Молекулярная диагностика отторжения аллотрансплантата сердца с использованием профилирования направленной экспрессии генов внутри трансплантата. (Nano-Heart)

Трансплантация сердца (HTx) остается наиболее ценным терапевтическим вариантом для пациентов с терминальной стадией сердечной недостаточности, резистентной к оптимальной медикаментозной терапии. Несмотря на значительные улучшения в иммуносупрессии и уходе за трансплантатами, острые и хронические повреждения аллотрансплантата, вызванные отторжением, остаются одной из ведущих причин смертности и заболеваемости после трансплантации сердца, что ограничивает ожидаемую продолжительность жизни реципиентов. Улучшение общего лечения отторжения остается неудовлетворенной медицинской потребностью. В качестве первого шага точная диагностика отторжения имеет решающее значение для руководства уходом за пациентами и оптимизации ведения.

В настоящее время диагностика сердечного отторжения опирается исключительно на патологоанатомическую оценку эндомиокардиальных биопсий (ЭМБ) путем выявления и классификации клеточных инфильтратов и повреждений миокарда. Несмотря на то, что были достигнуты важные успехи в стандартизации диагностики отторжения, патология остается несовершенным золотым стандартом, особенно из-за вариабельности между наблюдателями, систематической ошибки выборки и использования качественных или полуколичественных шкал, которые чрезмерно упрощают сложные фенотипы. Кроме того, тяжесть заболевания, степень повреждения миокарда и стадия прогрессирования являются важной информацией, которую плохо улавливают существующие рабочие формулы. Все эти ограничения представляют собой основные препятствия для достижения точной и надежной диагностики отторжения.

В этом контексте анализ профиля экспрессии генов в свежих образцах миокарда, полученных во время дополнительной биопсии и с использованием подхода всего транскриптома, стал потенциальным объективным сопутствующим инструментом патологии для уточнения диагноза отторжения. Однако важные недостатки ограничивают рутинную клиническую применимость молекулярной диагностики на основе всего транскриптома, включая систематическую ошибку выборки за пределами ядра, низкую воспроизводимость, техническую и аналитическую сложность, а также затраты и оборот образцов, несовместимый с клиническими условиями.

Новейшие технологии могут преодолеть это ограничение, позволяя анализировать ту же ткань, которая используется для гистологической оценки. Целевое молекулярное профилирование, применимое к биопсиям эндомиокарда, фиксированным формалином и залитым в парафин (FFPE), может позволить внедрить молекулярную диагностику в рутинную клиническую практику. Недавно мы показали, что группа экспертов по трансплантации органов человека в Банфе (B-HOT), одобренная консорциумом согласованная целевая панель, включающая 770 генов, разработанная Рабочей группой по молекулярной диагностике Банфа, точно фиксирует ключевые молекулярные закономерности отторжения, опосредованного антителами ( AMR) в биопсиях аллотрансплантата сердца и может служить показателем для полного анализа на основе транскриптома.

Таким образом, целью настоящего исследования является выявление признаков экспрессии генов, вызывающих УПП и острое клеточное отторжение при трансплантации сердца, а также разработка и валидация системы молекулярной диагностики отторжения сердца, основанной на таргетном транскриптоме, в качестве нового сопутствующего инструмента мониторинга для точной диагностики аллотрансплантата сердца, применимого к ФФПЭ-ЕМБ.