anticorpos ( AMR) em biópsias de aloenxertos cardíacos e pode servir como um proxy para análise baseada em transcriptoma completo.

O objetivo do presente estudo é, portanto, identificar assinaturas de expressão gênica para RAM e rejeição celular aguda em transplante cardíaco e desenvolver e validar um sistema molecular de diagnóstico de rejeição cardíaca baseado em transcriptoma direcionado como uma nova ferramenta complementar de monitoramento para diagnósticos de precisão de aloenxertos cardíacos aplicáveis ​​a FFPE-EMB.