Molekylär diagnos av hjärtallograftavstötning med användning av Intra-graft-riktad genuttrycksprofilering. (Nano-Heart)

Hjärttransplantation (HTx) är fortfarande det mest värdefulla terapeutiska alternativet för patienter med hjärtsvikt i slutstadiet som är motståndskraftig mot optimal medicinsk terapi. Trots stora förbättringar av immunsuppression och transplantationsvård är akuta och kroniska avstötningsinducerade allotransplantatskador fortfarande en av de främsta orsakerna till dödlighet och sjuklighet efter hjärttransplantation, vilket begränsar mottagarnas förväntade livslängd. En förbättring av den övergripande hanteringen av avstötning är fortfarande ett otillfredsställt medicinskt behov. Som ett första steg är en exakt diagnos av avstötning avgörande för att vägleda patientvården och optimera hanteringen.

Numera bygger diagnosen hjärtavstötning uteslutande på patologisk bedömning av endomyokardiella biopsier (EMB) genom att identifiera och gradera cellulära infiltrat och myokardskador. Medan viktiga framsteg har gjorts i standardiseringen av avstötningsdiagnosen, förblir patologin en ofullständig guldstandard, särskilt på grund av inter-observatörsvariabiliteten, provbias och användningen av kvalitativa eller semikvantitativa skalor som förenklar komplexa fenotyper. Dessutom är sjukdomens svårighetsgrad, graden av myokardskada och progressionsstadiet avgörande information som är dåligt fångad av de nuvarande arbetsformuleringarna. Alla dessa gränser utgör stora hinder för att uppnå en exakt och tillförlitlig diagnos av avstötning.

I detta sammanhang uppstod analys av genuttrycksprofilering av färska myokardprov hämtade under en extra-core-biopsi och med användning av en hel transkriptommetod som ett potentiellt objektivt följeslagare för patologi för att förfina diagnosen avstötning. Viktiga nackdelar har dock begränsat den rutinmässiga kliniska tillämpbarheten av heltranskriptombaserad molekylär diagnos, inklusive extra-core provtagningsbias, låg reproducerbarhet, teknisk och analytisk tyngd, med kostnader och provomvändning som inte är kompatibel med en klinisk miljö.

Nyare teknologier kan övervinna denna begränsning genom att tillåta analys av samma vävnad som används för histologisk bedömning. Riktad molekylär profilering tillämplig på formalinfixerade paraffininbäddade (FFPE) endomyokardbiopsier kan möjliggöra implementering av molekylär diagnos i den kliniska rutinen. Nyligen har vi visat att Banff Human Organ Transplant Panel (B-HOT) panel, en konsortiumgodkänd konsensuell riktad panel inklusive 770 gener, utvecklad av Banff Molecular Diagnostics Working Group, exakt fångat nyckelmolekylära mönster av antikroppsmedierad avstötning ( AMR) i hjärt-allotransplantatbiopsier och kan fungera som en proxy för hel transkriptombaserad analys.

Syftet med den föreliggande studien är därför att identifiera genuttryckssignaturer för AMR och akut cellulär avstötning vid hjärttransplantation och att utveckla och validera ett diagnostiskt system för molekylärt hjärtavstötning baserat på riktat transkriptom som ett nytt övervakningsverktyg för precisionsdiagnostik för hjärtallotransplantat. FFPE-EMB.